Автореферат (Сравнительная иммуноморфологическая и спектроскопическая характеристика опухолей почек)

На правах рукописиАлександров Николай СергеевичСРАВНИТЕЛЬНАЯ ИММУНОМОРФОЛОГИЧЕСКАЯ И СПЕКТРОСКОПИЧЕСКАЯХАРАКТЕРИСТИКА ОПУХОЛЕЙ ПОЧЕК14.03.02 – Патологическая анатомияАВТОРЕФЕРАТдиссертации на соискание ученой степеникандидата медицинских наукМосква – 2019Работа выполнена в ФГАОУ ВО Первый Московский Государственный медицинскийуниверситет им.

И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)Научный руководитель:Доктор медицинских наук, доцентКириллов Юрий АлександровичОфициальные оппоненты:Забозлаев Федор Георгиевич, доктор медицинских наук, профессор, ФГБУ «Федеральныйнаучно-клинический центр ФМБА России", патологоанатомическое отделение, заведующийотделением.Столяревич Екатерина Сергеевна, доктор медицинских наук, ГБУЗ "Городская клиническаябольница №52 ДЗМ", патологоанатомическое отделение, врач-патологоанатом.Ведущая организация: ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центронкологии имени Н.Н.

Блохина» Министерства Здравоохранения Российской ФедерацииЗащита диссертации состоится «___» «__________» 2019 г. в _____ часов на заседаниидиссертационного совета Д 208.040.01 при ФГАОУ ВО Первый Московский государственныймедицинский университет им. И.М.Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет) поадресу: 119991 Москва, Трубецкая ул., д.8, стр. 2.СдиссертациейгосударственныйможноознакомитьсямедицинскийвуниверситетЦНМБим.ФГАОУИ.М.ВОСеченоваПервыйМосковскийМинздраваРоссии(Сеченовский Университет) по адресу: 119034, г. Москва, Зубовский бульвар, д.37/1 и на сайтеwww.sechenov.ruАвтореферат диссертации разослан «____» «________________» 2019 г.Ученый секретарь диссертационного совета,доктор медицинских наук,доцентБлинова Екатерина Валериевна3ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫАктуальность темы исследования.Болезни почек и мочевыводящих путей традиционноотносятся к категории наиболее распространенных заболеваний человека.

Вместе с тем,опухоли почек в структуре заболеваемости и смертности населения Российской Федерации донедавнего времени составляли 3- 5%. Однако, всего за 12 лет (2000 – 2012 гг.) в большинствестран мира, включая РФ, наметилась устойчивая тенденция к резкому повышениюзаболеваемости онкоурологическими болезнями на 15 – 31,4% (Алексеев Б.Я. и соавт., 2012)при безусловном доминировании злокачественных вариантов опухолей в этой группе (ДавыдовМ.И. и соавт., 2007). В отличие от новообразований других локализаций опухоли почек чаще ив течение более длительного времени развиваются бессимптомно и лишь в 10 – 15% случаевпроявляют себя классической триадой симптомов: пальпируемым объёмным образованием впоясничной области, гематурией и болью в пояснице (Bullock et al., 1989). Злокачественныеопухоли почек обычно и чаще по сравнению с опухолями других органов проявляют себя впериодмаксимальнойметастазированием,реализациипрорастаниемопухолевогоопухоливпотенциала,паранефральнуюраспространеннымклетчатку,развитиемпаранеопластического синдрома (Patard J., 2003).

Социальное значение опухолей почекобусловлено преимущественным поражением лиц работоспособного возраста (30 – 50 лет),трудностью их ранней диагностики, а для злокачественных форм ещё и резистентностью клучевой и химиотерапии, низкой пятилетней выживаемостью больных после проведенноголечения и резким ухудшением качества жизни (Матвеев В.Б.

