Н.А. Юрина, А.И. Радостина - Гистология (1112199), страница 56

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 56)

Основание штатива имеет подковообразную форму. На основании закре- 241 плен тубусодержатель. В современных микроскопах он имеет изогнутую форму. Тубусодержатель заканчивается головкой. В верхней части головки имеется кольцо с нарезкой, в которое вставляется обычно наклонный т у б у с. Он может быть заменен бинокуляриой насадкой или прямым тубусом (для фотографирования объекта).

Снизу к головке тубусодержателя прикрепляется револьверная система с гнездами для ввинчивания объективов. Поворотом револьверной системы можно менять объективы во время работы. Бинокулярная насадка (бинокулярный тубус) позволяет вести наблюдение обоими глазами и дает некоторую стереоскопичность изображения. Макро метрический винт (кремальера) служит для быстрой фокусировки изображения. Это достигается вращением винта по часовой стрелке и против часовой стрелки. М и к р о м етрический винт служит для более тонкого передвижения тубуса, следовательно, для более четкой наводки на резкость. Микрометрическим винтом обычно пользуются при работе с сильным увеличением микроскопа.

Предметный столик служит для помещения изучаемого объекта. Он может быть четырехупзльным и круглым. Круглый столик может быть подвижным. Подвижные столики вращаются вокруг оси и имеют движение по двум перпендикулярным диагоналям. Диагональное движение осуществляется винтами, что позволяет подводить в центр поля зрения микроскопа нужный участок препарата. Следует иметь в виду, что диагональные винты служат не для перемещения препарата по столику (это делается рукой), а лишь для центрировки нужного места.

Предметный столик снабжен гнездами для зажимов — к л е м м, с помощью которых предметное стекло прижимается к столику. При работе с сухими объективами можно обходиться без клемм, при работе с иммерсионными объективами использование клемм обязательно. Осветительное устройство микроскопа включает зеркало, конденсор и диафрагму. Зеркало укреплено так, что ему можно придать любое положение для направления света через отверстие предметного столика на объект.

Одна поверхность зеркала вогнутая, другая — плоская. Вогнутая поверхность применяется при использовании в качестве источника света обычной лампы. При работе со специальными осветителями чаще пользуются плоским зеркалом. Конденсор состоит из двух плосковыпуклых линз, вмонтированных в общую оправу. Он служит для концентрации света на объекте. Конденсор можно перемещать вверх и вниз с помощью специального винта. Обычно при работе со слабым увеличением конденсор опущен, а прн работе с сильным он поднят. Диафрагма устроена по типу ирисовой и состоит из системы кривых пласгинок, способных сдвигаться и раздвигаться, расположенных в кольце, привинченном снизу к кольцу конденсора.

Двигая за рычажок диафрагмы, можно суживать или расширять отверстие для прохождения света, регулируя освещение объекта. 242 Порядок работы с микроскопом Начинать работу с микроскопом, необходимо проверить зеркало (ставят обычно вогнутое) и поставить объектив со слабым увеличением (8х илн 10х). Затем следует установить освещение, повернув зеркало так, чтобы поле зрения было достаточно ярким и равномерно освещенным.

При работе со слабым увеличением конденсор можно опустить. Далее следует положить препарат на предметный столик (обязательно покровным стеклом вверх!) так, чтобы изучаемый объект находился против отверстия столика. Движением макрометрического винта следует найти фокус слабого увеличения.

Изучают препарат при слабом увеличении. Следует найти участок, который целесообразно изучить при сильном увеличении и передвинуть его в центр поля зрения. Не меняя фокуса (не поднимая тубуса), поворачивают револьверное устройство и ставят сильный объектив, затем очень осторожным движением макрометрнческого винта устанавливают фокус сильного увеличения (часто бывает достаточно микрометрического винта) и микрометрическнм винтом фокусируют объект. Если необходимо использовать иммерсионный объектив, то перед тем, как переводить револьвер на большое увеличение, препарат зажимают клеммами, затем переводят револьвер на сухой большой объектив (40х) и еще раз подвигают интересующий объект в центр поля зрения или непосредственно после слабого увеличения ставят иммерсионный объектив.

