Н.А. Юрина, А.И. Радостина - Гистология (1112199), страница 45
Текст из файла (страница 45)
Весь комплекс изменений в центре регуляции и половых органах называется половым циклом. Молочные железы являются производными кожи, но функционируют в тесной связи с половой системой. Состоят из 15 — 20 долек, разделенных соединительной тканью. Это сложные альвеолярные железы. Концевые отдельг нх в нелактирующей железе имеют вид трубочек (молочные ходы), а в лактнрующей — альвеол, клетки которых секретируют по апокриновому типу молоко. Выводньге протоки начинаются молочными протоками, которые анастомозируют между собой и впадают в расширенные молочньсе синусы (резервуары молока), переходящие в крупные выводные протоки, открывающиеся на вершине соска. Функция молочной железы регулируется пролактином (лактотропный гормон гнпофиза) и окса?по?4ином (нейрогормон гипоталамуса).
Пролактин стимулирует секрецию молока железистыми клетками (лактоцитами) секреторных отделов, а окситоцин — выбрасывание его при лактацни. Контрольные вопросы Ь Расскажите о строении и функции семенника, апителиосперматогенного слоя, особенностях строения поддерживающих клеток и половых клеток на различных фазах сперматогенеза, гландулоцитов. 2. Расскажите о топографии, особенностях строения и функции семявыводящих путей. 3. Какие зкзокринные железы входят в состав мужской половой системы? Дайте их морфофункциональную харакгеристику и опишите строение и функцию простаты.
4. Каковы особенности строения и функции органов женской половой системы? 5. Каково строение яичников и какие структуры в них осуществляют репродуктивную и зндокринную функции? 6. Какие особенности строения имеют матка, маточные трубы и влагалище? 7. Расскажите об овариально-менсгруальном и половом цикле и охарактеризуйте фазы цикла. 8. Каковы строение и функция молочных желез? 1Ч.
ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА И ТЕХНИКА МИКРОСКОПИРОВАНИЯ Глава 21 ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА Для исследования под микроскопом материал должен обладать достаточной прозрачностью и контрастностью. Большинство исследуемых гистологами материалов такими природными свойствами не обладает. Прозрачность достигается приготовлением из органов и тканей тонких срезов. Для придания срезам контрастности их окрашивают. При этом для обработки материала используется ряд методов, которые можно объединить общим термином «гистологическая техника». В данном разделе даются лишь общие представления о гистологической технике. Методы, применяемые для исследования определенных тканей и органов, приводятся в соответствующих разделах общей и часпюй гистологии.
ОРГАНИЗАЦИЯ РАБОЧЕГО МЕСТА ЛАБОРАНТА-ГИСТОЛОГА Рабочий стол должен быть достаточно устойчивым, чтобы на нем можно было работать на микротоме, и хорошо освещенным. Его поверхность должна быть покрыта стеклом или пластмассой. На участке стола, где непосредственно производится окраска препаратов, под стекло целесообразно положить по одному листку белой и черной бумаги. На белом фоне лучше видны окрашенные срезы, на черном — неокрашенные. Используется самая разнообразная лабораторная посуда, но ряд ее образцов необходим в каждой гистологической лаборатории. К ним относятся посуда для дистиллированной воды, банки с притертыми пробками„бюксы, химические стаканчики, биологические стаканчики, чашки Петри, мерная посуда, колбы, кристаллизаторы, кюветы, пипетки.
Необходимы также предметные и покровные стекла. Для дистиллированной воды используется б а н к а н а ш т ат и в е с отводной труб ко й (рис. 76). Банка для дистиллированной воды емкостью 2 — 3 л должна иметь в нижней части отверстие, к которому прикрепляют резиновую трубку с зажимом.
Банку устанавливают на штативе, у основания которого под трубкой ставят сосуд для слива воды или отработанных реактивов. Вместо банки с отводной трубкой можно использовать большую колбу, в пробку которой воткнуты две стеклянные трубки: изогнутая для взятия воды и прямая для поступления воздуха. 199 за 12 Рис. 76. Лабораторная посуда. 1 — банка иа штативе для дистиллироваияой воды с опюдпой трубкой и сосудом для слива; 2— колба с двумя стеклялиыми трубками: для притока мпдука и лля взятия воды; 3, 4 — банки с притертыми пробками; 5, б — бюксы; 7 — чашка Петри; 8 — кювета лля обрабоп~и иесколькиз препаратов одновременно; 9, 1Π— вороики; П, 12 — мерные цилиндры; 13 — биологические сгакаичики в штативе (батарея дла депарафииироваипя, абезвоживаиия и пр.) (по В.
г. елисееву и др., 1967). Банки с притертыми пробкамиисполазуютсядля составления батарей для проводки материала при его заливке в парафин нли целлоидин (см. ниже), для хранения кусочков тканей в фиксирующих жидкостях, целлоидиновых блоков в 70% спирте и других целей. 200 Б ю к с ы представляют собой стеклянные стаканчики с притертыми крышками. Они могут быть низкими и высокими. Первые применяются для окрашивания целлоидиновых или замороженных срезов, хранения чистых покровных стекол и т. д., вторые — при составлении батарей для депарафинирования парафиновых срезов, для окрашивания и заключения срезов, наклеенных на предметное стекло.
