МУ (Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории. Методические указания), страница 2

Разработанная техника сбора и транспортирования биоло­гических материалов в микробиологические лаборатории позволитснизить уровень преаналитической ошибки и повысить качествоработы лабораторий по объективизации результатов.2.3. Методические указания определяют правила предохранениямедицинского персонала и пациентов от инфицирования при сбореи доставке в лаборатории проб биоматериалов, которые могут бытьобсеменены бактериями, грибами, вирусами, паразитами.2.4. Методические указания могут применяться при проведенииэпидемиологического надзора за антимикробной резистентностьювыделенных и идентифицированных в лаборатории возбудителейинфекции, оптимизации применения антимикробных препаратов имероприятий в области профилактики, контроля и сдерживания ре­зистентности на локальном, региональном и национальном уровнях.3. Общие требования к сбору проб биологическогоматериала для микробиологического исследования3.1.Для предохранения от инфицирования медицинского пер­сонала и пациентов при сборе проб биоматериалов и доставке его влабораторию необходимо:♦ не загрязнять наружную поверхность посуды при сборе идоставке проб;♦ не загрязнять сопроводительные документы (направления);♦ свести к минимуму непосредственный контакт пробы био­материала с руками медицинского работника, собирающего и до­ставляющего его в лабораторию;♦ использовать стерильные одноразовые или разрешенные кприменению для этих целей в установленном порядке контейнеры(емкости) для сбора, хранения и доставки проб;6МУ 4.2.2039—05♦ транспортировать пробы в переносках или укладках с раз­дельными гнездами;♦ соблюдать асептические условия для предотвращения ин­фицирования пациента в процессе выполнения инвазивных меро­приятий;♦ собирать пробы в стерильную одноразовую или стекляннуюпосуду (не загрязненную биоматериалом, не испорченную трещи­нами, отколотыми краями и другими дефектами).3.2.

Пробы биоматериала необходимо собирать следующим об­разом:♦ до начала антибактериальной терапии, при отсутствии такойвозможности - непосредственно перед повторным введением (при­емом) препаратов;♦ в количестве (вес, объем), необходимом для выполненияанализа, т. к. недостаточное для исследования количество биомате­риала приводит к получению ложных результатов;♦ с минимальным загрязнением материала нормальной мик­рофлорой, т.

к. ее наличие приводит к ошибочной трактовке резуль­татов, полученных, например, при исследовании мокроты, проб износа, глотки (зева), гениталий и др.3.3. При сборе пробы следят за тем, чтобы в лаборатории привскрытии емкости с биоматериалом не образовывался аэрозоль:пробы крови и других жидкостей организма аккуратно без образо­вания пены переносят из шприца в сухую и/или наполненную сре­дой (антикоагулянтом) посуду.3.4. В направлении на исследование указывают: фамилию, имя,отчество больного; год рождения; отделение, в котором он находит­ся; номер истории болезни (амбулаторной карты); диагноз; матери­ал, посылаемый на исследование, и задачи исследования; дату ивремя взятия материала (часы); антибактериальные (иммунные)препараты, если проба сдается на фоне антибиотико- и/или иммуно­терапии; фамилию, имя, отчество лечащего врача (консультанта),направляющего пробу на исследование. При направлении биомате­риалов, полученных при вскрытии, указывают также отделение, вкотором умер больной.7МУ 4.2.2039— 053.5.Перед сбором пробы, особенно при применении инвазив­ных методов, учитывается вероятность риска для пациента и поль­зы, а также значимость именно данного вида биоматериала для це­лей объективизации клинического диагноза и оценки проводимыхили планируемых лечебных мероприятий.4.

Общие требования к доставке проб биоматериалав микробиологическую лабораторию4.1. Все собранные пробы отправляют в микробиологическую ла­бораторию немедленно после получения, за исключением случаев ис­пользования емкостей с транспортировочными средами, разрешенны­ми к применению для этих целей в Российской Федерации в установ­ленном порядке.Это необходимо для:♦ сохранения жизнеспособности возбудителей и возможностивыделения микроорганизмов, требующих особых условий культи­вирования (Haemophylus и др.);♦ предотвращения избыточного роста быстрорастущих и ак­тивных микроорганизмов;♦ поддержания соотношения исходных концентраций изолятов при наличии в пробе микробных ассоциаций;♦ сокращения времени контакта пробы с некоторыми антисеп­тиками, используемыми местно, которые могут обладать антибакте­риальной активностью;♦ объективизации клинического диагноза инфекционновоспалительного заболевания и оценки результатов терапии.4.2.

