Выписка из протокола заседания диссертационного совета (Сравнительный анализ связывающей и эстеразной активности сывороточного альбумина человека, быка и крысы)

ПРОТОКОЛ заседания диссертационного совета Д212.232.10 № 34,06-10-1-14 от 12.04.2018 Состав Диссертационного совета утвержден в количестве 33 человек. Присутствовали на заседании 24 человека из состава Диссертационного совета. Прясутствовали: Председатель Заместитель председателя Ученый секретарь совета Члены совета: Д.б.н. Александров Александр Алексеевич Д.б.н. Арутюнян Александр Вартанович Д.б.н.

Аврова Наталья Федоровна Д.б.н.Вольнова Анна Борисовна Д.б.н. Ещенко Наталья Дмитриевна Д.ф.-м.н. Касьяненко Нина Анатольевна Д,х.н. Костиков Рафаэль Равилович Д.б.н. Краснощекова Елена Ивановна Д.б.н. Кривой Игорь Ильич Д.б.н. Крутецкая Зоя Иринарховна Д.б.н. Крылов Борис Владимирович Д.б.н. Кулева Надежда Владимировна Д.б.н. Любашина Ольга Анатольевна Д.б.н Ляксо Елена Евгеньевна Д.б.н. Кокряков Владимир Николаевич Д.б.н. Негуляев Юрий Алексеевич Д.б.н. Панина Людмила Константиновна Д.б.н.

Падкина Марина Владимировна Д.б.н Самбук Елена Викторовна Д.ф.-м.н. Трусов Анатолий Анатольевич Д.б.н Черенкова Людмила Викторовна д.б.и., академик Ноздрачев Александр д.б.н. Марков Александр Георгиевич д.б.н, Алексеев Николай Петрович Данилович Повестка дня: Слушали: 1. Председателя экспертной комиссии Ещенко Н.Д. ( состав комиссии:: д.б.н. Кокряков В.Н., специальность 03.01.04 - биохимия, д.б.н. Ещенко Н.Д,, специальность 03.01.04- биохимия; д.б.н.

Алексеев Н.П., специальность 03.03.01 — физиология) о диссертации Шмурака Владнмцра Игоревича на тему: «Сравнительный анализ связывающей и эстеразной активности сывороточного альбумина человека, быка и крысы», представленной на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.01.04 — биохимия, выполненной в Федеральном государственном унитарном предприятии « Научно-исследовательский институт гигиены, профпатологии и экологии человека» ФМБА. Постановили: 1, Утвердить заключение комиссии по решению вопроса о допустимости выявленного объема текстовых совпадений (7«о) между текстом диссертации Шмурака Владимира 1.Принятие к защите диссертации Шмурака Владимира Игоревича на тему: «Сравнительный анализ связывающей и эстеразной активности сывороточного альбумина человека, быка и крысы», представленной на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03,01.04 - биохимия, утверждение официальных оппонентов и ведущей организации, назначение даты защиты.

Игоревича «Сравнительный анализ связывающей и эстеразной активности сывороточного альбумина человека, быка н крысы», представленной на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.01.04 — биохимия, и источниками, авторство которых установлено, и признать диссертацию оригинальной авторской работой. 2. Утвердить заключение комиссии по решению вопроса о соответствии диссертации Шмурака Владимира Игоревича «Сравнительный анализ связывающей и эстеразной активности сывороточно~ о альбумина человека, быка и крысы» профилю совета Д,212.232.! 0 и заявленной теме.

3. Принять диссертацию на соискание ученой степени кандидата биологических наук к защите. 4. Назначить официальными оппонентами: ФИО Ученая степень Должность и место работы Ученое звание Стефанова кандидат Василия биологических Евгеньевича на к Заведующий кафедрой биохимии биологического ак льтета СПбГУ доцент профессор Заведующий лабораторией ФГБУН «Научно- исследовательский институт общей патологии и патофнзиологии» Орехова доктор Александра биологических Николаевича наук 5. Утвердить в качестве ведущей организации Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Инстиэут экспериментальной медицины» ФАНО России б.

Назначить защиту диссертации на 21.06.2018, в 19.00 7. Утвердить список организаций и лист рассылки автореферата. 8. Рекомендовать представленный вариант автореферата на правах рукописи к печати. Результаты голосования: «за» - 24, «против» - нет, «воздержался» - нет. Решение Диссертационного совета принято единогласно. Председатель Диссертационного сов Д 212.232.

