Автореферат (Ветеринарно-санитарный и лабораторный контроль безопасности продуктов животного происхождения и кормов на территории Московской области), страница 4

Мы в своей работе применили два экспресс-метода.2.7.1. Экспресс метод с использованием автоматическогоанализатора TEMPOИсследования проводили на определение количества аэробных ианаэробных бактерий в продуктах за 40-48 часов с диапазоном нормируемыхзначений от 101 КОЕ/г и выше (за исключением молока и сливок сырых);колиформных бактерий (БГКП) и стафилококков в 1 грамме за 24 часа от 101КОЕ\г. Всего нами было исследовано в сравнительном аспекте 160 проб мясаразличных видов животных. Результаты, полученные в ходе исследований прииспользовании экспресс-анализатора TEMPO, в 100% случаев совпадали склассическим методом микробиологического исследования.

Но дляподтверждения наличия Escherichia coli и Staphylococcus aureus классическимметодом было затрачено 5 дней, при помощи экспресс-анализатора с учетомпробоподготовки - около 24 часов, к тому же не требовалось приготовления ирасхода питательных сред.2.7.2. Экспресс-метод с использованием мультипараметрическогоавтоматического иммуноферментного анализатора Vidas/miniVidasПроводили определение Salmonella и Listeria monocytogenes в 25гпродукта.

Нами проведены сравнительные исследования 180 проб мяса и 20проб молока. Установлена высокая чувствительность экспресс-метода,результаты исследования полностью совпали с результатами классическихмикробиологических исследований. Таким образом, установлена высокаячувствительность скрининговых методов, результаты которых коррелируют с13классическим методом, срок анализа - 24-48ч. Рекомендуется ветеринарнымлабораториям, имеющим экспресс анализаторы существлять мониторинговыеисследования пищевых продуктов на наличие Salmonella, Listeria,Staphyloccocus, КМАФАнМ и БГКП с использованием скрининговых методовисследований.2.8 Сравнительное изучение методов обнаружения БГКП(колиформ)и E.coli в мясе птицы, используемых в РоссийскойФедерации и современных методов детекции колиформ и E.coli сиспользованием хромогенных индикаторных сред компании МЕРК(Германия)Официально узаконенные в Российской Федерации методыобнаружения БГКП предусматривают использование традиционных методовбактериологии.

Их недостатком является продолжительность исследования, атакже значительные материальные затраты. В связи с изложенным, в задачинаших исследований входило сравнить используемые в ветлабораторияхметоды с современными методами детекции БГКП (колиформ) и E.coli в мясептиц и основанными на применении хромогенных питательных сред.Объектом исследования являлись ножки птицы в охлаждённом (10образцов) и замороженном (10 образцов) состоянии, приобретенные напродовольственном рынке. Указанные образцы исследовали по: ГОСТ7702.2-93(схема 1), ГОСТ Р 52816-2007 (схема 2), ГОСТ Р 50454-92 (схема3) и методомопределения колиформных бактерий с использованием хромогенныхиндикаторных сред компании Мерк (схема 4).Таблица 2.

Результаты исследования мяса птицы на наличие БГКП и E.coli.Метод исследованияКол-вокультур(колиформных)ГОСТ 7702.2.-93 Схема 1ГОСТ 52816-2007. Схема 2ГОСТ 50454-92 Схема 3Выделение колиформных бактерийиE.coliсиспользованиемхромогенных сред. Схема 442415833БГКП Кол-во культур E.coliАбс.%45779,5%12,2%12,1%21,2%Установлено, что большее количество культур удалось изолировать иидентифицировать, исследуя по схеме 3,что, видимо, связано сиспользованием жидких питательных сред. По этой схеме E.coli удалосьвыявить в 7 пробах.

По схеме 4 удалось выделить E.coli также в 7 образцах,что говорит о высокой чувствительности метода в отношении данныхбактерий. Однако количество изолированных согласно 4 схеме исследованиякультур бактерий группы кишечных палочек было наименьшим, чтовозможно, связано с высокой селективностью хромогенных питательных сред.Родовой и видовой состав колиформных бактерий, выявленных согласночетырем схемам исследований.14Таблица 3. Частота изоляции различных видов энтеробактерий прииспользовании различных схем исследования, предусмотренных НД.ВидмикроорганизмаГОСТ7702.2.-93схема 1ГОСТГОСТМР по опред.5281650454-92.бактерийи2007схема 3использованиемсхема 2сред, схема 4Количество выделенных культур абс./%колиформныхE.coliсхромогенныхKlebsiella oxetocaKlebsiellapneumoniaeEnterobacteraerogenesEnterobacter cloacae2/10%15/75%3/15%16/80%2/10%20/100%16/80%6/30%5/25%10/50%9/45%5/25%4/20%7/35%1/5%Serratia odoriferaE.coliCitrobacter sp.4/20%4/20%-8/40%5/25%-8/40%7/35%4/20%7/35%-Как видно из таблиц 2 и 3 при исследовании мяса птицы наибольшейчувствительностью по выявлению БГКП и E.coli обладают метод по ГОСТ Р50454-92 и метод с применением хромогенных сред.

Этими методамивыделено наибольшее количество БГКП и E.coli (выделены бактерии 5 родови 7 видов семейства Enterobacteriaceae).При проведении мониторинговых исследований наиболее приемлемый вплане быстроты и эффективности одновременной идентификации БГКП иE.coli является метод с применением хромогенных питательных сред (срокисследования 24 часа).

