Протокол при защите диссертации (1091763), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Научные руководители: 1. Кротов Григорий Иванович — кандидат биологических наук, Федеральное государственное бюджетное учреждение «Государственный научный центр «Институт иммунологии» Федерального медико-биологического агентства России, научный сотрудник. До 01 июля 2016 г. работал в ФГБУ АДЦ в должности начальника отдела пептидного допинга и анализа крови; 2. Ефимова !Оли я Александровна — кандидат химических наук, доцент кафедры аналитической химии им. И.П.
Алимарина, Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Московский технологический университет» (Институт тонких химических технологий имени М.В. Ломоносова) Министерства образования и науки Российской Федерации. Официальные оппонентьи 1. Згода Виктор Гаврилович - доктор биологических наук, профессор, заведующий отделом протеомных исследований и масс-спектрометрии Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Научно-исследовательский институт биомедицинской химии имени В.Н. Ореховича»; 2. Савельева Елена Игоревна — доктор химических наук, заведующая лабораторией аналитической токсикологии Федерального государственного унитарного предприятия «Научно-исследовательский институт гигиены, профпатологии и экологии человека» Федерального медико-биологического агентства (ФГУП «НИИ ГПЭЧ» ФМБА России)», дали положительныс отзывы на диссертацию.
Ведущая организации — Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Кубанский государственный университет» Министерства образования и науки Российской Федерации (ФГБОУ ВО «КубГУ»), г. Краснодар, в своем положительном заключении, составленном заведующим кафедрой аналитической химии д.х.н., проф. Темердашевым Зауалем Ахлоовичем и утвержденном ректором ФГБОУ ВО «КубГУ» к.п.н., доц.
Астаповым Михаилом Борисовичем, отмечает, диссертация Зверевой И.О. представляет собой завершенное актуальное научное исследование по разработке и внедренщо методики определения ОНДЕР и их метаболитов в моче человека методом СВЭЖХ-МС/МС. В основу разработанной методики легли данные по метаболизму ОНДЕР, полученные соискателем 3 с использованием различных моделей т х!/го и /л хп о. Показана эффективность микросомальной почечной и 89 печеночной фракций человека в качестве модельных систем /и и~го для прогнозирования метаболитов ОНКР, выявлены закономерности биотрансформации /л иго 5 наиболее широко известных препаратов ОНК.Р в человеческом организме (для 4 из 5 препаратов — впервые).
Разработан хромато-масс-спектрометрический способ определения ОНКР и их метаболитов, что позволило увеличить временное окно детектирования после приема допинга и достоверность идентификации для выявления и предотвращения использования данного вида допинга в спорте. Впервые детектирован самый долгоживущий из описанных ранее метаболитов ОНК.Р-1(2-4)ОН, мониторинг которого позволяет выявлять случаи злоупотребления ОНКР-1, который не обнаруживается в моче в исходном виде. Проведена валидация предложенной методики в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО/МЭК 17025.
а также оценка влияния физиологических особенностей человеческого организма и способов приема на метаболизм ОНКР (на примере приема препаратов ОНКР-2 и ОНКР-6). Результаты исследований Зверевой И.О. могут быть использованы в целях антидопингового контроля различными фармакологическими компаниями, занимающиеся изучением метаболизма соединений пептидной природы, аналитическими лабораториями и научными организациями.
Практическая значимость не ограничивается территорией Российской Федерации, а выходит за ее пределы, что, несомненно, увеличивает ценность представленной работы. Соискатель имеет 7 публикаций по теме диссертации, среди них 4 статьи в рецензируемых научных изданиях, рекомендованных ВАК и входящих в международную базу цитирования Ясорпя и ЖеЬ оГ Бс(енсе, все по теме диссертации. Наиболее значимые научные работы по теме диссертации: 1. 1.О.
Ухегеъа, Е.Ь1. Ветен)з1ауа, О.1. Кто!ой, О.М. КодсЬетйо~. Согпрапзоп оГ чаг1оиз ш аз!го шов! зузгешз о! !Ье пзегаЬо11агп о! зупгЬейс пор)п8 рер1Ыегс рго1ео1уйс епхугпез. Ьпгпап Ь!оод зегшп, 1и ег апг! Ыйпеу ппсгозотез апд 1(кег Я9 (гас!!оп // 3. Ргогеопт1сз. — 2016. — Уо1. 149. — Р. 85 — 97. 2. Е. Яегпеп)згауа, 1. Улегеча, О. Кгогоч, О. КойсЬепЬоч.
Яо1Ы-рЬазе ехггасбоп о!' зша1! Ь(о1о81са11у ас!1зе рер1Ыез оп саг!Пс18ез апг( ппсгое1Шюп 96-же!1 р1агез !гонт Ьшпап цг(пе // 13гпй Тезь Апа1. — 2016. — Ъ'о1. 8 — Ь1о 9. — Р. 940 — 949. 3. Р. Регго, О. Кхо1оз~, 1. Умегеъа, О. КоосЬеп1го~, Я.
Бейла. Бггисшге-ас!!чу ге!а!1опзЫР (ог рерц(Жс 8гожй Ьоппопе зесге1а8ойиез // 1)гп8 Тезь Апа1. — — 2017. — Чо1. 9. — Ь(о 1. — Р. 87— 95. 4. Е. Бепзеп(згауа, 1. Учетна, А. ТЬотаз, М. ТЬеъ 1з, О. Кто!о~, О. Ког!сЬеп1со~. 13егепп)пайоп оГ 8го~~Ь Ьоппопе ге(еаз(п8 рер!Ыез тегаЬо1йез Ы Ьшпап цппе а!1ег паза! алаш(шз1гаг1оп о! ОНКР- 1, ОНКР-2, ОНКР-6, Нехаге1ш, апс! 1рагпоге!1п // !3га8 '!"езь Апа1. — 2015. — Ъ'о1. 78 — 1чо 10.— Р. 9! 9-25.
