Диссертация (Комплексная оценка морфофункциональных и микробиологических показателей половых клеток быков - производителей), страница 13

Для физиологически полноценного протекания период стельности большое значение имеет достаточное содержание в кормах макро- и микроэлементов,играющих существенную роль как в кислотно-щелочном балансе, так и в биосинтезе необходимых биологически активных веществ (Денисенко В.Н., Абрамов П.Н., 2004; Бахмут Л.Н., 1994).Более того, к нарушению эмбриогенеза могут привести погрешности в содержании животных (отсутствие и ограниченный моцион, содержание глубокостельных коров и нетелей вместе с небеременными животными, нарушение зоогигиенических требований к содержанию и др.) (Гавриленко H.H., 2010).Сегоднялатентныеиранеенеизвестныеаспектысуществованиямногочисленных потенциально патогенных микроорганизмов «комменсалов»,количествокоторыхувеличиваетсяпомеремодификацииметодовидентификации их в генетическом материале быков-производителей, порождаетвозрастающую озабоченность у представителей отечественной зооветеринарнойпрактики.В настоящее время технологические процессы в области искусственногоосеменения в животноводстве развиваются в основном по двум направленным71векторам - это получение высокопродуктивных особей для отечественного скотоводства и разведение животных для биомедицинских целей (Кузьмина, Т.И.,2006).Снижение фертильности у высокопродуктивных производителей – актуальная проблема современного скотоводства, которая будет решаться благодаряразработке эксклюзивных универсальных клинических методик оценки качестваспермы, ее морфофункционального статуса и микробиологического пейзажа.Именно эти ключевые моменты представляют наибольший интерес в областисовременной эпизоотии, как источника новых и эмерджентных патогенов и болезней, передающихся половым путем при искусственном осеменении (Нежданов А.Г., 2007; Пронин Б.Г., 2008; Петров A.M., 2006; Никитин В.Я., 2009; Порфирьев И.А.

и др., 2009; Ачкасова Т., 2012; Fisher М.С., 2009.).Если обратиться к истории этого вопроса, то надо заострить внимание натом, что здоровый организм млекопитающих имеет целую систему защитныхприспособлений, поэтому деятельность микроорганизмов-сапрофитов ограничивается и не является болезнетворной. В норме эта микрофлора отсутствует вглубоких отделах половых путей самки, сообщающихся с брюшинной полостью(Козловский Е.В., П.А. Емельяненко, 1982).Многочисленными исследованиями установлено, что в половых путях коров с нормальной и нарушенной воспроизводительной функцией часто присутствуют штаммы условно-патогенной микрофлоры: E.

coli, Klebsiella, Serritia,Proteus, Pseudomonas (А.Г. Нежданов, 2005; В.И. Покровский В.И., 2006; Ш.А.Ибрагимов, 2009; O.J. Azawi O.L., 2008; М.Н. А.Г. Хмылов, 2009; Макарова О.В.,2007; Шахов. А.Г., 2005). Но у большинства животных во время течки и охотымикрофлора погибает и смывы, полученные со слизистой оболочки влагалищакоров, свободны от микроорганизмов. С другой стороны, условно патогеннаямикрофлора часто попадает в половые пути самок со спермой производителей,используемой при искусственном осеменении (Пантюхова О.И., 1971; КасумовФ.М., 1963; Логвинов Д.Д., 1972; Шкиль Н.А. с соавт., 2003; Гнездилова Л.А.,2005; И.В. Гордеева, 2005).72Изучению микробной загрязненности спермопродукции крупного рогатогоскота посвящены научные изыскания многих авторов (Харенко Н.И., 1975; Балошов Н.Г., Родина В.Н., 1980; Филатов А.В., 2004; Althouse G.C., 2008; Грязнева Т.Н., Борунова С.М., 2016).

Большинство из них признают отрицательноедействие микробов, попадающих в половые пути коров и телок при искусственном осеменении, на их воспроизводительную способность.Основным путем проникновения и распространения инфекционного агентапри искусственном осеменении является половой. Этот путь инфицированиясамый частый, когда бактерии, вирусы, простейшие, грибы проникают изнаружных отделов половых путей (влагалище, шеечный канал) непосредственнов полость матки, к плоду или к плодным оболочкам, далее в околоплодные воды(Полянцев Н.И., 2001; Грибов К.П., 2011).Особенностью, выделяемой из спермы инфекции, является экссудативнаяформавоспалительнойреакции,характеризующаясячастымгнойно-катаральным выделением из половой щели животных разной консистенции ицвета влагалищных и препуциальных эксудатов.

