Отзыв на автореферат (Сравнительный анализ связывающей и эстеразной активности сывороточного альбумина человека, быка и крысы)

ОТЗЫВ НА АВТОРЕФЕРАТ диссертации Шмурака Владимира Игоревича «Сравнительный анализ связывающей и эстеразной активности сывороточного альбумина человека, быка и крысы», представленной на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03,01.04 — биохимия. Среди разнообразных показателей внутренней среды организма осмотическое и онкотическое давление занимают одно из главных мест.

Величина онкотического давления колеблется в небольших пределах и на 80% определяется альбуминами вследствие их малых размеров и наибольшего содержания в плазме крови. Сывороточный альбумин - главный белок крови млекопитающих, где его концентрация может достигать 700мкМ. Альбумин связывает самые разные молекулы: воду и катионы металлов, свободные жирные кислоты и гормоны, неконьюгированныи* билирубин, соли желчных кислот, трансферрин, окись азота„аспирин и другие фармцрепараты и токсические соединения.

Альбумин во многом определяет фармако- и токсикокинетику лекарств и токсических веществ, транспортируя их к тканям- мишеням или местам биотрансформации. В токсикологических и фармакологических исследованиях важно понимать специфику видовых различий экспериментальных животных для адекватной интерпретации полученных результатов при проведении доклинических и клинических испытаний, правильного расчета дозировок для человека. Одним из принципиальных особенностей крови экспериментальных животных - крыс и мышей - является наличие в ней карбоксилэстераз, тогда как в крови человека функции карбоксилэстераз выполняет альбумин.

В то же время, эстеразная активность сывороточного альбумина изучена очень слабо, а исследования межвидовых отличий вообще не проводились. В связи с этим, актуальность темы диссертационной работы В.И. Шмурака не вызывает сомнений. Цель работы заключалась в исследовании биохимическими и био физическими методами связывающую и эстеразную активность сывороточного альбумина человека, быка и крысы в экспериментах ~л пгго и ~п лйсо. В рамках проведенного исследования были определены кинетические и равновесные характеристики взаимодействия различных альбуминов с инитрофенилацетатом, параоксоном и зоманом, установлены сайты связывания и эстеразной активности альбуминов. Впервые проведен сравнительный анализ трех видов альбумина с использованием биохимических методов в сочетании с методами молекулярного моделирования, а также сравнительный кинетический и ингибиторный анализ начальных скоростей гндролиза субстратов на двух стадиях активности 1предстационарное и стационарное состояния).

Определены константы диссоциации и проведен анализ реципрокного влияния основных сайтов альбумина при взаимодействии с негидролизуемыми лигандами (варфарин, ибупрофен), установлена высокая селективность ибупрофена к сайту Садлоу Ц и низкая селективность варфарина к сайту Садлоу 1. Методами молекулярного моделирования показано, что фосфорорганические соединения могут продуктивно взаимодействовать с сайтом Садлоу 1 альбумина.

Обнаруженные сходства и различия альбумина разных видов животных позволят точнее оценивать экспериментальные данные с учетом видовой специфики, что важно для решения задач трансляционной медицины. Впервые проведен биохимический анализ функционирования двух сайтов альбумина в сочетании с анализом т ийсо. Полученные результаты вносят существенный вклад в развитие методологии доклинических исследований фармпрепаратов. Сочетание методов теоретической и экспериментальной оценки связывающей и эстеразной активности альбумина позволит найти способы направленного воздействия на определенные сайты или молекулу альбумина в целом лигандами природного и искусственного происхождения.

Эти и другие результаты, представленные в диссертационной работе В.И. Шмурака, имеют несомненную научно-практическую значимость для клинической биохимии, фармако- и токсикокинетических исследований. Проведенные диссертантом экспериментальные исследования выполнены на современном методическом уровне, в объеме, достаточном для статистически корректных заключений. Количество публикаций по теме диссертации и апробация работы на научных форумах свидетельствуют о болыпом личном вкладе соискателя в выполнение диссертационной работы. Содержание автореферата отличается логической завершенностью и ясностью формулировок.

Текст хорошо отредактирован, наиболее важные результаты представлены в таблицах и рисунках. Вопросов и замечаний по содержанию, выводам и оформлению автореферата нет. Представленное диссертационное исследование по своей актуальности, научной новизне, практической значимости и методическому уровню исследований соответствует требованиям п.9 "Положения о присуждении ученых степеней", утвержденного Постановлением Правительства Российской Федерации от 24 сентября 2013 г. №842 (в редакции постановления Правительства Российской Федерации от 21 апреля 2016 года №335), а его автор, Шмурак Владимир Игоревич, заслуживает присуждения искомой степени кандидата биологических наук по специальности 03.01.04 — биохимия. Заведующий кафедрой клинической биохимии и лабораторной диагностики ФГБВОУ ВПО «Военно-медицинская академия им. С.М.

Кирова» МО РФ, Главный специалист Минобороны РФ по клинической лабораторной диагностике, доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАН Иванов Андрей Михайлович Специальность: 03.02.03 - микробиология г. Санкт-Петербург, ул. Академика Лебедева, 6, 194044 Ыр://ч жжлтпеда-пи1.гп, е-пза11: 1аппчпафпза11.гп. тел.

+7-812-292-32-06 .