Автореферат (Влияние структуры агликона на иммунотропную активность гликозидов мурамилдипептида)

На правах рукописиХочанский Андрей НиколаевичВЛИЯНИЕ СТРУКТУРЫ АГЛИКОНА НА ИММУНОТРОПНУЮАКТИВНОСТЬ ГЛИКОЗИДОВ МУРАМИЛДИПЕПТИДА14.03.09 – Клиническая иммунология, аллергологияАвторефератдиссертации на соискание ученой степеникандидата медицинских наукМосква – 2018Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном научном учреждении«Научно-исследовательский институт морфологии человека»Научные руководители:доктор медицинских наук, профессорКалюжин Олег Витальевичдоктор медицинских наук, профессорКиселевский Михаил ВалентиновичОфициальные оппоненты:Козлов Иван Генрихович – доктор медицинских наук, профессор,«НациональныймедицинскийисследовательскийцентрдетскойФГБУгематологии,онкологии и иммунологии имени Дмитрия Рогачева» Минздрава России, лабораторияэкспериментальной и клинической фармакологии, заведующий лабораторией;Нестерова Ирина Вадимовна – доктор медицинских наук, профессор, ФГАОУ«Российский университет дружбы народов», кафедра аллергологии и иммунологиифакультета повышения квалификации медицинских работников, профессор кафедры.Ведущая организация: ФБУН «Московский научно-исследовательский институтэпидемиологии и микробиологии им Г.Н.

Габричевского» РоспотребнадзораЗащита диссертации состоится «____» _________2018 г. в ____часов назаседании Диссертационного совета Д 208.040.08 в ФГАОУ ВО Первый МГМУ им.И.М.Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет) по адресу: 119992, г.Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2.С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ЦНМБ ФГАОУ ВО ПервыйМГМУ им. И.М.Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет) по адресу:119034,г.Москва,Зубовскийбульвар,д.37/1инасайтеорганизации:https://www.sechenov.ru/Автореферат разослан «___» _________________2018 года.Ученый секретарь диссертационного советадоктор медицинских наук, профессорКалюжин Олег Витальевич2ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫАктуальность темы исследованияНесмотря на успехи в этиотропной терапии инфекционных заболеваний, сегодняобщая смертность от них остается на высоком уровне.

В развитых странахинфекционные болезни занимают 4-е место среди причин смерти, в то время как внекоторых развивающихся странах они остаются главной причиной летальностинаселения [Нечаева О.Б., 2016; Lozano R., 2012].Следствием чрезмерного применения антибиотиков явилось возникновениеинфекционных агентов, обладающих множественной лекарственной устойчивостью[Andersson, 2014].

Клинической проблемой становится развитие среди патогеновустойчивости к антибиотикам резервного ряда. Достаточно часто возбудителиинфекционных заболеваний резистентны к подавляющему большинству антибиотиков[World Health Organization, 2014; Bush K., 2011]. В связи с этим этиотропная терапия вомногих аспектах зашла в тупик.Также становится все более актуальной проблема повышения частоты развитияопухолевых процессов, приводящих к увеличению смертности и инвалидизациинаселения. Традиционная химиотерапия характеризуется высокой стоимостью иобладает множеством побочных эффектов, в том числе иммуносупрессивнымдействием. Опухолевые заболевания становятся всё более распространенными срединаселения всех возрастных групп, что ставит новые вызовы перед современнымипротоколами химиотерапии [Torre L.A.

et al. 2012.]. Финансовая нагрузка наздравоохранение, вызванная необходимостью долговременной поддержки такихбольных, в некоторых случаях сравнима и даже превосходит таковую у больных ссердечно-сосудистыми заболеваниями.В этой ситуации не теряют своей актуальности дополнительные методы исредства, способные повысить эффективность терапии указанных групп заболеваний.Однимизподобныхнаправленийсталаиммунотерапия,обладающаярядомпреимуществ перед традиционным этиотропным лечением как инфекционных, так инеопластических болезней [Караулов А.В., Калюжин О.В., 2007; Козлов И.Г., ТимаковМ.А., 2009; Нуриев Р.И. и др., 2017].Перспективной группой мультифункциональных иммунотропных соединенийявляются лиганды NOD-подобных рецепторов (NLR), активация которых способна нетолько усиливать экспрессию провоспалительных цитокинов иммунокомпетентнымиклетками, но и блокировать флогогенные биохимические реакции [Караулов А.В.,Калюжин О.В.,2013].