В качестве подтверждающего метода рекомендуетсяиспользовать эффективный метод по ГОСТ Р 50454-92(срок исследования до96 часов.)2.9. Анализ эпизоотической ситуации по сальмонеллезу (по даннымгодовых отчетов формы 4-вет ветеринарных лабораторий Московскойобласти за 2010 – 2013 гг.)По оценкам ВОЗ, в мире ежегодно происходят десятки миллионовслучаев заболевания людей, а более сотни тысяч случаев болезнизаканчивается смертельным исходом.Наиболее часто у животных выделялись следующие серовариантысальмонелл: S.

enteritidis (35,96%), S. typhimurium (13,7%), S. Dublin (11,2%),S.choleraesuis (10,1%), S. gallinarum – pullorum (8%). Большой процентвыявления сальмонелл серологического варианта S.enteritidis был отмечен уптицы- 698 случаев и у КРС– 124.Часто выделялись из кормов животного происхождения– S.hamburg -10;S.typhimurium–5; S.enteritidis–24; переработки молока- S.enteritidis-17; изкормов растительного происхождения выделяли сальмонеллы группы СS.typhimurium и S.

choleraesuisНа антибиотикорезистентность в ветеринарных лабораторияхМосковской области ежегодно тестируется1895±37 культур сальмонелл,выделенных от животных, что составляет 77,1% от общего количества15выделенных культур сальмонелл. Антибиотикорезистентность определялась к61 препарату.Установлена высокая устойчивость культур сальмонелл к препаратамгруппы пенициллинов (ампициллин- 61,8%, бензилпенициллин– 64,3%), кантибиотикам из группы аминогликозидов 1 поколения (неомицину– 74,2%,канамицину– 52,8%), тетрациклинам (тетрациклину– 58%, доксициклину–44,9%), циклическим пептидам (полимиксин – 48%).Даны рекомендации государственной ветеринарной службы Московскойобласти по эффективному лечению больных сальмонеллезом животных инедопущению этих микроорганизмов в пищевые продукты.2.10.

Методика расчета репрезентативного количества пробкормов для химических (остатков запрещенных и вредных веществ),микробиологических и радиологических исследованийПри анализе зарубежных нормативных документов нам не удалосьобнаружить действующую методику расчета объема проб кормов дляпроведения мониторинга их безопасности. В Российской Федерации такаяметодика также отсутствует. В связи с этим, при разработке методики намиопределены научно-обоснованные критерии на территории Московскойобласти :- количество животных на территории субъекта Российской Федерации ;- виды кормов, используемых для кормления продуктивных животных ;- объем производимых кормов ;- перечень применяемых пестицидов;- случаи выявления некачественных и опасных в ветеринарносанитарном отношении кормов ;- результаты лабораторного анализа различных рисков при использованиикормов .При составлении плана мониторинга были учтены угрозы рисков порезультатам выявленных нарушений при инспекторских проверках поконкретным предприятиям, производящим корма.Расчет количества проб, требуемых для проведения мониторингабезопасности по химическим показателям, следует проводить по каждомувиду корма следующим образом.С учетом оценки риска использовали математическую модель:У = (k1 + k2)x + b +c,где У – количество требуемых для исследования проб.Основываясь на оценке риска, по данной формуле расчета дляхозяйствующего субъекта кормовой отрасли вычисляли сумму отдельныхфакторов требовательности деятельности (∑k=(k1 + k2)), состоящую изизготавливаемых видов кормов (k2) и используемых для производства кормовсырья и компонентов (k1) в соответствии с таблицей 4.16Таблица 4.

Классификация формулы расчета по факторам требовательности(k1, k2) и коэффициенты требовательности, основанные на оценке риска.Факторытребовательности(k1и k2)k2k2k2k1Описание фактора требовательностиИзготовление ингредиентов кормовИзготовлениедобавочныхминеральныхкормовИзготовление комбикормовИспользование при изготовлении кормовбольшого количества импортных кормовыхбелковых веществСумма численных значений коэффициентовтребовательности деятельности объектаЧисленноезначениеотдельного коэффициентатребовательности,основывающеесянаоценке риска(k)0,501,002,001,00∑k=(k1 + k2)Сумма отдельных коэффициентов требовательности деятельности (k1 +k2), т.е.

угловой коэффициент деятельности (∑k), учитывали через посредствочисленных значений шкалы классов объема деятельности / объемаизготовленных кормов (х).Распределение классовой шкалы по объемам изготовления приведено втаблице 5.Таблица 5.Количество присвоенных баллов (х) в зависимости отобъема производства кормов на предприятии.Количество баллов (х) показатель класса Объем производства (тыс. тонн)предприятия*15100,55,0300,0*х – объем производства в тоннах учитывается в баллахАссортиментвыпускаемой продукции (b)несоответствий в баллах от 1 до 10 (см. таблицу 6).ивозможныерискиТаблица 6. Количество присвоенных баллов (b) в зависимости отассортимента продукции, изготавливаемой предприятием.Количество баллов (b)Количество ассортиментов кормов0,34,710,513,612580140Примечание: каждому заводу необходимо присвоить баллы, исходя изпредыдущих обследований, инспекционных контролей и ежегодных отчетовзавода.17с – корректировка по увеличению или уменьшению количества проб взависимости от результатов исследования кормов завода по предыдущемугоду (обычно в пределах 10 проб).Таким образом, используя имеющиеся данные по каждому предприятию,ведется расчет количества требуемых проб для проведения мониторингабезопасности кормов на следующий год по формуле:У = (k1 + k2)x + b +c = (0,8 + 2,0)10 + 4 + 10 = 42 пробы.2.11.