Диссертация (Комплексная оценка морфофункциональных и микробиологических показателей половых клеток быков - производителей), страница 10

Это свойство используют для созданиябанка спермы в целях искусственного осеменения.Все отклонения от нормального строения спермиев хорошо видны в светооптическом микроскопе.Клетки с аномальным развитием имеют следующие морфологические признаки:•нарушение толщины участка хвостовой части;•слишком большая либо слишком малая длина хвоста спермия;•хвостовой участок может быть скрученным либо изогнутым под прямымуглом, что полностью исключает его подвижность;•строение хвоста сперматозоида может иметь раздвоенный вид;•у спермия могут быть две головные части;•головная часть может быть чрезмерно большой либо слишком маленькойпо сравнению с нормой;•у клетки может отсутствовать хвостовая либо головная часть;•на теле спермия обнаруживают отсутствие клеточной оболочки;•в строении клетки вместо хроматина могут быть вакуоли;•хроматин клетки может иметь нетипичное строение;•слишком малая площадь акросомы.Если дефект сперматозоидов расположен в шейке или теле, то меняется егоформа.

Так, загнутая шейка приводит к образованию прямого угла между теломи хвостом. Средняя часть фиксируется к голове асимметрично – утолщение теланеравномерное. На теле может отсутствовать митохондриальная оболочка.При дефектах хвоста изменяется его длина. В семенной жидкости могутвстречаться половые гаметы с разной толщиной хвоста по всей его длине,наклонённым хвостом; с хвостом, расположенным под углом к телу больше 90градусов.Спермий может иметь одновременно несколько аномалий:531. Возможно, полное отсутствие цитоплазматической мембраны илиуменьшение её площади.2.

Патологии могут заключаться в полном отсутствии хвоста или его скручивании.3. Иногда в семенной жидкости обнаруживают большое количество спермиев с мелкими головками (глобозооспермия).4. В некоторых случаях при непрочной связи хвоста с телом в месте базальной пластины головка отделяется и разрушается.Чем выше процент спермиев с подобными нарушениями, тем вероятнеевозникновение проблем с зачатием, протеканием вынашивания, здоровьем новорожденного (рис. 2).По морфологической оценке, ВОЗ представленные на рис. 2 сперматозоидыпо форме головки, средней и концевой части относятся к нормальным.54Рис. 2.

Микрофотография сперматозоидов (Руководство ВОЗ)Основной комплексной функцией сперматозоида является функция оплодотворения. Она складывается из целого ряда производных функции:1. Двигательная - с помощью бичеобразных биений жгутика.2. Секреторная – синтез, выделение и траспортироовка биологически активных веществ (андрогамоны, простагландины)3.

Индукционно-апоптирующая – выделение факторов апоптоза, вызываю-55щих массовую гибель сперматозоидов при прохождении ими половых путейсамки.4. Пенетрационная – прободение оболочек яйцеклетки в ходе акросомальной реакции.5. Внесение в цитоплазму яйцеклетки:а) ядра с гаплоидным набором хромосом, б) центриолей.6. Формирование оси полярности будущей зиготы.Из патологий головок сперматозоидов при получении и криоконсервацииспермы отмечали увеличение числа сперматозоидов с деградацией акросомы врезультате преждевременной акросомной реакции, с гипоплазией акросомы (некомпактное содержимое акросомы), изменениями формы ядра, вакуолизациейхроматина.В основном при криоконсервации как эякулированной, так и эпидидимальной спермы жеребцов повреждалась акросома.

В эпидидимальной сперме онаприсутствовала у 98,5 % сперматозоидов, в эякуляте и после замораживанияоттаивания доля сперматозоидов с прореагировавшей акросомой (с деградациейакросомы) возрастала на 9,4 %.При замораживании и последующем оттаивании количество сперматозоидов с деградацией акросомы в эпидидимальной сперме увеличивалось на 5,9 %(p <0,05), в эякулированной — на 8,9 % (p <0,01).Морфологические аномалии аксонемы тесно взаимосвязаны с низкой фертильностью и бесплодием (27).Поэтому исследование целостности аксонем — один из обязательных этапов при электронно-микроскопическом исследовании эякулята. Аксонема как уэпидидимальных, так и у эякулированных сперматозоидов оказалась весьмаустойчива к криоконсервации.

От получения спермы до ее замораживания и последующего оттаивания число сперматозоидов с анормальной формой жгутикаувеличивается на 6,7 %, что существенно ниже аналогичного показателя для повреждений митохондрий и особенно акросомы.561.4. Ветеринарно-санитарный контроль качества замороженной спермыбыков-производителейВ настоящее время при разведении крупного рогатого скота широко используют технологии искусственного осеменения коров спермой, полученной отбыков-доноров из различных племенных центров отечественного и импортногопроизводства.

Так, специалисты компании WordWideSiresRussia ООО «ЦентрПлем» (компания является ведущим импортером американской генетики для КРСна российском рынке) дали детальное пояснение реальной процедуре ввоза генетического материала, поступающего в Россию из дальнего зарубежья, в частности, из США, сопровождающееся основным документом: «Ветеринарным сертификатом на экспортируемую в РФ сперму быков-производителей». Этот документ выдает таможенная служба, на основании его орган ветеринарногонадзора уже оформляет ветеринарное свидетельство на каждую партию семени.Сперма быков, расфасованная в пайеты, является готовой продукцией, импортируемой в РФ, и никаким нормативным документом в отношении ввезенного генетического материала данная процедура не сопровождается.

