Главная » Просмотр файлов » Osnovy_biokhimii_Nelson_i_Kokh_tom_3

Osnovy_biokhimii_Nelson_i_Kokh_tom_3 (1123315), страница 11

Файл №1123315 Osnovy_biokhimii_Nelson_i_Kokh_tom_3 (Д. Нельсон, М. Кокс - Основы биохимии Ленинджера в 3-х томах) 11 страницаOsnovy_biokhimii_Nelson_i_Kokh_tom_3 (1123315) страница 112019-05-10СтудИзба
Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 11)

Удаляли мРНК. 3. Отжигали праймер 2, меченный з'Р, с кДНК и проводили реакцию с ДНК-полимеразой, Анализ экспериментальных данных [153] Нет 18 5 3 3 Протеииаза К Нагреваииедо65 С Нагревание до 85 С Микрококконая нуклеаза 17 (5')...СТСТСТССТТТТССТТСССТСССТТТАТССАССААССАТСССАТАТТТССССААС... Праймер 1: ССТТССТАСССТАТАААССССТТС (5) Праймер рл (5')ССТТСССТСССТТТА дСТР, ЙСТР ЙТТР и ИАТР (дидезокси-АТР; см. Рис, 8-33). 4.Деиатурировали образующиеся дуплексы и разделяли их с помощью электрофореза в полиакриламидиом геле (с. 136 в т. 1).

5. Детектировали меченную "Р ДНК методом авторадио1рафии. Ученые обнаружили, что из модифицированной мРНК образовалась [ззР]ДНК длиной 22 иуклеотида, тогда как из иемодифицированной мРНК образовалась [ззР]ДНК длиной 19 иуклеотидов. б) Используя представленные ниже последовательности, объясните, почему модифицированная и иемодифицироваииая мРНК давали разные продукты. Используя тот же подход для измерения доли траискриптов, подвергающихся редактированию при различных условиях, исследователи обнаружили, что в экстрактах культуры эпителиальиых клеток (так называемых клеток Не(.а) происходит активное редактирование мРНК. Для изучения механизмов этого процесса ученые приготовили активный экстракт клеток Не(.а, как описано в таблице, и определяли его способность модифицировать мРНК рецептора АМРА.

Протеииаза К расщепляет только белки, а микрококковая иуклеаза — только ДН К. Образец Предобработке Доля редзктнроненноб мрик,% в) Используйте эти данные для доказательства того, что в процессах редактирования мРНК принимают участие белки. В чем заключается наиболее слабое место этого доказательства? Для точной идентификации редактированного основания Рютер с коллегами использовали описанную ниже процедуру. 1. Синтезировали мРНК, добавляя в реакционную смесь [а-з'Р]АТР 2. Модифицировали меченую мРНК путем инкубации с экстрактом клеток Не|а. 3.

Гидролизовали модифицированную мРНК до отдельных иуклеотидмоиофосфатов с помощью иуклеазы Р1. 4. Разделяли иуклеотидмонофосфаты методом тоикослойиой хроматографии (см. Рис. 10-24 в т. 1). 5. Идентифицировали образующиеся ззР-меченые иуклеотидмоиофосфаты методом авторадиографии. В неизмененной мРНК исследователи обнаружили только [з'Р]АМР, а в модифицированной мРНК содержался главным образом [ззр]АМР, ио также некоторое количество [ззР]1МР (инозиимоиофосфат, см.

рис. 22-34 в т. 2). г) Почему в этом эксперименте использовали [а-ззР]АТР, а ие [р-ззР]АТР или [у-ззР]АТР? д) Почему использовали [сг-з'Р]АТР а ие [а-з'Р]СТР [а-з'Р]СТР или [и-ззР]ПТР? е) Как полученные результаты исключают возможность удаления всего иуклеотида А (сахар, основание и фосфат) и его заменены иа иуклеотид 1? Далее исследователи модифицировали мРНК, меченную [2,8-'Н]АТР, и повторили описанную выше процедуру.

Метка зН содержалась лишь в моиоиуклеотидах АМР и 1МР. ~ссм ~ Часть 111. 26. Метаболизи РНК ж) Как этот результат исключает возможность удаления основания А (при сохранении сахарофосфатного остова) при замене на основание 1? Каков в этом случае наиболее вероятный механизм редактирования? з) Как замена остатка А на 1 в мРНК объясняет замену С!и на Агй в белковой последовательности двух форм рецептора АМРА? (Подсказка. См.

рис, 27-8). Литература КпеСег, $. М., Впгпа, С. М., Соос)е, Я. А., МооЬЬег!ее, К, 6 Еспеаопс, К. В. (1995) С)псапсасе гесерсог КЬСА ессссспя сп гйго Ьу епгуспагсс сопгегиоп о1 адепомпе Со Своа)пе. 5аепсв 267,1491-1494. Яопппег, В., К6Иег, М., Бргепяе!, К., 6 ЯееЬпгя, К Н. (1991) КЫА ес)сс)пх гп Ьга)п сопсгоЬ а ссесегпо палс оГюп Яосг ьп я!осапсасе-Касес) сЬаппеЬ. СеЫ 67, 11 — 19. чевидно, что открытия Гарри 1Ноллера] не объясняют, как начала изнь, и не дают ответа на вопрос, что же было до РНК. Но накапливает е больше косвенных доказательств, что на нашей планете была жизнь нас, вот от нее мы и произошли — это факт! — Джеральд Джойс, из комментария в Яс)епсе, 19 Метаболизм белка 27.1.

