Диссертация (Разработка инъекционных лекарственных форм цифетрилина), страница 18

Повторяемость (сходимость)При установлении сходимости проводили испытание 6 образцовЛЛФ-лио цифетрилина одной серии в условиях в одной лабораторииодним и тем же исполнителем. Сходимость результатов оценивали путемвычисления значения коэффициента вариации.Согласно данным, представленным в таблице 24, коэффициентвариации составил менее 10 % (0,98 %), что подтверждает прецизионностьметодики и свидетельствует малой изменчивости вариационного ряда вусловиях повторяемости.Таблица 24.Оценка повторяемости методики спектрофотометрического количественногоанализа цифетрилинасерия – № образцацифетрилин, мг/флакон041016-16,07041016-25,98041016-35,95041016-46,00041016-56,11041016-66,02Статистические характеристикиПолученные результатыНаибольшее значение,6,11Наименьшее значение,5,95Стандартное отклонение,0,0592Среднее значение,6,02Доверительный интервал (Р=95 %),6,02 ± 0,0621Коэффициент вариации,0,98 %Относительная погрешность,1,03%Б.

Внутрилабораторная (промежуточная) прецизионностьДля оценки промежуточной прецизионности методики определялисодержание цифетрилина в 6 пробах ЛЛФ-лио цифетрилина одной серии вусловиях одной лаборатории разными аналитиками в разные дни.При сравнении полученных результатов спектрофотометрическогоанализа цифетрилина (Таблица 25) обнаружено, что рассчитанное значениекритерия Фишера (Fрас = 1,05) не превышало его табличного значения (Fтаб= 5,05) и, соответственно, различие дисперсий S2(1) и S2(2) статистическинезначимо.

Также выполнялось неравенство tрас < tтабл, что говорит оботсутствиисистематическойошибки115измерений,арасхождениярезультатов анализа, которые были получены двумя исследователями,случайны. Таким образом, установлена промежуточная прецизионностьметодики количественного определения цифетрилина в разработаннойЛЛФ.Таблица 25.Оценка внутрилабораторной прецизионности методики спектрофотометрическогоколичественного анализа цифетрилинацифетрилин, мг/флаконцифетрилин, мг/флаконИсследователь 1Исследователь 2041016-16,076,05041016-25,985,95041016-35,955,93041016-46,005,97041016-56,116,07041016-66,026,03СтатистическиехарактеристикиПолученные результатыПолученные результатыНаименьшее значение,мг/флакон5,955,93Наибольшее значение,мг/флакон6,116,07Стандартное отклонение,мг/флакон0,05920,0560Среднее значение, мг/флакон6,025,996,02 ± 0,06215,99 ± 0,0588Коэффициент вариации, %0,980,94Относительнаяпогрешность, %1,030,98серия - № образцаДоверительный интервал(Р = 95 %), мг/флаконFтаб (5 %; 5;5) = 5,05Fрас =1 ,05tтаб (95 %; 10) = 2,23tрас = 1,01116ЗАКЛЮЧЕНИЕДля контроля качества ЛЛФ цифетрилина и ее лиофилизатаразработаны методики качественного ТСХ-анализа компонентов препаратаи количественного спектрофотометрического определения содержания ЛВ.Определеныипредложеныоптимальныеусловияхроматографирования, которые обеспечивают наилучшее разделениекомпонентов ЛФ.

Для идентификации цифетрилина и ЯФХ выбранасистема растворителей этанол/аммиак водный (7 : 3) (Rf (цифетрилин) =0,73 и Rf (ЯФХ) = 0,45), холестерин – хлороформ/метанол (9 : 1) (Rf = 0,63),сахарозы –ацетон/ледяная уксусная кислота/вода (15 : 3 : 2) (Rf = 0,72).Проведена оценка пригодности указанных хроматографических систем.Для определения содержания цифетрилина в ЛЛФ и ее лиофилизатевыбрана максимум поглощения при длине волны 282 ± 2 нм. Установлено,что интенсивность поглощения спиртовых растворов ЛЛФ препарата вданном максимуме подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера в диапазонеконцентраций от 0,02 до 0,2 мг/мл в пересчете на цифетрилин.

