Текст отзыва оппонента 1 (Морфологический анализ сперматогенеза - основа диагностики мужского идиопатического бесплодия (иммуногистохимический аспект))

ОТЗЫВофициального оппонента, доктора медицинских наук по специальности 14.03.02.– Патологическая анатомия, профессора, Астраханцева Александра Фёдоровича,заведующего патологоанатомическим отделением Негосударственного учрежденияздравоохранения «Центральная клиническая больница №2 им. Н.А.СемашкоОткрытого акционерного общества «Российские железные дороги» на диссертациюДемяшкина Григория Александровича на тему «Морфологический анализсперматогенеза – основа диагностики мужского идиопатического бесплодия(иммуногистохимический аспект)», представленную в Диссертационный советД.208.040.01 на соискание учёной степени кандидата медицинских наук поспециальности 14.03.02. – Патологическая анатомияАктуальность избранной темыДиссертационная«МорфологическийработаанализГригориясперматогенеза–АлександровичаосновадиагностикиДемяшкинамужскогоидиопатического бесплодия (иммуногистохимический аспект)», посвящена разработкеморфологических и иммуногистохимических критериев половых и соматическихэлементов яичек, характеризующих разные формы идиопатического бесплодия исоставляющих основу их дифференциальной диагностики.Проблема мужского бесплодия, доля которого как причины бесплодного брака вРоссии составляет около 40%, является не только острой социальной, но и актуальнойнаучной проблемой.

Особый дефицит знаний присутствует в исследовании причин ипатогенетических механизмов идиопатического бесплодия и его морфологическихвариантов, или форм.Мужское бесплодие, как и женское, является многофакторной патологией и,соответственно, ‒ результатом различных расстройств.Несмотря на совершенствование методов диагностики (TESE, MD-TESE, MESE,PESA), используемые в настоящее время критерии для оценки степени пораженияполовых клеток, разработанные ещё в 70-х годах прошлого столетия (критерииJohnson, De Kretser, Holstein), нуждаются в модернизации с учётом современныхвозможностей морфологического анализа.Наиболее сложным для диагностики и составления прогноза остаетсяидиопатическое мужское бесплодие,которое требует выработки объективныхморфологических критериев и алгоритма дифференциальной диагностики на основеконкретизации научных знаний о причинах и механизме его развития.1Одним из наиболее перспективным методов исследования идиопатическойформы мужского бесплодия является метод иммуногистосохимического анализа,которому и посвящено настоящее исследование, которо, несомненно, выполнено наактуальную тему и имеет как научную, так и практическую значимость.Степень обоснованности научных положений, выводов и рекомендаций,сформулированных в диссертацииДиссертация скомпоновано по традиционному плану, изложена в хорошем стилена 141 страницах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы,разделы материал и методы исследования, результаты собственного исследования,обсужденияполученныхрезультатов,заключение,выводы,практическиерекомендации, список литературы и приложение.Во «Введении» отражена актуальность темы диссертации, сформулированыцель и задачи.Соответственно поставленной цели – выявление патоморфологическихи молекулярных механизмов нарушения сперматогенеза при идиопатическомбесплодии,–авторомиммуногистохимическийопределенанализкругзадач,универсальныхвкоторыйфактороввошли:пролиферации,дифференцировки и апоптоза, исследование экспрессии инсулиноподобного факторароста как важнейшего модулятора физиологического и патологического гистогенеза,факторов дифференцировки PLAP и CD117, позволяющих судить о возможномприсутствии в яичках малодифференцированных клеток.

Наряду с этим поставленазадачаанализаэкспрессиипроапоптотическихиантиапоптотическихгенов-регуляторов клеточного цикла спематогенных клеток. Как итог сформулированалгоритм клинико-морфологического исследования сперматогенеза для диагностикиидиопатического бесплодия. Следует отметить тщательность, с которой проведеноисследование, а именно использование контрольной группы здоровых лиц, безпризнаков соматической патологии.В главе «Обзор литературы» проведен анализ научной литературы осовременных взглядах на возможные механизмы патогенеза идиопатическогомужского бесплодия.