! О. академик РАН ачев Ученый секретарь Диссертационного Д 212.232.10, д.б.н., профессор сеев ЗАКЛЮЧЕНИЕ Экспертной комиссии Совета Д.212,232.10 по защите диссертаций на соискание ученой степени кандидата наук, на соискание ученой степени доктора наук на базе ФГБУ «Санкт-Петербургский государственный университет» по диссертационной работе Шмурака Владимира Игоревича «Сравнительный анализ связывающей и эстеразной активности альбумина человека, быка и крысы», представленной на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.01.04 — биохимия Экспертная комиссия Совета Д.212.232.10 в составе председателя комиссии - доктора биологических наук, профессора Ещенко Натальи Дмитриевны (специальность 03.01.04 биохимия), и членов комиссии - доктора биологических наук, профессора Кокрякова Владимира Николаевича (специальность 03.01.04 биохимия), доктора биологических наук, профессора Алексеева Николая Петровича (специальность 03.03.01 физиология), рассмотрела рукопись кандидатской диссертации Шмурака В.И.

на тему «Сравнительный анализ связывающей и эстеразной активности альбумина человека, быка и крысы», выполненную в Федеральном государственном унитарном предприятии «Научно-исследовательский институт гигиены, профпатологии и экологии человека» Федерального медико-биологического агентства.

На основании ознакомления с диссертацией и состоявшегося обсуждения экспертная комиссия сделала следующее заключение. Представленная диссертационная работа 07 сентября 2017 года прошла предзащиту на Ученом Совете Федерального государственного унитарного предприятия «Научноисследовательский институт гигиены, профпатологии и экологии человека» Федерального медико-биологического агентства, Диссертационная работа Шмурака И.В. посвящена исследованию кинетических и равновесных характеристик сывороточного альбумина человека, быка и крысы методами ферментативной кинетики т И~го, а также методами молекулярного моделирования т яйсо. Научная новизна работы определяется тем, что впервые с тремя видами альбумина проведен сравнительный кинетический и ингибиторный анализ начальных скоростей взаимодействия с двумя субстратами - и-нитрофенилацетатом и параоксоном - в предстационарном и стационарном состояниях двух сайтов Садлоу альбумина, Методами т и(го и т зйсо впервые изучены процессы взаимодействия альбумина с параоксоном и четырьмя стереоизомерами зомана.

Проведен анализ реципрокного влияния основных сайтов альбумина при взаимодействии с негидролизуемыми лигандами (варфарин, ибупрофен). Методология проведенного исследования четко выражена, обоснована и соответствует поставленным задачам. Автором установлено, что функциональные характеристики обоих сайтов Садлоу альбумина крысы и человека близки между собой и существенно отличаются от характеристик бычьего альбумина. Предложена схема и математическая модель для описания эстеразной активности альбумина, впервые проведен биохимический анализ функционирования двух сайтов альбумина в сочетании с анализом т яйсо.

Основные положения, выносимые на защиту, следующие; 1) Предложена схема и математическая модель для описания каталитического и стехиометрического взаимодействия альбумина с субстратами эстераз. 2) Функциональные характеристики ЧСА и КСА отличаются между собой в меньшей степени по сравнению с функциональными характеристиками БСА. Ьолее консервативными являются ЬСА по отношению к КСА и ЧСА, а также сайт Садлоу 1! по отношению к сайту Садлоу 1 всех исследованных видов альбумина.

3) Эффективность фосфорилирования сайта Садлоу П всех трех видов альбумина при взаимодействии с параоксоном выше эффективности ацетилирования этого сайта при взаимодействии с п-нитрофенилацетатом. 4) Исследование взаимодействия альбумина с зоманом методом остаточного ингибирования ацетилхолинэстеразы позволяет оценить аффинность к двум сайтам альбумина. 5) Применение биохимических методов анализа в сочетании с методами молекулярного моделирования позволяет определить сайты и характер взаимодействия эфирных субстратов с альбумином. Теоретическое значение диссертационного исследования Шмурака В.И. заключается в обнаружении функционального сходства и различий двух сайтов Садлоу сывороточного альбумина человека, быка и крысы. Практическая ценность диссертационного исследования Шмурака В.И.

заключается в совершенствовании методологии токсикологических и фармакологических исследований. Полученные данные позволят точнее оценивать результаты экспериментальных исследований с учетом видовой специфики, что важно в свете задач трансляционной медицины, т.к. понимание особенностей фармако- и токсикокинетики многих соединений в организме грызунов требуется для адекватной интерпретации их кинетических закономерностей в организме человека.

Сочетание методов теоретической и экспериментальной оценки (псевдо)эстеразной активности альбумина позволит найти способы направленного воздействия на определенные сайты или молекулу альбумина в целом лигандами природного и искусственного происхождения, повышая таким образом эффективность антидотной терапии и терапии различных заболеваний. Личный вклад автора в проведение исследования состоит в личном участии в проведении всех этапов работ: в организации и проведении экспериментов., планировании работ, подборе и оптимизации методов исследования, теоретическом обобщении и статистической обработке результатов, подготовке к публикации статей, представлении результатов на конференциях.