Допускается использование альтернативных методов дляувеличения сроков доставки биоматериала в лабораторию.Пробы хранят в холодильнике при температуре 2— 8 °С, за ис­ключением нижеперечисленных случаев.4.2.1. Когда пробу хранят в специализированной транспортиро­вочной емкости (транспортировочная система), разрешенной к при­менению в установленном порядке, представляющей собой сте­рильную одноразовую пробирку с агаризованной или жидкойтранспортировочной средой и зондом-тампоном, вмонтированным в8МУ 4.2.2039—05пробку и стерильно упакованным вместе с пробиркой. В таких ем­костях пробы хранят при комнатной температуре (18—20 °С).Транспортировочные среды, специальные плотные с активирован­ным углем и без него, позволяют обеспечить сохранение жизнеспо­собности микроорганизмов, требующих особых условий культиви­рования, в течение 48—72 ч.Для проб на анаэробы и для фекальной флоры используют спе­циальные емкости с транспортировочной средой, пробирки со сре­дами для выделения кампилобактерий и хеликобактера, разрешен­ные к применению в установленном порядке.

Такие среды создаютанабиотическую атмосферу для микроорганизмов, что способствуетснижению их метаболизма, сдерживанию роста, препятствует ихвысыханию и накоплению продуктов жизнедеятельности.Каждую пробу, собранную в жидкую среду, тщательно пере­мешивают со средой.4.2.2. Когда кровь культивируют в бульоне, тогда после полу­чения пробу хранят в термостате при температуре 35—37 °С.Если пробы собирают в специальные емкости для последующе­го исследования с двухфазной средой, их следует хранить при ком­натной температуре (18—20 °С).4.2.3. Когда при возможном наличии температурозависимыхмикроорганизмов (Neisseria sp.) пробы оставляют при комнатнойтемпературе (18—20 °С).4.2.4.

Когда пробу хранят в емкостях с соответствующими пи­тательными средами, подготовленных в лаборатории или разрешен­ных к применению в установленном порядке при проведении:♦ бактериологических исследований - в пробирках с вмонти­рованными зондами-тампонами или без них со средой, состоящей иззабуференного физиологического раствора с глицерином для опре­деления энтеробактерий семейства Кишечных («на дизгруппу») иаэромонад.

При работе с тампонами, вмонтированными в ватномарлевую пробку, следят за тем, чтобы не замочить (не загрязнить)пробку средой и/или собранным материалом. Собранную пробутщательно перемешивают со средой. Используют также готовыепробирки со специальной плотной средой, разрешенные к примене­нию в установленном порядке;9МУ 4.2.2039—05♦ вирусологических исследований - в специальных емкостях сжидкой средой, разрешенных к применению в установленном по­рядке;♦ паразитологических исследований - пробу тщательно сме­шивают с консервантом.Пробы ликвора хранят при комнатной температуре (18—20 °С),а при проведении в лаборатории вирусологических исследований в термостате при 35—37 °С.4.3.Для транспортирования проб, исследуемых на наличие аэро­бов и факультативных анаэробов, используют:♦ одноразовые стерильные сухие пробирки с вмонтированнымзондом-тампоном (тубсеры) или емкости с транспортировочнойсредой, разрешенные к применению для этих целей в РоссийскойФедерации в установленном порядке; допускается использованиестерильных стеклянных пробирок, укупоренных газопроницаемойпробкой с вмонтированным зондом-тампоном, приготовленных влаборатории;♦ одноразовые стерильные емкости с завинчивающейсякрышкой (допускаются стеклянные с газопроницаемой пробкой) для сбора проб мочи, мокроты, фекалий, бронхо-альвеолярного ла­важа, биопсийного (кусочки ткани) материала;♦ стерильные одноразовые с завинчивающейся пробкой илистеклянные пробирки - для сбора стерильных жидкостей, бронхо­альвеолярного лаважа, отделяемого из дренажей или соскобов;♦ стерильные чашки Петри - для сбора проб волос или длятранспортирования соскобов с маркировкой дна чашки;♦ специальные стерильные носоглоточные и урогенитальныезонды-тампоны с осью из алюминия (диаметр оси - 0,9 мм) и ма­леньким тампоном из хлопка или вискозы на кончике (диаметр там­пона - 2,5 мм), вмонтированным в пробку, укупоривающую сте­рильную одноразовую стеклянную пробирку - для проб из носо­глотки на В.

pertusis и из уретры у мужчин.4.4.Для транспортирования проб, исследуемых на наличиеанаэробов, используют емкости со специальными транспортировоч­ными средами и пробирки с тиогликолевой средой; пробирки сосредами для выделения кампилобактерий и хеликобактера, разре10МУ 4.2.2039—05шенные к применению для этих целей в Российской Федерации вустановленном порядке. Пробу, собранную в жидкую среду, тща­тельно с ней перемешивают.

