Raznye_bilety (1123251), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Термин «patch-clamp»означает изолированный участок, возникающий за счет контакта стеклянногомикроэлектрода и участка клеточной мембраны, на котором и осуществляютсяисследования ионных токов и изменение потенциала.Принцип метода заключается в электрической изоляции участка мембраны ивнеклеточного раствора и регистрации протекающих через него токов. Для этогоприменяетсястеклянныймикроэлектрод,заполняемыйэлектролитом,междукоторым образуется плотный контакт с мембраной клетки (10 МОм и выше). Этонеобходимо по двум причинам: во-первых, для наиболее полной электрическойизоляции, а во-вторых, для снижения уровня шума записи, и при этом флуктуациишума.Модификации: Конфигурация Inside-out – если пипетку быстрым движениемотвести от клетки, то «внутренний» кусочек мембраны оторвется от клетки,внутренняя, обычно обращенная к цитоплазме, сторона мембраны окажется снаружи— в омывающем растворе, а наружная — внутри пипетки.Конфигурация«Cell-attached»–впипетку,заполненнуюрастворомэлектролита, помещается хлор-серебряный электрод, второй электрод размещаетсявнеклеточно, в омывающей жидкости.
один электрод используется для измеренияразности потенциалов,а другой – для подачи тока.на границе «мембрана — стекло»образуется контакт с сопротивлением в несколько гигаом — это так называемыйгигаомный контакт.Конфигурация Whole-cell – пипетку не отводят от клетки, а подают в неёотрицательное давление и таким образом разрушают изолированный фрагментмембраны, состав цитоплазмы вскоре оказывается идентичным составу пипеточногораствора.И др...Билет 21.Обнаружение свободных радикаловПРЯМЫЕ МЕТОДЫ-Активированная хемилюминесценция (в билетах выше). При взаимодействиирадикалов друг с другом выделяется много энергии, которая в некоторых случаяхиспускается в виде фотонов (квантов света). Интенсивность такого свечения (ХЛ)пропорциональна скорости реакции, в которой участвуют радикалы и, следовательно- их концентрации.–метод электронного парамагнитного резонанса (ЭПР).
По наличию,амплитуде и форме сигналов (спектров) ЭПР можно судить о существованиинепарных электронов в образце, определять их концентрацию, а иногда и выяснить,какова химическая структура радикалов, которые эти непарные электроны содержат.НЕПРЯМЫЕ- определение концентрации конечных продуктов реакции, а также применениеингибиторов.Ингибиторный анализРадикалы обладают высокой реакционной способностью и изучать их обычнымихимическими методами невозможно: стандартные процедуры вроде хроматографииилицентрифугированияпозволяют,правда,совершенноопределятьбесполезны.конечныеБиохимическиепродуктыреакций,ванализыкоторыхпредполагается участие радикалов, но всегда остается вопрос, а действительно лирадикалы участвовали в процессе и какие именно. Важную роль при решении такихвопросов играет так называемый ингибиторный анализ.Классическимпримеромможетслужитьприменениеферментасупероксиддисмутазы (СОД).
Этот фермент катализирует реакцию взаимодействия(дисмутации) двух супероксидных радикалов с образованием перекиси водорода имолекулярного кислорода. Если добавление СОД тормозит изучаемый процесс,значит, для его протекания необходим супероксид-радикал и остается выяснить, вкакой именно реакции этот радикал участвует.Фермента супероксиддисмутаза (СОД) катализирует реакцию:.OО- + .ОО- + 2Н+ => O2 + H2OВ присутствии другого фермента, каталазы, перекись водорода разлагается собразованием кислорода и воды:H2O2 => O2 + H2OСОД и каталаза стали широко использоваться во всех исследованиях, где изучаютроль супероксида и перекиси водорода в том или ином процессе, будь тоиндивидуальная биохимическая реакция или развитие болезни у лабораторныхживотных или человека.для выяснения роли липидных радикалов используют жирорастворимые "ловушки"радикалов, к числу которых относятся каротиноиды и токоферолы (витамин Е).
Этивещества, реагируя с радикалами L· или LOO·, обрывают цепи окисления иингибируют пероксидацию липидов. Таким же свойством обладают стероидныегормоны и тироксин. Антиоксидантное действие этих веществ проявляется и в ихвлиянии на кинетику хемилюминесценции. Широко применяется также синтетическая"ловушка" радикалов, ди-трет-бутилгидрокситолуол (ионол).Другие ловушки радикалов не так специфичны, но тоже иногда используются. Так,водорастворимые радикалы эффективно "перехватываются" аскорбиновой илимочевой кислотой.
Для "улавливания" гидроксил-радикалов (HO·) используютманнитол или бензойную кислоту, а иногда - этанол. Для выяснения участия в какомнибудь процессе реакций цепного окисления липидов (см. ниже) используютжирорастворимые "ловушки" липидных радикалов, которые ведут цепи окисления.
Кчислу таких ловушек относятся токоферол (витамин Е) и некоторые синтетическиесоединения,напримертрет-бутилгидрокситолуол(ионол).Водо-растворимыерадикалы эффективно "перехватываются" аскорбиновой или мочевой кислотой. Для"улавливания" радикалов гидроксила (HO·) используют маннитол или бензойнуюкислоту, а иногда - этанол. Надо однако сказать, что далеко не всегда ловушкиспецифичны: многие из них реагируют не только с радикалами, но и с достаточноактивными молекулами.Билет 17,23,29. ХаосТео́рия ха́оса — математический аппарат, описывающий поведение некоторыхнелинейных динамических систем, подверженных при определённых условияхявлению, известному как хаос.
Поведение такой системы кажется случайным, дажеесли модель, описывающая систему, является детерминированной.Примерамиподобныхсистемявляютсяатмосфера,турбулентныепотоки,биологические популяции, общество как система коммуникаций и его подсистемы:экономические, политические и другие социальные системы. Их изучение, наряду саналитическим исследованием имеющихся рекуррентных соотношений, обычносопровождаетсяматематическиммоделированием,эффектКоновала—распределение частот выпадения положительных результатов, или принятияправильных решений.Теория хаоса — область исследований, связывающая математику и физику.Динамическая система, процессы в которой характеризуются странным аттрактором,является хаотической системой. Динамическая система хаотична тогда и толькотогда, когда у нее существует незамкнутая фазовая траектория. В отличие отустойчивой динамической системы определить состояние хаотической системы позаданным значениям времени и начальных условий невозможно..
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