Максимумыпоглощения в растворах субстанции и ЛФ совпадают. При оценке влияниявспомогательныхвеществЛЛФнаспектральныехарактеристикидействующего вещества обнаружено, что сахароза не поглощает в области250–350 нм, в то время как компоненты липосомального бислоя (лецитин,холестерин, ПЭГ-ДГФА) в данной области имеют собственное поглощение.Это обстоятельство следует учитывать при анализе, используя в качестверастворасравненияспиртовойраствор«пустыхлипосом»ссоответствующей концентрацией. Относительная ошибка определенияцифетрилина в ЛЛФ и ее лиофилизате не превышает 2,0 %. В результатевалидационной оценки установлено, что методика количественногоанализа цифетрилина в интервале 70–130 % от номинального значенияопределяемой концентрации ЛВ является специфичной, линейной,правильной, и прецизионной.117Глава 5.

Стандартизация ЛЛФ-лио цифетрилина5.1. Показатели для стандартизации ЛЛФ-лио цифетрилинаОсновной задачей стандартизации ЛФ является установление единойсистемы показателей качества готовой продукции, методов и средств ееиспытания и контроля, а также необходимого уровня надежностипродукции в течение длительного времени с учетом ее назначения иприменения.Оценку качества ЛП в различных ЛФ проводят, как правило, попоказателям качества, характеризующим конкретную ЛФ, также попоказателямкачествадействующеговещества/веществи,принеобходимости, вспомогательного вещества/веществ данного ЛП [2].Выборметодовфармацевтическойконтроляразработкикачестваипроводитсядиктуетсяназадачамистадииконтроляпроизводственных стадий, контроля качества готовой продукции, входногоконтроля субстанции, и вспомогательных веществ и материалов, изакладывается на стадии фармацевтической разработки [1].Для контроля качества ЛЛФ как после изготовления, так и впроцессе хранения с целью изучения их стабильности, используютследующиеосновныепоказатели:описание,регидратируемость(растворимость лиофилизата), подлинность, количественное определение,однородность дозирования, однородность массы дозированных ЛФ, размерлипосом, значение рН, потеря в массе при высушивании.1.

Описание (внешний вид)Наработанные опытные серии препарата представляли собойлиофилизированную сухую пористую массу белого цвета.2. Регидратируемость (растворимость)Придобавленииксодержимомуфлакона5,3млводыиперемешивании в течение 10 мин должна образовываться однороднаядисперсия белого цвета.1183. Подлинность (качественный анализ).ТСХ-анализ (методика представлена в разделе 4.1.)При обработке хроматографической пластинки парами хлора иопрыскивания 0,05 % водным раствором калия иодида обнаруживалижёлтые пятна цифетрилина. После помещения хроматограммы в иоднуюкамеру наблюдали пятно ЯФХ желтого цвета и светло-желтые быстроисчезающие пятна холестерина. Опрыскиванием пластинки 20 % сернойкислотой с последующим нагреванием в сушильном шкафу до образованиярозово-фиолетовых пятен идентифицировали холестерин.

Образованиетемно-фиолетовыхпятенсахарозынаблюдалиприопрыскиваниипластинки 0,5 % раствором 1-нафтола и нагревания.Спектрофотометрический анализ (методика в разделе 4.2.)Подлинность препарата подтверждается электронным спектромпоглощенияспиртовогоколичественногораствора,определенияприготовленногоцифетрилинавпоЛЛФ-лио,методикекоторыйобнаруживает в анализируемом диапазоне 250–350 нм два максимума –при длинах волн (282 ± 2) и (290 ± 2) нм (Рисунок 25).Рисунок 25. Спектр поглощения спиртового раствора ЛЛФ-лио цифетрилина.1194. Количественное определение и однородность дозированияКоличественное содержание цифетрилина в лиофилизате определялиметодом прямой спектрофотометрии с использованием раствора рабочегоСО при длине волны (282 ± 2) нм по методике, представленной в разделе4.2.Испытание по показателю «Однородность дозирования» проводилиспособом количественного определения содержания цифетрилина порозньв каждом из 10 отобранных флаконах препарата от стандартизируемойсерии.

