Автореферат (Фитохимическое исследование клубней топинамбура и создание лечебно - профилактических средств на его основе), страница 2

Статистическую обработку результатов исследованийосуществляли в соответствии с ГФ ХΙΙΙ, ОФС 1.1.0013.15. Микроскопическийанализ сырья проводили в соответствии с техникой и требованиями,описанными в ГФ ХΙΙΙ ОФС 1.5.1.0003.15.6Достоверность научных положений и выводов. Научные положения,выводыирекомендацииоснованынадостаточномколичествеэкспериментальных исследований со статистической обработкой результатов спомощью программы «Мicrosoft Exel 2010b Statistica 8,0».

Достоверностьпервичных материалов подтверждена их экспертной оценкой. Научныеположения, полученные выводы и практические рекомендации достаточнообоснованы и логически вытекают из результатов исследования. Висследовании использован достаточный объем информационных источников,как отечественных, так и иностранных авторов.Апробация результатов исследования. Основные результаты работыдоложены на: годичной научно-практической конференции ТГМУ им.

Абуалиибни Сино (Душанбе, 2013, 2014); научных конференции молодых ученых истудентов ТГМУ им. Абуали ибни Сино с международным участием (Душанбе,2013, 2014, 2015,); годичной научно - практической конференции«Современные достижения химии» посвященной 50 - летию факультета химииГПУТ им. С. Айни (Душанбе, 2013). Научной конференции с Международнымучастием, посвященной 50 - летию Ярославской медицинской академии(Ярославль, 2014).Диссертация апробирована 25.12.2015 на межкафедральной комиссии потеоретическим медицинским дисциплинам ТГМУ им. Абуали ибни Сино и намежкафедральной конференции ФБОУ ВО Первый МГМУ им.

И.М. Сеченова29.06.2016.Личный вклад автора. При непосредственном участии автораопределены цели и задачи работы, разработаны методические подходы к ихвыполнению, проведен сбор, обобщение и анализ литературных данных.Диссертант принимал непосредственное участие при разработке методикидентификации и количественного определения действующих веществ висследуемых объектах и разработке технологии лекарственных форм. Авторупринадлежитведущаярольприпроведенииэкспериментальныхтехнологических исследований, статистической обработке и анализеполученных результатов, написании публикаций и нормативной документации.Диссертация и автореферат написаны лично автором.Внедрение результатов исследования. На основании проведенныхисследований разработаны и утверждены Фармакопейным комитетомРеспублики Таджикистан ФС на клубнях топинамбура высушенные7«Топинамбура клубни» (ФС РТ – 23 – 0004 – 15 от 17 апреля 2015 г), «Сухойэкстракт из клубней топинамбура» (ВФС ТJ – 23 – 0004 – 16 от 21 июня 2016 г)и «Топинамбура экстракт сухой, капсулы - 0,600 г» (ФС – 23 – 0005 – 16 от 02сентября 2016 г);Также разработаны и составлены проекты ФС «Клубни топинамбурасвежие», «Настойка гомеопатическая матричная из свежих клубнейтопинамбура».

Проекты разработанных документов приняты для рассмотрения(письмо ФГБУ НЦ ЭСМП Минздрава РФ № 54.03.06 – 28/18 от 02. 07. 2015).Материалы исследования внедрены в учебный процесс кафедрыфармацевтической технологии Таджикского государственного медицинскогоуниверситета им. Абуали ибни Сино Министерства здравоохранения исоциальной защиты населения Республики Таджикистан (ТГМУ) по темам«Экстракция, технология изготовления, направления совершенствования иоценка их качества» и «Медицинские капсулы» (Акт внедрения от 25-04-2016 г).Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Научныеположения диссертации соответствуют паспортам научных специальностей14.04.01 – Технология получения лекарств и 14.04.02 - Фармацевтическаяхимия, фармакогнозия.

Результаты проведенного исследования соответствуютобластям исследования специальностей, конкретно пунктам 3 – 4, 7 – 8паспорта специальности «Технология получения лекарств», а также пунктам 2– 4, 6 и 7 паспорта специальности «Фармацевтическая химия, фармакогнозия».Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтическойнауки. Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематикой ипланом научных исследований Таджикского государственного медицинскогоуниверситета им. Абуали ибни Сино (номер государственной регистрации0110РК069 от 16.11.2012).Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 231страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы,главы «Объекты исследования», четырех экспериментальных глав,библиографии 172 из них 142 наименований отечественных, 30 на иностранныхязыках.

Работа иллюстрирована 38 рисунками и 48 таблицами, содержит 7приложении.Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ, изних 2 статьи - в профильных журналах, включенных в перечень ведущихпериодических изданий ВАК РФ.8ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫОбъекты и методы исследованияОбъектом исследования служили клубни топинамбура культивируемого вДангаринском районе Республики Таджикистан, заготовленное в 2013 – 2015г.г., собранное весной или поздней осенью, отмытое от земли, освобожденное откорней, листьев и стеблей, высушенные в соответствии с требованиями сборника«Методические указания по сбору, сушке и хранению сырья -2007».Преобладающая форма клубней – грушевидная, продолговато-овальная,веретеновидная.