Пожалуй, наиболее изученным NOD-лигандом, а именно3агонистом цитоплазматических рецепторов NOD2, является мономер пептидогликанаклеточнойстенкибактерийN-ацетилмурамил-L-аланил-D-изоглутамин,илимурамилдипептид (МДП). Созданы различные модификации МДП, некоторые изкоторых уже нашли клиническое применение в качестве иммуномодуляторов широкогоспектра действия [Андронова Т.М. и др., 2009; Матвеев Д.А. и др., 2014; ПащенковМ.В. и др., 2012]. Рациональным подходом к увеличению биологической активностиМДП является β-гликозилирование [Земляков А.Е. и др., 2003, Калюжин О.В., 2003]. βГликозиды МДП обладают широким спектром иммунотропного действия и при этомхарактеризуются относительной легкостью синтеза [Земляков А.Е., Чирва В.Я., 1987].Степень разработанности темыНесмотря на достаточно большое количество работ по изучению механизмовиммуномодулирующих эффектов гликозидных производных МДП, остается не доконца решенным вопрос о влиянии структуры агликона на иммунотропную активностьгликозидов МДП [Калюжин О.В.,2003].

Ранее определено влияние некоторых βгликозидовМДПнапродукциюпро-ипротивовоспалительныхцитокиновиммунокомпетентными клетками in vitro и ex vivo [Караулов А.В. и др., 2002;Михайлова Л.П. и др., 2004]. Однако динамика концентрации этих цитокинов всывороткекровииммуностимуляторовэкспериментальныхостаетсяживотныхнеизученной.послеБольшаячастьвведенияэтихдоклиническихисследований биологической активности β-гликозидов МДП проведена на мышиныхмоделях in vitro и in vivo. Учитывая наличие существенных отличий между иммуннымответомулабораторныхживотныхичеловека,представляетсяактуальнымопределение влияния вновь и ранее синтезированных β-гликозидов МДП на функциючеловеческих иммунокомпетентных клеток.

Открыт и вопрос о влиянии гликозидовМДП на морфологические характеристики и иммунофенотип дендритных клетокчеловека.Некоторые мурамилпептиды (мифамуртид, ромуртид) уже используются вкачестве компонентов комплексного лечения ряда опухолевых заболеваний. Вместе стем среди практикующих врачей и ученых достаточно распространено мнение овозможном ускорении роста опухолей при использовании иммуностимуляторов.Влияние некоторых гликозидов МДП на рост и метастазирование опухолей in vivo ужебыло предметом исследования [Калюжин О.В., 2001], однако выраженностьпротивоопухолевых эффектов и динамика опухолевого роста на фоне применения этихгликопептидов требуют уточнения.Остается неизученной нейротропная активность гликозидов МДП.4Цельисследования–определитьвлияниеструктурыагликонанаиммуномодулирующее действие β-гликозидов мурамилдипептида для дальнейшегодетального изучения иммунотропной и противоопухолевой эффективности наиболееактивного соединения.Задачи исследования:1) Провести сравнительное изучение влияния МДП и семи β-гликозидов МДП салифатическими (β-гептил-, β-децил-, β-додецилгликозиды МДП), циклическими (βциклогексил-, β-циклооктил- и β-циклодецилгликозиды МДП) и трициклическим (βадамантилгликозидМДП)агликонами,нацитотоксическуюактивностьмононуклеарных лейкоцитов периферической крови человека.2) Изучить влияние МДП и его семи β-гликозидов на фагоцитарную активностьнейтрофилов периферической крови человека.3) Сравнить влияние МДП и наиболее эффективного иммуномодулятора изизученных β-гликозидов МДП на экспрессию маркеров активации и созреваниядендритными клетками человека.4)Сравнитьдинамикуконцентрациипровоспалительныхипротивовоспалительных цитокинов в сыворотке крови мышей линии C57BL/6 послевнутрибрюшинного введения МДП и наиболее биологически активного β-гликозидаМДП.5) Оценить влияние наиболее эффективного иммуномодулятора из изученных βгликозидов МДП на динамику роста и метастазирование меланомы B16, а такжепродолжительность жизни мышей-опухоленосителей.6) Изучить влияние наиболее биологически активного β-гликозида МДП напоказатели активности ЦНС мышей линии C57Bl/6 с привитой меланомой B16.Научная новизна исследованияВпервыеопределеновлияниеструктурыагликонанаиммунотропнуюактивность семи β-гликозидов МДП по отношению к мононуклеарным лейкоцитам инейтрофилам периферической крови человека.Впервыеизученодействиеβ-гептилгликозидаМДПнаэкспрессиюдендритными клетками человека маркеров, ассоциированных со стимуляциейклеточного иммунитета и презентацией антигена.Впервые определена динамика концентрации про- и противовоспалительныхцитокинов в сыворотке крови мышей после внутрибрюшинного введения βгептилгликозида МДП.5Впервые оценено действие β-гептилгликозида МДП на функцию ЦНС уэкспериментальных животных-опухоленосителей.Теоретическая и практическая значимость работыДанные об иммунотропной активности новых гликозидов МДП могут служитьфундаментом для разработки безопасных и действенных иммуномодулирующихпрепаратов.