Номинальное содержание цифетрилина во флаконе принималиравным 6,00 мг (100 %).В результате во всех исследованных образцах опытных серийпрепарата «Цифетрилин липосомальный, лиофилизат для приготовлениядисперсии для инъекций 6,0 мг» содержание действующего веществанаходилось в интервале 5,88–6,35 (соответственно 98–106 %), чтоукладывается в допустимую норму отклонения ± 15 % от номинала(ОФС.1.4.2.0008.15 «Однородность дозирования») (Таблица 26)Таблица 26.Результаты оценки серий ЛЛФ-лио цифетрилина по показателям«Количественное определение» и «Однородность дозирования»020516010216Серия№флаконаА12345678910123456789100,3450,3490,3490,3530,3520,3540,3480,3500,3490,3480,3460,3550,3510,3490,3520,3530,3500,3510,3480,352СодержаниеЛВ мг/флакон5,885,955,956,026,006,035,945,965,955,945,906,055,995,956,006,025,965,995,946,00СодержаниеЛВ в % отноминала98,0099,1799,17100,33100,00100,5099,0099,3399,1799,0098,33100,8399,8399,16100,00100,3399,3399,8399,00100,00120Отклонениев % отноминала-2,00-0,83-0,830,3300,50-1,00-0,67-0,83-1,00-1,670,83-0,17-0,8400,33-0,67-0,17-1,000Метрологическиехарактеристикиn=10; f=9;хср=5.96;S2=1.96×10-3;S=4,42×10-2;Sхср.=7.42×10-3;t (95%,9) =2,26;∆х=0,03/; ε=0,53%n=10; f=9;хср=5.98;S2=1.87×10-3;S=4,32×10-2;Sхср.=7.22×10-3;t (95%,9) =2,26;∆х=0,03; ε=0,52%Продолжение таблицы030417020317010317041016Серия№флаконаАСодержаниеЛВ мг/флакон123456789101234567891012345678910123456789100,3560,3510,3490,3520,3590,3530,3520,3580,3570,3570,3720,3710,3690,3720,3660,3660,3680,3710,3700,3660,3710,3720,3660,3660,3700,3680,3670,3680,3710,3700,3640,3650,3630,3660,3640,3650,3640,3600,3640,3666,075,985,956,006,116,026,006,106,086,086,346,326,296,346,246,246,286,326,306,246,326,346,246,246,306,286,266,286,326,306,206,226,196,246,206,226,206,146,206,24СодержаниеЛВ в % отноминала101,1799,6799,17100,00101,83100,33100,00101,67101,33101,33105,67105,33104,83105,67104,00104,00104,67105,33105,00104,00105,33105,67104,00104,00105,00104,67104,33104,67105,33105,00103,33103,67103,17104,00103,33103,67103,33102,33103,33104,00Отклонениев % отноминала1,17-0,33-0,8301,830,3301,671,331,335,675,334,835,674,004,004,675,335,004,005,335,674,004,005,004,674,334,675,335,003,333,673,174,003,333,673,332,333,334,00Метрологическиехарактеристикиn=10; f=9;хср=6,04;S2=3,1×10-3;S=5,57×10-2;Sхср.=9.22×10-3;t (95%,9) =2,26;∆х=0,04; ε=0,66%n=10; f=9;хср=6,29;S2=1,61×10-3;S=4,01×10-2;Sхср.=6,38×10-3;t (95%,9) =2,26;∆х=0,03; ε=0,46%n=10; f=9;хср=6,29;S2=1,17×10-3;S=3,43×10-2;Sхср.=5,46×10-3;t (95%,9) =2,26;∆х=0,02; ε=0,39%n=10; f=9;хср=6,21;S2=1,19×10-3;S=3,45×10-2;Sхср.=5,55×10-3;t (95%,9) =2,26;∆х=0,02; ε=0,40%5.