Развивающаяся инфекция может проявлять себя как в виде острой формы эндометрита и эпедидимита, так иперейти в латентную форму данного воспалительного процесса (Багманов М.А.,2001; Сафонов В.А., 2000; Маркелов О.В., 2003; Новикова Е.Н., 2011).Согласно данным литературы инфекция (проводником попадания являетсясперматозоид), попавшая в половые пути самки через 14-16 недель стельности.может непосредственно проникнуть к плоду из влагалища и из шеечного каналасамой матки. Плод не реагирует на инфекционные антигены, так как у него отсутствуют иммунокомпетентные клетки, иммуноглобулины, реакции преципитации, агглютинации и комплементзависимого лизиса микробных тел (ПетровА.М., 2007).Именно в это время стельности внутреннее отверстие шеечного канала матки соприкасается с амнионом плода, что обеспечивает практически беспрепятственное проникновение разного рода инфектантов в околоплодные воды(трансмембранное обсеменение околоплодных вод).

Затем плод заглатывает ин-73фицированные околоплодные воды или даже аспирирует их, что приводит к заболеванию, задержке роста и внутриутробным порокам развития, хроническойгипоксии, а в тяжелых случаях — к летальным исходам самого эмбриона (Савельева 2000; Антонов О.В., 2005; Бурнадзе Т.П.; 2003, Терехов В.И., 2000).Занесенные инфекции в половые пути самок коров (влагалище, шеечныйканал матки) за счет неблагополучной по ветеринарно-санитарному состояниюспермы быков-производителей, обеспечивают масштабную контаминацию внутренних половых органов, что впоследствии приводит к обсемененнности господствующей микрофлорой самого плода.

Клиническая картина сопровождаетсямноговодием, которое отражает наличие воспалительной реакции в амнионеплода (Берлев И.В., 2002; Бодяжина В.И., 1967; Корольков В.И., 1948; МедведевГ.Ф., 1994; Бурталкин Б.В., 2001).Характерной чертой протекания инфекционного процесса является то, что всвязи с преобладанием смешанных популяций инфекционных представителей напервых стадиях стельности - в период эмбриогенеза и плацентации увеличиваются риски повышения мышечного тонуса, что приводит к ранним абортам.Наибольшую опасность в ранние сроки беременности представляют вирусы. Огромную роль в развитии воспалительной реакции во время беременностииграют цитокины.

Известно также, что вирусы легко проникают через все барьеры к плодному яйцу, эмбриону, плоду и внедряются первоначально в цитоплазму, а далее в геном ядра клетки. В зависимости от срока развития плода,массивности обсеменения они вызывают либо губительный эффект (неразвивающаяся беременность), либо тератогенное и эмбриотоксическое повреждениеплода (Беймишева Г.М., 1993; Петров Н.И., 2004).Реснички бактерий и адгезивные молекулы взаимодействуют с рецепторамиуроэпителиальных клеток, размножаются и проникают глубоко в ткани влагалища. При этом многие виды бактерий и грибов продуцируют протеолитическиеферменты (гиалуронидаза, протеаза), растворяющие межклеточные соединения(Айламазян Э.К., 2009; Смит Н.Ч., 2014).Некоторые бактериальные токсины, вирусные белки, компоненты компле-74мента, так называемые перфорины (вещество из лизированных лимфоцитов),оказывают прямое губительное действие на плазматическую мембрану клетокэмбриона и плода (Воронин Е.С., 2002).Воздействовать на эти процессы (при современном уровне развития науки)не представляется возможным.

Поэтому основным направлением в профилактике инфицирования плода является использование доброкачественной спермыдля успешного искусственного осеменения и получения жизнеспособного плода.Основной сценарий развертывания событий после попадания сперматозоидов врепродуктивные каналы самки ярко описан в научных работах (В.С. Шипилов,1990), где основными барьерными механизмами на пути проникновения условно-патогенной микрофлоры является слизистая оболочка матки. Она работаеткак железа, выделяющая цервикальную слизь, наполненную веществами, в основе которых содержится муцин, обладающий биологически важными свойствами: абсорбции, бактерицидности, бактериостатичности (Власов С.А., 2000;Семиволос А.М., 2009; Батраков А.Я., 2003; Белкин Б.Л.

1988).Цервикальная слизь представлена веществами как высокой, так и низкойстепени вязкости, где компоненты высокой вязкости в основном муциносодержащие. Сам муцин по природе является волоконной системой, построенной изпептидного ядра и олигосахаридных белковых цепей.

Вышеупомянутые компоненты цервикальной слизи напрямую влияют на проникающую способностьсперматозоидов и способствуют их внедрению в цервикальные крипты, а в последующем продвижению по яйцепроводным путям к месту оплодотворения яйцеклетки.Особый химический состав слизи шейки матки предохраняет отнегативного влияния кислой среды влагалища и усиленного фагоцитарного процесса, тем самым обеспечивая запуск процесса капацитации сперматозоидов.Клиническая диагностика, основанная на оценки взаимодействия сперматозоидов с цервикальной слизью, является очень информативной при проведении исследований на предмет бесплодия и при проведении эмбриотрансфера (Бабушкина И.А., 1994).В работах А.Г.Нежданова, П.М.Торгуна, было отмечено, что при естествен-75ном осеменении коров сперматозоиды попадают в каудальный отдел шейки матки. Малая часть способна преодолеть барьер слизистого конгломерата, проникнуть в краниальный отдел цервикального канала и за счет его перильстатическихсокращений переместится к верхушкам рогов матки.