Требования, изложенные в «Инструкции по организации и технологии работы станций и предприятий по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных» (утв.Минсельхозом СССР 20.06.1979), не применимы к готовой и завезенной в нашустрану из вне данной продукции, а уж тем более ни один документ современнойзаконодательный базы ветеринарного надзора не регламентирует порядок ввоза,проведения исследований на наличие патогенной и условно-патогенной микрофлоры в зарубежной продукции, которая так тщательно завуалирована под полипропиленовые пайеты.В целях ветеринарного контроля за качеством спермы производителей сельскохозяйственных животных проводят ветеринарно-санитарную оценку спермы,препаратов и инструментов, применяемых при искусственном осеменении маток. Обязательным является проведение ежеквартально контрольных бактерио-57логических исследований по определению общего количества микробов в сперме, смывах из препуциальной области, на инструментах и приборах, исследование сред и препаратов на стерильность, определение их коли-титра или колииндекса (Амерханов Х.А.

2011, 2016; ГОСТ 26030-2015).Благодаря способности быков давать до 1000 доз от одного эякулята, а также широкой продаже спермодоз племенных быков как на национальном, так ина международном уровне существуют потенциальные риски распространенияинфекционных болезней (Руководство ВОЗ по исследованию и обработке эякулята человека, 2012).Современные технологии получения спермодоз предполагают использование глубокого замораживания и применения криопротекторов, что позволяет некоторым возбудителям сохранять жизнеспособность и делает использование антибиотиков недостаточно эффективным.

Все это ставит вопрос контроля биологической безопасности спермопродукции. Тестирование доноров спермы проводят в разных странах для предотвращения распространения патогенных микроорганизмов.Национальныестандартыитребованияктестированиюбыков-производителей и контролю качества спермопродукции, как правило, разрабатывают на основе комплексной оценки, учитывающей статус страны по заболеванию и оценку здоровья поголовья животных. Немаловажную роль в правильной оценке рисков распространения инфекционных заболеваний играют используемые диагностические тесты, их специфичность и чувствительность, особеннов случае выявления латентных инфекций.Требования и правила контроля и мониторинга должны постоянно совершенствоваться и обновляться по мере поступления новой информации о циркулирующих штаммах известных возбудителей, о патогенезе заболевания, используемых средствах специфической профилактики и методах диагностики, а такжес учетом обнаружения новых возбудителей (например, пестивирус Hobi-like, вирус болезни Шмалленберг) и/или появлении информации об изменении роли ранее выявлявшихся и малоизученных патогенов [173].58В настоящее время, несмотря на введение различного рода торговых ограничений, в отношении России со стороны Евросоюза и США, с их территорийнеуклонно растет ввоз зарубежного племенного материала.По данным МСХ РФ в 2017 году было поставлено 67000 голов крупного рогатого скота, в том числе 59396 голов молочных и 4343 мясных пород.В Россию по данным МСХ РФ, в 2016 году ввезено 733 тыс.

доз спермыКРС, в 2017 - 2.2 млн. доз, то есть за последние 2 года экспорт данного видапродукции вырос в 3 раза, при этом основная часть экспорта традиционно приходиться на североамериканский континент и составляет 77%, из них 52% СШАи 26% Канада.При импорте животных не составляет большой сложности отследить ихздоровье в рамках двустороннего карантина. Перед отправкой из страны экспортера животных исследуют на заболевания, прописанные в ветеринарном сертификате, согласованном между странами, заключающими сделку, при поставке вРоссию согласно единым ветеринарно-санитарным требованиям, предъявляемым к товарам, подлежащим ветеринарному контролю № 317.Согласно единым ветеринарно-санитарным требованиям, сперма должнабыть получена от животных, находящихся на благополучных территориях и исследована на ряд инфекций методами, которые приняты в стране-экспортере.

Пофакту, инфекции, прописанные в единых ветеринарно-санитарных требованиях,не всегда соответствуют обязательному перечню исследований страны экспортера. На сперму страна–изготовитель выдает ветеринарный сертификат, которыйв соответствии с действующим законодательством в РФ в области ветеринарии(утв.23.12.1999 № 13-8-01/1-2) является официальным документом, в соответствии с которым проведение дополнительных исследований не требуется.

Решение комиссии ТС №317 от 18.06.2010. еще более отягощает сложившуюся ситуацию. Так, в отличие от живых животных, сперма не включена в единый перечень товаров, подлежащих ветеринарному контролю».Таким образом, сперма, полученная от быков-производителей, находящихсяв зарубежных племенных центрах, карантинный контроль при пересечении гра-59ницы РФ не проходит и свободно поступает в товарооборот Российской Федерации.Единственный контроль спермопродукции, поступившей на территориюРоссийской Федерации на соответствие ГОСТ 26030-15 и ГОСТ 54633-11 проводится по усмотрению торгующей организации в рамках добровольной сертификации. Добровольную сертификацию генетического материала проводят коммерсанты крайне редко и далеко не в компетентно- аккредитованных лабораториях, что позволяет распространяться заболеваниям различной этиологии в отечественных стадах путем искусственного осеменения инфицированной спермой.Так, по данным ФГБУ ВНИЗЖ доказана возможность распространения со спермой нодулярного дерматита у крупного рогатого скота.Выделяют 3 категории инфекционных заболеваний при оценке степенирисков, связанных с передачей инфекционных агентов через спермопродукцию,предназначенную для искусственного осеменения коров, где выделяет 3 категории: 1 категория – инфекционные заболевания, для которых доказанной является степень риска передачи через сперму от умеренной до высокой. 2 категория – заболевания, для которых существуют свидетельства о низкой степени риска передачи через сперму. 3 категория - заболевания, для которых мало или нет информации о передаче через сперму, включающая как инфекции, для которых передача посредством искусственного осеменения вероятна и инфекции, для которых передачавозбудителя через спермопродукцию маловероятна [332].Проблема микробной контаминации спермы требует дальнейшего изучения,поскольку многие вопросы еще не разрешены.