На автореферат диссертации поступило 6 положительных отзывов. Отзывы от Скрипникова А.Ю., к.б.н.„старшего научного сотрудника лаборатории химии пептидов ИБХ РАН; от Степаненко В.Н., к.б.н., начальника опьпного биотехнологического производства ИБХ РАН; от Беловой Н.А., д.б.н., проф., заместителя декана биотехнологического факультета МГУ имени М.В.Ломоносова, замечаний не содержат. ()тзыв Колеснова А.Ю., д.т.н., руководителя лаборатории фундаментальных и прикладных исследований качества и технологий пищевых продуктов Центра коллективного пользования Российского университета дружбы народов содержит замечания о том, что: в сравнении с методом анализа СВЭЖХ-МС/МС не полностью отражено значение метода «наноВЭЖХ-МСВРя в общем методическом подходе для идентификации метаболитов и маркеров приема спортсменами соединений пептидной природы; отсугств уют сведения о возрасте добровольцев, которые участвовали в исследовании; данные по концентрациям метаболита ОНКР-2 (1-3) ОН и исходного пептида ОНКР-2 при исследовании серии проб одно~о добровольца после однократного внугривенного введения не совсем очевидны.
Отзыв Борзенко А.Г., к.х.н., доцента кафедры аналитической химии химического факультета МГУ имени М.В. Ломоносова, содержит замечания об отсутствии подробной аналитической методики определения ОНКР в моче мегодом СВЭЖХМС/МС, наличии опечаток. Отзыв от Парфенюк В.И., д.х.н., главного научного сотрудника лаборатории «Новые материалы на основе макроциклических соединений» Института химии растворов нм. Г.А. Крестова РАН, содержит замечание о незначительных опечатках.
Выбор официальных оппонентов и ведущей организации обоснован тем, что в ведущей организации проводятся исследования по смежному направлению, а выбранные оппоненты явлжотся известными экспертами, эффективно работающими в области аналитической химии, биоорганической химии и биохимии, близких к тематике диссертационной работы Зверевой И.О.. Диссертационный совет отмечает, что на основании выполненных соискателем исследований: разработан методический подход к получению и выбору наиболее диагностическн значимых метаболнтов с использованием моделей /л 1ч/го н т иго для создания методики определения ОНКР и их метаболитов в целях антидопингового контроля.
Разработана новая методика качественного определения ОНКР и их метаболнтов в моче человека методом сверхвысокопронзводительной высокоэффективной жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (СВЭЖХ-МС/МС): предложено выявлять случаи злоупотребления ОНКР не только по соединениям в исходном виде, но и по их метаболитам, что может значительно увеличить чувствительность методики, достоверность идентификации и временное окно детектирования после приема ОНКР; доказана эффективность детектирования не только соединений с допинговым эффектом в исходном виде, но и их метаболнтов, а также перспективность использования полученных результатов в практике антидопингового контроля; впервые изучены метаболнты ОНКР-1, ОНКР-2, О-НВ.Р-б, гексарелина и ипаморелина в моче человека после однократного интраназального приема препаратов волонтерами; Теоретическая значимость исследования обоснована тем, что: доказано, что анализ диагностически ценных метаболитов исходных соединений повышает эффективность антидопинговой методики; применительно к проблематике диссертации результагнвно использован комплекс экспериментальных методик для получения и идентификации метаболитов ОНКР ?и к1/го и /п 1чго, реализованный на современном высокоточном оборудовании с соответствующим программным обеспечением; изложены доказательства эффективности детектирования метаболитов ОНКР в моче человека; раскрыты связи между существующими теоретическими сведениями о влиянии химических модификаций па стабильность соединений пептилной природы н полученными экспериментальными данными; изучены метаболизм 8 соединений ОНВ.Р с использованием различных моделей /л лгго; закономерности биотрансформации ?л лго 5 наиболее широко известных препаратов ОНВР я человеческом организме (для 4 нз 5 препаратов — впервые); влияние физиологических особенностей человеческого организма и способов приема на метаболизм ОНКР; разработан хроматомасс-спектрометрическнй способ определения метаболитов ОНКР для выявления и предотвращения использования данного вида допинга в спорте; проведена валидация метрологических характеристик качественного определения ОНКР и нх метаболитов в моче человека методом СВЭЖХ-МС/МС, определены параметры селективности/специфичности, линейности, прецизионностн в условиях одного дня и между днями, предела обнаружения, степени извлечения, а также влияния компонентов матрицы ?эффекта матрицы); определены перспективы практического применения разработанного метода различными антндопинговыми н токсикологическимн лабораториями; представлена методика определения ОНКР и их метаболитов в моче человека методом СВЭЖХ-МС/МС: Значение полученных соискателем результатов исследования для практики подтверждается тем, что: Разработанная методика внесена в область аккредитации (шифр ВОР Р?.016), внедрена в практику Федерального государственного бюджетного учреждения «Антидопинговый центр» (ФГБУ АДЦ) и успешно применяется для выявления случаев злоупотребления данного вида допинга среди спортсменов; Оценка достоверности результатов исследования выявила: для экспериментальных работ: работа выполнена на высоком теоретическом и экспериментальном уровне, достоверносгь результатов не вызывает сомнений.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