Предварительно нужно капнуть на препарат каплю иммерсионного масла. Объектив опускают почти до объекта и, гляди в микроскоп, осторожно поднимают тубус, пока не появится изображение объекта. Работая с микроскопом, лучше смотреть левым глазом, прн этом другой глаз прищуривать не нужно.

Работая при сильном увеличении микроскопа, нужно постоянно держать левую руку на микрометрическом винте и все время слегка вращать микрометрическнй винт в обе стороны. Необходимость все время менять фокусировку диктуется тем, что как бы срез ни был тонок, он имеет некоторую толщину, поэтому все его структуры одновременно в фокусе находиться не могут. Постоянно слегка вращая микрометрический винт„ можно рассмотреть препарат более полно, например, проследить за ходом нервного волокна, которое в противном случае будет казаться прерывистым. По окончании изучения препарата следует перевести револьвер на слабое увеличение н затем снять препарат с предметного столика.

Нельзя выдергивать препарат из-под сильного объектива, так как объектив при этом можно повредить. Не следует прикасаться пальцем к линзе объектива или окуляра: появится отпечаток пальца, который сильно загрязнит объектив. При загрязнении объектива его нужно протереть мягкой тряпочкой, смоченной бензином, не разбирая объектива и окуляра. После работы с иммерснонным объективом его протирают чистой тряпочкой.

ЭЛЕКТРОННАЯ МИКРОСКОПИЯ Световой микроскоп обладает относительно небольшой разрешающей способностью: наименьшее расстояние, на котором две точки объекта видны в световом микроскопе как раздельные, равно 0„2 мкм, следовательно, более мелкие объекты при самых сильных увеличениях светового микроскопа не видны. Для нх изучения был изобретен электронный микроскоп, разрешающая способность которого во много раз выше.

Лучшие электронные микроскопы имеют разрешающую способность, равную 0,1 — 0,3 нм (1 мкм = 1000 нм), и позволяют получить увеличение в 150 000 раз. Принцип устройства трансмиссионного (просвечивающего) электронного микроскопа во многом напоминает принцип светового микроскопа. Вместо видимого света в электронном микроскопе используется поток электронов, которые срываются с катода и разгоняются под действием высокой разности потенциалов между катодом и анодом. Вместо стеклянных линз в электронном микроскопе используются электромагнитные линзы (электромагнитные катушки). Напряженность магнитного полн регулируют, изменяя силу тока в катушках.

Под действием электромагнитных полей расширяется или суживается поток электронов. Пройдя через отверстие в аноде, поток электронов конденсируется и направляется на объект конденсорной электромагнитной линзой (в световом микроскопе эту роль выполняет конденсор). При прохождении пучка электронов через объект электроны, попавшие на электронно-плотные участки объекта, рассеиваются и не попадают в маленькое отверстие — апертуру, расположенное над линзой объектива.

Назначение апертуры — увеличить контраст изображения. Роль объектива в электронном микроскопе выполняет электромагнитная линза объектива, формирующая увеличенное первичное изображение объекта. Конечное увеличенное изображение объекта формирует проекционная линза, соответствующая окуляру светового микроскопа. Конечное изображение проецируется на экран, покрытый люминофором. Поток электронов, взаимодействуя с люминофором, вызывает его свечение в видимой части спектра. Вместо светящегося экрана изображение может проецироваться на фотопластинку (для получения электронных микрофотографий). При работе на электронном микроскопе ультратонкие срезы, смонтированные на специальных сеточках, помещают в особый держатель, который вставляют в микроскоп. Прежде чем включить катод, получить электронный пучок и начать изучение объекта, необходимо создать высокий вакуум. Увеличение можно варьировать, изменяя электрический ток в проекционной линзе.

Фокусировку изображения производят, изменяя электрический ток в линзе объектива и наблюдая за изображением на флюоресцирующем экране. Микроскоп снабжен приспособлениями, позволяющими перемещать объект. Для получения пространственного (трехмерного) изображения 244 объекта используются р а с т р о в ы е (сканирующие) электронные микроскопы. Они как бы «ощупывакгг» электронным пучком (электронным микрозондом), скользящим по поверхности объекта, отделы~ые точки поверхности. Регистрируются не электроны, проходящие сквозь объект, как в просвечивающем микроскопе, а электроны, выбитые из атомов образца потоком электронов микро- зонда.

Характеристики

Список файлов книги