Литературный обзор заканчивается резюме, в которомсформулировано общее представление о состоянии проблемы по теме диссертации,критически оцениваются методологические подходы и результаты, полученныеразличными авторами.2В главе «Материал и методы исследования» подробно описаны использованныеавтором клинико-лабораторные, цитологические (мазки-отпечатки), общеприняыегистологические, гистохимические и иммуногистохимические методы анализа,цитогенетическойимолекулярно-генетической(ПЦР-РВ)диагностики.Такжеобосновывается параллельное исследование биопсий яичек здоровых пациентовразных возрастных групп.

Для выполнения данной научно-квалификационной работыавтором использовано сертифицированное оборудование и программное обеспечение,статистическая обработка материала проведена с помощью компьютерной программыSPSS 7.5 for Windows statistical software package (IBM Analytics, США).В главе «Результаты собственных исследований» автор излагает полученныеданные, иллюстрируя их микрофотографиями удовлетворительного качества (57),графиками (16), таблицами (24) и приложением иллюстративного материала на 7страницах.Полученныеавторомданныецитологического,гистологического,гистохимического, иммуногистохимического и молекулярно-биологического анализа,всесторонне характеризуют морфологическое состояние яичек при разных формахидиопатического бесплодия и раскрывают основные отличия от состояния яичек прифизиологическом старении. Полученные данные свидетельствуют о нарушенияхпролиферацииаутокринныхидифференцировкирегуляторовсперматогоний,сперматогенеза,априводящих,такжепопаракринныхмнениюиавтора,последовательно к гипосперматогенезу, затем ‒ к блоку созревания и, в конечномитоге, ‒ к Сертоли-клеточному синдрому.

Графическое представление полученныхматериалов наглядно подтверждает полученные результаты.Обсуждение результатов собственного исследования проведено всесторонне всопоставлении с результатами работ отечественных и зарубежных ученых по темемужского бесплодия.Библиографический указатель включает 145 литературных источников: 38отечественных и 107 зарубежных авторов.Положения, выносимые автором на защиту, отражают основные закономерностипатогенетических изменений, органоспецифические и молекулярно-биологическиеособенности, характеризующие идиопатическое мужское бесплодие.

В положенияхтакже отражены возрастные иммуногистохимические характеристики состояниясперматогенеза у лиц пожилого возраста.3Выводы диссертации соответствуют поставленным задачам, достоверны,базируютсянаконкретныхполученных авторомрезультатахивыявленныхпатогенетических закономерностях.Достоверность и новизна исследования, полученных результатовДостоверность полученных в ходе научной работы результатов подтверждаетсядостаточным количеством наблюдений, совокупностью использованных методикисследования, которые соответствуют поставленным в диссертации цели и задачам.Статистическая обработка проведена детально с использованием современныхкомпьютерных программ.Научная новизна диссертационного исследования заключается в том, чтоавтором впервые выявлена характерная для разных форм идиопатического бесплодиявзаимозависимость морфологических и молекулярных характеристик сперматогенныхи соматических клеток яичек в сравнительном аспекте с таковыми в постнатальномпериоде у пожилых здоровых лиц, что позволило создать алгоритм клиникоморфологического исследования сперматогенеза для диагностики идиопатическогобесплодия.Впервыеприсовместномиспользованиииммуногистохимическогоимолекулярно-биологического методов установлено, что при мужском идиопатическомбесплодии в сперматогониях на фоне низкого уровня пролиферации отмечаетсяувеличение показателей апоптоза.

Позитивная реакция на PLAP в популяциисперматогоний при гипосперматогенезе указывает на присутствие в семенныхканальцах малодифференцированных форм сперматогоний.Впервые показано, что снижение активности IGF-I в сперматогониях у лиц сидиопатическим бесплодием может служить одним из ключевых механизмоврассматриваемых его форм.Значимость для науки и практики полученных автором результатовРезультаты, полученные диссертантом в ходе исследования, дополняют ирасширяют имеющиеся в литературе сведения о патологической морфологииидиопатической формы мужского бесплодия, что может быть использовано приизучении соответствующих разделов патологической анатомии, гистологии иурологии.