Для получения проб рекомендуютсяследующие приемы:♦ отделяемое дренажей, используемых для активной аспира­ции полостей, отсасывают стерильным шприцем с плотным порш­нем в объеме 2—4 мл; на заполненный шприц надевают стерильнуюиглу, закрытую стерильным ватным тампоном, удаляют из шприцаизбыток воздуха; ватный тампон сбрасывают в дезинфицирующийраствор; конец иглы вкалывают в стерильную резиновую пробку и втаком виде шприц с материалом доставляют в лабораторию;♦ содержимое очагов инфекции и полостей, получаемое путемих пунктирования, собирают в объеме 2—4 мл с помощью 2-, 5-, 10миллилигровых шприцев с плотным поршнем; из шприца удаляютизбыток воздуха, закрыв иглу стерильным ватным тампоном, кото­рый затем сбрасывают в дезинфицирующий раствор; иглу дезинфи­цируют протиранием тампоном, смоченным 70 %-м этиловым спир­том; для герметизации конец иглы вкалывают в стерильную резино­вую пробку и в таком виде шприц с материалом доставляют в лабо­раторию.При сборе большого объема материала (3 мл и более) анаэ­робные бактерии могут оставаться жизнеспособными в течение24 ч при комнатной температуре (18—20 °С).Если отделяемого всего несколько капель, его переносят изшприца в небольшую емкость или в пробирку с транспортировоч­ной средой немедленно после получения (емкости с транспортиро­вочными средами накануне получают в лаборатории).Кусочки тканей (биопсийный материал) при подозрении наанаэробную инфекцию собирают в стерильные одноразовые емко­сти с завинчивающейся крышкой (допускается - в стеклянную по­суду с притертой крышкой) и доставляют в лабораторию немедлен­но.4.5.Для транспортирования проб, исследуемых на наличие ви­русов, используют специальные емкости с жидкой средой для со­хранения вирусов.11МУ 4.2.2039— 055.

Пробы различных видов биоматериалаи среды, окружающей больногоТаблица 1Посуда, используемаядля доставки проб в лабораториюИсточник и видклинического материала1КровьИзделия,используемые для доставки пробы2Специальные транспортировочные емкостисо средой, с нейтрализаторамиантибиотиков и реагентами, разрушающимиформенные элементы крови, или без них,разрешенные к применению для этих целейв Российской Федерации в установленномпорядке; двухфазная среда во флаконахЦентральная нервная системаСтерильные одноразовые пробирки сЛикворзавинчивающейся пробкой; стерильныестеклянные пробирки с целлюлозной иливатно-марлевой пробкойМатериал при абсцессахШприц с иглой, воткнутой в стерильнуюмозга и биопсийныйрезиновую пробку; пробирка сматериал пригиогликолевой средой, закрытая стерильнойвоспалительных процессах врезиновой пробкой; транспортировочныецентральной нервнойемкости со средой для сохранениясистемеанаэробовНижние дыхательные путиБиопсийный материал легких Стерильная одноразовая емкость си трахеи; мокрота,завинчивающейся крышкой (для сборамокроты); подготовленная в лабораторииестественно откашливаемаяи индуцированная; соскобстерильная стеклянная емкостьс бронховАспират трахеи, бронхоСтерильная одноразовая емкость для сбораальвеолярный лаваж, смывымокроты с завинчивающейся крышкой;с бронховплотно закрывающаяся стерильнаястеклянная пробиркаАспират транстрахеальныйСпециальные транспортировочные емкостии легкихсо средой для анаэробов; шприц с иглой,воткнутой в стерильную резиновую пробку;емкость с тиогликолевой средой; стерильнаяодноразовая пластиковая емкость сзавинчивающейся крышкой; плотнозакрывающаяся пробирка12М У 4.2.2039— 05Продолжение табл.