Генетический код 166 27.2. Синтез белков 178 27.3. Транспорт и расщепление белков 210 елки — конечный продукт большинства информационных метаболических путей. В каждый момент времени клетке требуются тысячи разных белков. Они должны синтезироваться в соответствии с потребностями клетки, доставляться к месту локализации и разрушаться, если в них больше нет нужды. Установление механизма биосинтеза бел- ка, очень сложного жизненно важного процесса, — один из самых замечательных успехов биохимии. У эукариот в синтезе белка участвует более 70 различных рибосомных белков, 20 или более ферментов для активации аминокислот, 10 или более вспомогательных ферментов и других белковых факторов для инициации, элонгации и терминации синтеза полипептидов, около 100 дополнительных ферментов для заключительного процессинга белков и 40 или более типов транспортных и рибосомных РНК.

В целом в синтезе полипептидов задействовано почти 300 разных макромолекул. Многие из этих макромолекул включены в сложные трехмерные структуры рибосом. Значение синтеза белка для клетки можно понять, если оценить клеточные ресурсы, направленные на реализацию этого процесса. На синтез белка может расходоваться до 90% химической энергии, затрачиваемой клеткой на все реакции биосинтеза. В каждой клетке бактерий, архей нли эукариот содержится от нескольких единиц до нескольких тысяч копий многих белков и молекул РНК.

В типичной бактериальной клетке 15 000 рибосом, 100 000 белковых факторов и ферментов, связанных с синтезом белка, и 200 000 молекул тРНК, которые составляют более 35% сухой массы клетки. Несмотря на то что синтез белка — очень сложный процесс, он происходит исключительно быстро. Полипептид из 100 аминокислотных остатков синтезируется в клетке ЕвсйелсЫа сой (при 37 'С) примерно за 5 секунд. Синтез тысяч различных белков в клетке регулируется таким образом, что их количество точно соответствует текущему метаболическому состоянию. Для поддержания необходимого состава и концентрации белков скорости процессов транспорта и расщепления должны соответствовать скорости синтеза. Благодаря многочисленным исследованиям мы постепенно приоткрываем занавес, скрывающий слаженный молекулярный танец, в ходе которого каждый белок занимает свое место в клетке и избирательно разрушается, если он уже не нужен.

В процессе изучения синтеза белка мы открыли мир каталитических молекул РНК, который мог существовать до того, как зародилась жизнь в ее современном виде. Исследователи установили строение бактериальных рибосом, что позволило понять процессы синтеза белка в клетке во всех изумительных подробностях. Что же они обнаружили? Белки синтезируются гигантскими РНК-ферментами! 'и' к керекрываещийся и кеперессрывающиися секесическии кад. В кепе, скриви; кмся;-„;с, синяк ив акай, Ы ! н сн»к«к ! ~ ~ Ь ~ ц ! 1 !Кк; сннкн: а С А р (: Л,': и 1 '1~ рнлюнение влииоиислот в состав полнпептндое в присутствии неретуллрныл лолииеров — РНК !Ь н ~юн.ни; «»н н, и, т«.он 11»" !нн$ 1; ° !нл ', ( н' ~ н., н ~( ! и: Реанции деааминироваиив в редантироваиии РНК, о — ;.; евр"<в< и< адово '.„' « <и « <' ~< '< < ) 17х) Часть 111.

27. Метаболизи белка на 3 — и бчконцах транскриптов. В только что синтезированной (до процессинга) мРНК человека в среднем содержится от 10 до 20 А!п-элементов. Ферменты АРАК связываются только с двухцепочечной РНК и осуществляют замену А на 1. Наличие множества А1п-элементов предоставляет большие возможности для внутримолекулярного спаривания оснований в транскрпптах, обеспечивая необходимые для действия АРАК дуплексы.

Иногда модификации изменяют кодирующие последовательности генов. Нарушения функции АРАК бывают связаны с различными неврологическими состояниями, включая латеральный амиотрофический склероз (болезнь Шарко), эпилепсию и клиническую депрессию. Геномы позвоночных содержат множество 51)ЧЕ-элементов, причем у большинства организмов много разных типов 6!ХЕ. А!п-элементы преоблада1от только у приматов.

Детальный анализ генов и транскриптов показывает, что у людей замена А па 1 происходит в 30 — 40 раз чаше, чем у мь1шей, в значительной степени благодаря присутствию многочисленных А!и-злементов. Сравнительно частые замены А на 1, а также распространенность альтернативного сплайсинга (см. рис. 26-22) — две особенности, отличающие геномы приматов от геномов других млекопитающих. Пока неясно, случайно ли произошли эти изменения или они играли важную роль в эволюции приматов и, в итоге, в появлении человека. Краткое содержание раздела 27.1 ГЕНЕТИЧЕСКИЙ КОД ° Специфическая аминокислотная последовательность белка создается путем трансляции информации, закодированной в мРНК.