и соавт., 2005). Следуетподчеркнуть, что, несмотря на достигнутые определенные успехи в морфологическойдиагностике опухолей почек, вопросы научного обеспечения создания новых высокоточных иэффективных методов ранней диагностики опухолей почек представляют актуальную проблемусовременной урологии, нефрологии и морфологии.Цель исследования: провести сравнительную характеристику некоторых злокачественныхопухолей почек на основании результатов иммуноморфологического и спектроскопическогоисследования.Задачи исследования1.Получить спектральные характеристики различных вариантов почечно-клеточного ракас помощью метода раман-флуоресцентной диагностики.2.Сопоставитьданныеспектроскопическогоанализаучастковпочечнойткани,пораженных опухолевым процессом, с результатами их традиционного стандартного4морфологическогои иммуногистохимического исследования, подтверждающего наличиеопухоли в почечной ткани.3.На основании анализа спектроскопических оптических характеристик почечно-клеточногоракаобъединяющегоопределитьзначениефлуоресцентнуюметодаспектроскопиюраман-флуоресцентнойиспектроскопиюдиагностики,комбинационного(рамановского) рассеяния света для его дооперационной диагностики.Научная новизна исследованияНаучная новизна данного исследования заключается в том, что в нем впервые на основаниииспользования метода раман-флуоресцентной диагностики для идентификации опухолей почекопределены специфические оптические спектральные опухолевые маркеры, характерные дляразличных вариантов почечно-клеточного рака различной степени дифференцировки.

При этомзаключение о характере и распространенности опухолевого процесса было подтвержденостандартным морфологическим исследованием. Данное научное исследование являетсяморфологическим сопровождением и обоснованием применения метода раман-флуоресцентнойспектроскопии для более точной диагностики почечно-клеточного рака.

На основанииполученных данных впервые разработаны алгоритмы действий и выработаны стандартныережимы работы лазера(мощность, время эксплуатации, время вычисления светового итемнового спектров и др.).Практическая значимостьРезультаты проведенного исследования убедительно свидетельствуют о возможностииспользования в алгоритме диагностики опухолей почек метода раман-флуоресцентнойспектроскопии. На основании спектрального анализа образцов различных вариантов почечноклеточного рака стало возможным определить степень дифференцировки опухоли, наличие илиотсутствие вторичных изменений в опухолевом узле.

Поскольку диагностика опухолиосуществляется в режиме реального времени, появляются перспективы интраоперационногоприменения метода для диагностики опухолей и других локализаций.Основные положения, выносимые на защиту:1. Спектральный анализ биоптата почечной ткани, пораженной опухолевым процессом,позволяет выявить и зарегистрировать своеобразные «отпечатки» молекул различных веществ и5соединений, которые могут быть отнесены к оптическим маркерам опухоли.

Результатыспектрального анализа подтверждаются стандартным иммуноморфологическим исследованиемобразца опухолевой ткани, проводимом в установленном порядке.2. В связи с гетерогенностью почечной ткани, как в норме, так и при патологии, и наличием вней паренхиматозного и стромального компонентов спектральные характеристики исовокупность оптических маркеров, характеризующих состояние почечной ткани в норме ипатологии могут существенно отличаться.3. Неоднородность строения опухолевого узла и наличие в нем вторичных измененийобуславливает необходимость проведения анализа спектральных характеристик, полученных изразных участков опухолевого узла, с целью исключения как ложноположительных, так иложноотрицательных заключений.Апробация диссертационного материалаМатериалыдиссертациидоложенынаВсероссийскойнаучно-практическойконференции с международным участием «Актуальные вопросы морфогенеза в норме ипатологии»(Москва, 2016), научно-практической конференции«Применение лазернойрамановской спектроскопии в медицине, народном хозяйстве и промышленности» (Москва,2014), Международной конференция «Annual International Conferenceon Research, Education andTeaching by Russian Academics» (Афины, 2016), XXVIII Европейском патологическом конгрессе(Кёльн, 2016), Научно-практическая конференция с международным участием «Применениелазеров в медицине.