Окраска клубней – белая, фиолетово - красная, светло-коричневая.Для микроскопического исследования готовили микропрепараты, которыеизучали под микроскопам МБН-3. Результаты документировали с помощьюфотоаппарата «Зенит» с микронасадкой МФН-12.Исследованиеаминокислотногосоставапроводилиспомощьюаминокислотного анализатора “Хитачи-835” (Япония), по стандартной методике.Качественный состав и количественное содержание углеводов изучалиметодами ВЭЖХ и капиллярного электрофорезаОпределение аскорбиновой кислоты. Использовали хроматограф высокогодавления, укомплектованной системой градиентной подачи элюента и УФдиодным детектором. Условия хроматографирования: - колонка 250×4,6 мм,сорбент Kromosil 100–5С18 с размером частиц 5 мкм, температура термостата 380С, длина волны детектирования 280 нм; подвижная фаза: ацетонитрил 0,01 %раствор фосфорной кислоты (1:500), градиентный режим элюирования,скорость элюирования 1мл/мин.

Определение дубильных веществ проводилиперманганатометрическим методом.Идентификацию инулина и фруктозы в клубнях топинамбура проводилиметодом ТСХ на пластинках «Сорбфил - ПТСХ-АФ-А-УФ» в системерастворителей: изопропанол- вода (4:1): проявитель: 20 % спиртовый раствортимола и кислота серная разведённая.Для количественного определения фруктозанов и фруктозидов(полисахаридов) использовали спектрофотометрический метод, основанный нареакции полисахаридов со спиртовым раствором резорцина в кислой среде.Для количественного определения сапонинов выбранфотоколориметрический метод, в основе которого лежит способность сапонинов9давать окрашивание с кислотой серной концентрированной. Стандартом служил0,025% раствор эсцина в 95% этиловом спирте.Настойку гомеопатическую матричную готовили из свежих клубнейтопинамбура (влажностью более 80%) по методу 2 ОФС 42-0008-02.

«Настойкигомеопатические матричные» способом мацерации с 86% (по массе) этанолом.Анализ настойки матричной гомеопатической проводили по методикам,использованным для анализа клубней топинамбура и методикам ОФС 42-0008-02.Для получения сухого экстракта использовали высушенное сырье.Гранулирование экстракта осуществляли на универсальном смесителегрануляторе Glat GmbH, ГерманияТест Растворение проводили на приборе «Лопастная мешалка», скоростьвращения - 50 об/мин, температура - 37 ± 1°С. В качестве среды растворенияиспользована 0,1М раствор хлористоводородной кислоты, объем - 500 мл.Анализ качества сухого экстракта проводили в соответствии стребованиями ОФС 1.5.3.0007.15 (ГФ ХIII).Содержание влаги определили гравиметрически после высушивания всушильном шкафу Binder FЕD 53, Германия, при 105 °С.Сыпучесть, насыпной объем, определяли в соответствии со статьей«Степень сыпучести порошков» ОФС.1.4.2.0016.15 (ГФ ХIII).

Насыпной объемопределяли на приборе SVM 121 Егweka.Результаты исследованияВ связи с недостаточностью изученности, исследовали анатомо диагностические признаки клубней топинамбура, которые приведены на рисунке 1.112241423Клубни топинамбура. ПоперечныйКлубни топинамбура.срез через сосудисто-волокнистыеПродольный срез. Сосуды (1) ипучки, ув.

х 70. 1 – эндодерма,инулин (2) в паренхиме сердцевины.2 – флоэма, 3- ксилема,Ув. х 125.4 – секреторные каналы.10Рис. 1. Основные анатомо – диагностические признаки клубней топинамбура.В паренхиме коры, в ксилеме сосудисто-волокнистых пучках и в паренхимесердцевинычастовстречаютсясекреторныеканалысжелто-бурымсодержимым, на месте среза, иногда, образующих каплю вытекшего секрета.Определение аминокислот и углеводовРезультаты качественного и количественного определение аминокислот вклубнях топинамбура проводили с помощью аминокислотного анализатора, рис.2Рис.2.

Хроматограмма извлечения из клубней топинамбураНа рисунке 2 видно, что в образцах клубней топинамбура содержится 19аминокислот, их содержание колеблется от 4,83 до 6,14%. Преобладающимиаминокислотами являются аспарагиновая кислота, (от 9 до14%), глютаминоваякислота (от 12 до 18%), пролин (от 7 до 13% общего содержания аминокислот).РезультатыFile NameTypePoints CountDate StampDateTitleSampling RateопределениясвободныхE:\AutoChrom300112\CH-RID\edit\#11\RID1A.chHPLC166726-Feb-14, 20:19:5126 Feb 2014 20:31:56LC DATA FILE138.8879углеводовметодомВЭЖХпредставлены на рис 3, 4 и в табл.

1.Sample Data Sample; 1uL;InstrumentInstrument 1; RI detector; 0.46x25cm Column Kromasil 100-5NH2 (5um), 25°C 1 ml/min.Mobile Phase AW aterMobile Phase BMeCNMobile Phase CW ater; 20mM TBA-phosphatepH Mobile Phase C 4Mobile Phase DMeCN/H2O (70:30 v/v); 1mM Ammonium AcetateGradient B0BGradient C0CGradient D100DRID1A.ch4000std350030002500sucroseglucose1500fructoseGlycerol20000.000.00100050000No.12341NameGlycerolfructoseglucosesucrose2345678910Retention Time (min)tR Peak Area (Y units/ms)Area Percent4.557996637.00025.1885.987863408.50024.7686.467213630.00022.7227.408674190.00027.322Рис.