Автореферат (1139916), страница 4
Текст из файла (страница 4)
5).При использовании β-гептилгликозида МДП в терапевтическом режимеобнаружено статистически значимое и дозозависимое торможение опухолевого ростана 10-е и 20-е сутки после имплантации опухоли. Наиболее выраженное уменьшениеобъема узла меланомы (-57% и -74%) установлено на 10-е сутки при терапевтическомвведении иммуностимулятора в дозах 5 мкг и 25 мкг/животное, соответственно. На 20-есутки угнетающее действие этих доз β-гептилгликозида МДП на рост опухолинесколько снижалось (-48%).
При промежуточном измерении объема опухолевого узла(15-е сутки) не обнаружено противоопухолевого действия, исследуемого гликопептида.18Таким образом, β-гептилгликозид МДП проявлял значимый дозозависимыйпротивоопухолевый эффект при использовании в терапевтическом режиме.Таблица 5Влияние β-гептилгликозида МДП на объем первичного опухолевого узламеланомы B16, привитой мышам линии C57Bl/6Группа / доза препаратаКоличество суток после трансплантации опухоли10Контроль15510 ± 114724± 142203516±298β-Гептилгликозид МДППрофилактический режим1мкг/мышь (50 мкг/кг)498 ±74 (2 %)800±97 (10%)3214±119 (8 %)5мкг/мышь (250 мкг/кг)542±102 (-6%)756±178 (- 4 %)4006 ±227 (-14%)25 мкг/мышь (1,25 мг/кг)578±118 (-13%) 719±202 (0,6%)3432 ±347 (2 %)Терапевтический режим1мкг/мышь (50 мкг/кг)266± 89 (48%)* 900± 93 (-24 %)5 мкг/мышь (250 мкг/кг)221±58( 57%)* 723 ±221 (0,13%)* 1819±319 (48%)*25 мкг/мышь (1,25 мг/кг)128±42 (74%)* 560 ± 136 (23 %)3000±354 (14%)1875± 89 (47%)** – р<0,05 – по сравнению с контролемПоисковый и норковый рефлекс отражают функциональную активность ЦНСлабораторных животных.
Изменение этих рефлексов может, с одной стороны,свидетельствовать о нейтротропном действии испытуемых соединений на животных спривитой опухолью, а с другой – отражать клиническое состояние животных иэффективность экспериментальной профилактики или лечения. Мурамилпептидыобладают непосредственной нейрофармакологической активностью. Более того,некоторые иммунные медиаторы, выработку которых стимулируют мурамилпептиды,обладают в той или иной степени нейротропными эффектами.Введение β-гептигликозида МДП не оказало влияния на динамику норкового ипоискового рефлексов у животных экспериментальных групп по сравнению сживотнымиконтрольнойгруппы.Этоможетуказыватьнаотсутствиенейротоксического эффекта у животных с привитой опухолью, в том числе привведении испытуемого соединения в дозе, вызывающей сокращение среднейпродолжительности жизни.19Таким образом, проведенное исследование позволило уточнить влияниеструктуры агликона на иммуномодулирующую активность гликозидов МДП вотношении иммунокомпетентных клеток человека, и сделать еще один шаг на путисоздания на основе β-гептилгликозида МДП иммунотропного препарата, имеющегопотенциал к внедрению в комплексное лечение инфекционных и опухолевыхзаболеваний.ВЫВОДЫ1) В концентрации 1 мкмоль/мл β-гликозиды мурамилдипептида (МДП) салифатическими агликонами, также как и МДП, не влияли на цитотоксическуюактивность мононуклеарных лейкоцитов крови человека; среди гликозидов сциклическимиагликонамитолькоβ-циклооктилгликозидМДПповышалNK-зависимую цитотоксичность, а β-адамантилгликозид МДП снижал ее.
При увеличенииконцентрации до 10 и 100 мкмоль/мл наибольшую активность, сопоставимую с таковойу МДП, проявлял β-гептилгликозид МДП; увеличение числа атомов углерода валифатической цепи агликона от 7 до 12 коррелировало со снижением способностигликозидов МДП стимулировать NK-активность мононуклеарных лейкоцитов.2) β-Гептилгликозид МДП в концентрации 10 мкмоль/мл в той же степени, что иМДП, увеличивал долю нейтрофилов, активно фагоцитирующих частицы латекса вобразцах цельной крови человека.
Другие β-гликозиды МДП с алифатическими,циклическими и адамантильным агликонами не влияли на фагоцитарную функциюнейтрофилов.3) МДП и β-гептилгликозид МДП повышали экспрессию CD14 на дендритныхклетках человека in vitro, но не изменяли статистически значимо экспрессию другихмембранных маркеров, характерных для созревающих и зрелых дендритных клеток.При этом обнаружена выраженная тенденция к увеличению экспрессии СD83 подвлиянием обоих гликопептидов, HLA-DR – под действием β-гептилгликозида МДП, атакже тенденция к снижению экспрессии HLA-DR и СD86 – под влиянием МДП,комбинаций молекул CD80+HLA-DR и CD86+CD14 – под действием обоихгликопептидов.4) Через 1 час после внутрибрюшинного введения β-гептилгликозида МДП всыворотке крови мышей повышалось содержание IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IFN-γ,TNF-α и GM-CSF; в большинстве случаев это соединение превосходило МДП поцитокин-индуцирующей активности.