Биологические стаканчики бывают цилиндрические, овальные или четырехугольные. Они снабжены крышечками. Наборы таких стаканчиков (как и высоких бюксов) вставляют в гнезда специальных штативов и используют в качестве батарей для проводки гистологических срезов, монтированных на предметных стеклах (см. ниже). К о л б ы из химического стекла различной емкости с притертыми пробками и без них используют для приготовления и хранения различных красителей и реактивов.
Для хранения и использования красителей очень удобны маленькие колбочки, в горлышко которых вместо притертой пробки вставлена пипетка. Ч а ш к и П е т р и представляют собой широкие плоские стеклянные чашки с крышками, в которых производят окрашивание свободно плавающих и наклеенных на предметные стекла срезов и другие процедуры. Для гистологической лаборатории необходима мерная посуда— цилиндры и мензурки различной емкости, а также пипетки — простые и мерные. К р и с т а л л и з а т о р ы — глубокие чашки из толстого стекла — применяют для мытья в проточной воде посуды и для других целей. Часовые с те к л а необходимы для окрашивания свободно плавающих срезов, нуждающихся в контроле под микроскопом (например, для импрегнации серебром нервной ткани).
Для канадского бальзама, в который заключают препараты (см. ниже), пригодны специальные баночки с пришлифованными крышками-колпачками и со стеклянной палочкой внутри для взятия капли бальзама. Для хранения канадского бальзама может быть приспособлена любая невысокая баночка, в пробку которой воткнута стеклянная палочка.
Для приготовления гистологических препаратов необходимы предметные и покровные стекла. Предметные стекла представляют собой стеклянные пластинки толщиной 1 — 2 мм, шириной 26 мм и длиной 76 мм, на которые помещают срезы. Покровные стекла — это пластинки толщиной 0,15 — 0,2 мм, которыми покрывают срезы в процессе их заключения. Вся лабораторная посуда и предметные стекла должны быть абсолютно чистыми. Всю посуду моют теплой водой с мылом, затем тщательно промывают проточной водой и ополаскивают дистиллированной водой.
Если посуда должна быть особенно чистой, ее обрабатывают раствором бихромата калия и серной кислоты («хромпик»). Для приготовления раствора к 1000 мл горячей воды 201 добавляют 100 — 200 мл насыщенного раствора бихромата калия (К Сг О ) и после остывания раствора приливают 100 мл концентрированйой серной кислоты. Этот раствор вливают в промываемую посуду и тут же выливают.
Посуду ополаскивают 8 — 10 раз водопроводной водой и не менее двух раз дистиллированной водой. Посуду и предметные стекла можно обрабатывать раствором бихромата калия и серной кислоты в течение нескольких дней, но в этом случае необходима последующая нейтрализация кислоты. После тщательной промывки в проточной воде посуду переносят в слабоконцентрированный раствор 1ЧаОН и затем снова промывают в течение 12— 24 ч в проточной воде и ополаскивают дистиллированной водой.
Предметные стекла после этого хранят в чистом спирте, а посуду сушат в сушильном шкафу. И н с т р у м е н т ы, используемые в гистологической лаборатории, включают пинцеты, скальпели, кровоостанавливающие зажимы, корнцанг (рис. 77), шпатели, препаровальные иглы — прямые и изогнутые, металлические и стеклянные. Стеклянные иглы необходимы при импрегнации серебром, когда металлическими иглами пользоваться нельзя. Лаборанту необходимо также иметь спиртовку, волосяную кисточку для снятия срезов с микротомного ножа, фильтровальную бумагу, иголки„нитки, плотную бумагу для этикетирования материала, лейкопластырь и карандаш по стеклу для этикетирования посуды, стеклянные иглы (иглы ежа или шипы растений) для прикалывания объектов, если их нужно зафиксировать в растянутом состоянии.
ТЕХНИКА ПРИГОТОВЛЕНИЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ Взятие материала, его фиксация и уплотнение Взятие материала. Материалом для гистологического исследования могут служить кусочки органов экспериментальных животных, материал„полученный путем прижизненного иссечения у человека кусочков тканей (биопсии), трупный материал, мазки жидких исследуемых материалов (крови, костного мозга). Перед взятием материала у экспериментальных животных их умерщвляют.
Для этого используют передозировку наркоза, внутривенное или внутрисердечное введение воздуха, обескровливание (под наркозом), декапитацию (отсечение головы). Затем тело животного быстро фиксируют в положении на спине, используя для этой цели специальные станки или оцинкованные или окрашенные доски с прибитыми по краям гвоздями, к которым привязывают животное. Для вскрытия брюшной полости кожу нижней части живота по средней линии приподнимают пинцетом и надсекают ножницами. Затем тупую браншу ножниц вводят в брюшную полость и делают разрез кожи и брюшной стенки по средней линии до грудины. На края кожи и брюшной стенки накладывают зажимы 202 г з 4 в в Рнс. 77. Инструменты.
1 — аалсееы; а — Неана, б — Колера, в — корнпаиг; 2 — скальпель; 3, 4 — преиаровальные иглы, 5, б — шпатели (по В. Г. Елисееву, 19671. Пеана и отбрасывают их в стороны, раскрывая тем самым брюшную полость. Вскрывая грудную полость, делают два разреза ребер по обе стороны от грудины. Грудину с покрывающими ее мягкими тканями удаляют.