Фотодинамическая терапия» (Москва, 2016), V съезде Российскогообществапатологоанатомовконференциимолодых(Челябинск,ученых2017),«ГоризонтыМеждународноймедицинскойнаучно-практическойнауки»(Москва,2017),Интернациональном обществе оптики и фотоники (Страсбург, 2018), международнойконференции «Информационные технологии и нанотехнологии» (Самара, 2018), Российскомобществепатологоанатомов(Москва,2018),научно-практическойконференции«Многопрофильная больница современного города: вчера, сегодня, завтра» (Москва, 2018).Апробация диссертации состоялась на научной конференциикафедры патологическойанатомии им.

акад. А.И. Струкова Первого МГМУ им. И.М. Сеченова «28» января 2019 года.Внедрение результатов исследования в практикуРезультаты исследований используютсяв практической работе при анализебиопсийного материала, чтении лекций и проведении практических занятий на кафедрепатологической анатомии им. акад.

А.И. Струкова ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М.Сеченова.6Соответствие диссертации паспорту научной специальностиДиссертация соответствует паспорту научной специальности 14.03.02– патологическаяанатомия, а также области исследования согласно пунктам 1, 2, 3 и 4.Публикации результатов работыПо теме диссертации опубликовано 10 научных работ, в том числе 4 работы (2оригинальные и 2 обзорные) в журналах, рекомендованных ВАК, и 3 публикации в зарубежныхизданиях.Объем и структура диссертацииДиссертация99страницахДиссертациярекомендацийпостроенамашинописи,состоитиизспискапомонографическомсодержитвведения,литературы,9глав,таблиц,типу26рисунков,заключения,включающегои51выводов,изложена1надиаграммы.практическихотечественныхи68иностранных источников.Содержание работыМатериалы и методы исследованияДля выполнения задач, поставленных в данном исследовании, был изучен материал,полученный у85 больных раком почки (мужчин – 45, женщин – 40), находивщихся наобследовании и лечении в НИИ Уронефрологии и репродуктивного здоровья человека ПервогоМГМУ имени И.М.

Сеченова Минздрава России. Средний возраст больных составил 57+1,21лет. Исследовали почки или их фрагменты, удаленные в ходе операции радикальнойнефрэктомии (93,2%) или частичной резекции почки (6,8%) по поводу злокачественногоновообразования почки. Учитывая тот факт, что за исключением одного случая, при которомимело место диффузное поражение почек (1,2%), опухоль имела вид узла, расположенного вверхнем (48,2 %) или нижнем (36,5%) полюсах, либо в среднем сегменте почки (14,1%), участкиопухолевой ткани были получены из его центра, имея в виду центр предполагаемойокружности.

Кроме того, были исследованы по 2 образца ткани с периферии опухолевого узла,непосредственно примыкающие к так называемой «псевдокапсуле» опухоли и включающие еёфрагменты. Помимо образцов опухолевой ткани исследовали по 2 участка почечной паренхимыиз визуально неизменённых участков, максимально удаленных от опухолевого узла.

Такимобразом, у каждого пациента всего исследовали по 5 образцов почечной ткани размерами 0,5 х0,5 х 0,5 см (I группа). Контрольную группу (II группа) составили образцы почечной тканианалогичных размеров, полученные от 10 лиц (мужчин – 6, женщин – 4), умерших в возрасте до40 лет от других заболеваний, клинически и морфологически не имевших признаков почечной7патологии. Образец был изъят из верхнего полюса почки, отступив от её капсулы на 0,5 см.Средний возраст больных составил 32,5+ 1,59 года.В соответствии с классификацией Робсона (1982 г.) и TNM (2009 г.) опухоли былираспределены следующим образом: I стадии (T1N0M0) соответствовали 30 (35,3%)наблюдений, II стадии (T2N0M0) – 41 (48,2%) наблюдений, III стадии (T1N1M0, T2N1M0,T3N0M0, T3N1M0) –13 (15,3%) наблюдений, IV стадии (T4N0M0, T4N1M0, ТлюбаяN2M0,TлюбаяNлюбаяМ1) – 1 (1,2%) наблюдение.Для выполнения гистологического исследования образцы тканей фиксировали в 10%растворе нейтрального забуференного формалина, заливали в парафин.