Через 8 часов после инъекции β-гептилгликозидаМДП в сыворотке крови сохранялась повышенная концентрация IL-1β и IFN-γ; в20большей степени, чем под влиянием МДП, возрастал уровень IL-5 и продолжалосьувеличение содержания IL-6 и IL-10; концентрация TNF-α сменяла восходящий трендна нисходящий, оставаясь на уровне выше, чем в контроле; содержание IL-2, IL-4 иGM-CSF практически возвращалось к контрольным значениям. Через 24 часа послевведения β-гептилгликозида МДП сохранялся более высокий уровень IL-6, чем послеинъекции МДП; МДП в большей степени, чем β-гептилгликозид МДП, поддерживалвысокие концентрации IL-10 и TNF-α.5) β-Гептилгликозид МДП при повторных внутрибрюшинных инъекциях в дозе5 мкг/животное в терапевтическом режиме увеличивал продолжительность жизнимышей C57Bl/6 с имплантированной меланомой B16; в дозах 5 и 25 мкг/животное этотгликопептид, кроме того, вызывал значимое торможение роста опухоли.
Приоднократном профилактическом введении β-гептилгликозид МДП статистическизначимонеизменялростузламеланомыидлительностьжизнимышей-опухоленосителей.6) Внутрибрюшинное введение β-гептилгликозида МДП в терапевтическом ипрофилактическом режиме не влияло на динамику норкового и поискового рефлексов умышей линии C57Bl/6 с привитой меланомой B16.ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИРезультатыдиссертационногоисследования,углубляяирасширяяпредставления о спектре биологической активности β-гептилгликозида МДП, в томчисле в отношении иммунокомпетентных клеток человека, позволяют рекомендоватьэтот гликопептид как перспективную субстанцию для создания на ее основеиммунотропного лекарственного средства.ПУБЛИКАЦИИ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ1.Хочанский А.Н., Земляков А.Е., Калюжин О.В., Киселевский М.ВВлияние В-гликозидов мурамилдипептида на NK-активность мононуклеаров человека.// Российский биотерапевтический журнал.
– 2011. – Т. 10. № 1. – С. 31.2.Хочанский А.Н. Влияние модификации агликона на противоопухолевуюактивность мурамил дипептида in vivo // Российский биотерапевтический журнал. –2012. – Т. 11. № 2. – С. 60a.3.Хочанский А.Н. Влияние В-гептигликозида мурамилдипептида на рост иметастазирование меланомы B16 у мышей C57BL/6 // Российский биотерапевтическийжурнал. – 2013.
– Т. 12. № 2. – С. 87.214.Хочанский А.Н. Влияние гептилгликозида мурамилдипептида надинамику роста опухоли меланомы В16 и продолжительность жизни мышей линииС57BL // Российский биотерапевтический журнал. – 2013. – Т. 12. № 4. – С. 43-46.5.ВлияниеХочанский А.Н., Земляков А.Е., Калюжин О.В., Решетникова В.В.В-гликозидовмурамилдипептиданаNK-активностьмононуклеарныхлейкоцитов и фагоцитарную функцию нейтрофилов человека // Российскийбиотерапевтический журнал.
–– 2014. – Т. 13. № 1. – С. 27-30.6.Хочанский А.Н., Ахматова Н.К., Киселевский М.В., Калюжин О.В.Влияние внутрибрюшинного введения мурамилдипептида и его гликозида наконцентрацию цитокинов в сыворотке крови мышей // Материалы Всероссийскойнаучно-практической конференции «Иммунопатология и иммунореабилитация: оттеории к практике» – Пенза. – 2015. – С. 81-82.7.Khochanskiy A.N. The influence of muramyl dipeptide derivative on tumor-bearing mice // “PhD Scientific Days 2017”, 2017, Будапешт, Венгрия, электроннаяпубликация.
– http://phd.kmcongress.com/osszefoglalo/1971 (дата обращения 15.10.2017).СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙВИЧ – вирус иммунодефицита человекаВГС – вирус гепатита СДК – дендритные клеткиЛПС – липополисахаридМДП – мурамилдипептидМНК – мононуклеарные лейкоциты периферической кровиCD – кластер дифференцировкиFITS – флуоресцеин-изотиоцианатGM-CSF – гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий факторHLA – человеческий лейкоцитарный антигенIFN-γ – интереферон-γIL – интерлейкинNLR – NOD-подобные рецепторыMCHII – главный комплекс гистосовместимостиTCR – T-клеточный рецепторTLR – Toll-подобные рецепторыTh – T-хелперыTNFα – фактор некроза опухоли αPAMP – патоген-ассоциированные молекулярные паттерныPRR – паттернз-распознающие рецепторы22.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