Этот процесс происходит на рибосомах. ° Аминокислоты определяются кодонами мРНК, которые представляют собой нуклеотидные триплеты. Для трансляции нужны адаптерные молекулы тРНК, которые распознают кодоны и встраивают аминокислоты в соответствующем порядке в синтезируемый полипептид. ° Последовательности оснований в кодонах были установлены с помощью синтетиче- ских мРН К с известным составом и последо- вательностью. ° Кодон АТ)С указывает начало трансляции, кодоны 1)АА, 1)АС и ПСА являются сигналами окончания синтеза белка. а Генетический код вырожден: почти все аминокислоты кодируются несколькими кодо- нами.

Характеристики

Тип файла
DJVU-файл
Размер
9,35 Mb
Тип материала
Предмет
Высшее учебное заведение

Список файлов книги

Свежие статьи
Популярно сейчас
Как Вы думаете, сколько людей до Вас делали точно такое же задание? 99% студентов выполняют точно такие же задания, как и их предшественники год назад. Найдите нужный учебный материал на СтудИзбе!
Ответы на популярные вопросы
Да! Наши авторы собирают и выкладывают те работы, которые сдаются в Вашем учебном заведении ежегодно и уже проверены преподавателями.
Да! У нас любой человек может выложить любую учебную работу и зарабатывать на её продажах! Но каждый учебный материал публикуется только после тщательной проверки администрацией.
Вернём деньги! А если быть более точными, то автору даётся немного времени на исправление, а если не исправит или выйдет время, то вернём деньги в полном объёме!
Да! На равне с готовыми студенческими работами у нас продаются услуги. Цены на услуги видны сразу, то есть Вам нужно только указать параметры и сразу можно оплачивать.
Отзывы студентов
Ставлю 10/10
Все нравится, очень удобный сайт, помогает в учебе. Кроме этого, можно заработать самому, выставляя готовые учебные материалы на продажу здесь. Рейтинги и отзывы на преподавателей очень помогают сориентироваться в начале нового семестра. Спасибо за такую функцию. Ставлю максимальную оценку.
Лучшая платформа для успешной сдачи сессии
Познакомился со СтудИзбой благодаря своему другу, очень нравится интерфейс, количество доступных файлов, цена, в общем, все прекрасно. Даже сам продаю какие-то свои работы.
Студизба ван лав ❤
Очень офигенный сайт для студентов. Много полезных учебных материалов. Пользуюсь студизбой с октября 2021 года. Серьёзных нареканий нет. Хотелось бы, что бы ввели подписочную модель и сделали материалы дешевле 300 рублей в рамках подписки бесплатными.
Отличный сайт
Лично меня всё устраивает - и покупка, и продажа; и цены, и возможность предпросмотра куска файла, и обилие бесплатных файлов (в подборках по авторам, читай, ВУЗам и факультетам). Есть определённые баги, но всё решаемо, да и администраторы реагируют в течение суток.
Маленький отзыв о большом помощнике!
Студизба спасает в те моменты, когда сроки горят, а работ накопилось достаточно. Довольно удобный сайт с простой навигацией и огромным количеством материалов.
Студ. Изба как крупнейший сборник работ для студентов
Тут дофига бывает всего полезного. Печально, что бывают предметы по которым даже одного бесплатного решения нет, но это скорее вопрос к студентам. В остальном всё здорово.
Спасательный островок
Если уже не успеваешь разобраться или застрял на каком-то задание поможет тебе быстро и недорого решить твою проблему.
Всё и так отлично
Всё очень удобно. Особенно круто, что есть система бонусов и можно выводить остатки денег. Очень много качественных бесплатных файлов.
Отзыв о системе "Студизба"
Отличная платформа для распространения работ, востребованных студентами. Хорошо налаженная и качественная работа сайта, огромная база заданий и аудитория.
Отличный помощник
Отличный сайт с кучей полезных файлов, позволяющий найти много методичек / учебников / отзывов о вузах и преподователях.
Отлично помогает студентам в любой момент для решения трудных и незамедлительных задач
Хотелось бы больше конкретной информации о преподавателях. А так в принципе хороший сайт, всегда им пользуюсь и ни разу не было желания прекратить. Хороший сайт для помощи студентам, удобный и приятный интерфейс. Из недостатков можно выделить только отсутствия небольшого количества файлов.
Спасибо за шикарный сайт
Великолепный сайт на котором студент за не большие деньги может найти помощь с дз, проектами курсовыми, лабораторными, а также узнать отзывы на преподавателей и бесплатно скачать пособия.
Популярные преподаватели
Добавляйте материалы
и зарабатывайте!
Продажи идут автоматически
6384
Авторов
на СтудИзбе
308
Средний доход
с одного платного файла
Обучение Подробнее