Автореферат (Морфологический анализ сперматогенеза - основа диагностики мужского идиопатического бесплодия (иммуногистохимический аспект)), страница 5

Кроме того, велико значение не толькосинтезируемым биологически активным веществам, но и продуктам распадапогибающих половых клеток в результате естественного отбора.Преимущество биопсии яичка состоит в том, что при исследовании нативныхполовых клеток повышается качество прижизненной диагностики, показывая болееправдивуюморфологическуюкартинуинтраорганныхмолекулярныхвзаимоотношений, и обеспечивая наибольшую информативность, в отличие отаутопсийного материала.21Проведённоеретроспективноеисследованиевыявилодисбалансмеждупролиферацией и апоптозом мужских половых клеток, а также нарушениенейроэндокринной и гуморальной регуляции, что является одним из ключевыхзвеньев патогенеза идиопатической формы мужского бесплодия (рис. 3).Рисунок 3.

Патогенез идиопатической формы мужского бесплодия,графологическая структура.Сравнительный иммуногистохимический анализ изучения белковых регуляторовгистогенеза указывает на объективное отличие микроскопической картины яичекпри идиопатической форме мужского бесплодия от таковых в возрастной группепожилых мужчин с нормальным сперматогенезом. Это свидетельствует о том, чтоидиопатическая форма мужского бесплодия патогенетически не связана с, такназываемым, синдромом преждевременного старения половых желез.На основании проведенного исследования разработан алгоритм клиникоморфологической диагностики идиопатического бесплодия (прилож. V и VI).Выводы:1.Идиопатическаяформамужскогобесплодиясостоитизформ-фаз:гипосперматогенез, блок созревания, фокальный и классический вариантыСертоли-клеточного синдрома (синдром только клеток Сертоли), характеризующиепрогрессирующие нарушения сперматогенеза.222.Стадии гипосперматогенеза и блока созревания при идиопатической формемужского бесплодия характеризуются снижением пролиферации сперматогоний,нарушением их дифференцировки и наличием эмбриональных PLAP-позитивныхклеток.3.При Сертоли-клеточном синдроме и его фокальном варианте отмечаетсядоминирование апоптоза клеток Сертоли и единичных сперматогоний на фонеполного отсутствия их пролиферации.4.Снижение уровня пролиферации сперматогоний при идиопатической формемужского бесплодия является причиной гипосперматогенеза на ранних стадияхзаболевания, а отсутствие дифференцировки сперматогоний вызываемое блоком ихсозревания сочетанием увеличения уровня апоптоза на поздних стадиях.5.Отличия физиологического сперматогенеза в зрелом (22 – 35 лет) и пожилом(64 – 75 лет) возрастных периодах заключаются в следующем: у молодых мужчинобнаружено доминирование пролиферации над апоптозом, а у лиц пожилоговозраста – при сохранном уровне размножения сперматогоний визуализируетсяотносительная активация клеточной гибели, что может рассматриваться какмеханизм физиологической элиминации аберрантных гамет, риск возникновениякоторых в период старения возрастает.6.Механизмыформированиявозрастныхфизиологическихизмененийотличаются при патогенезе идиопатического бесплодия, что подтверждаетсясравнительными иммуногистохимическими показателями половых клеток и клетокСертоли: снижение и последующее отсутствие пролиферации и дифференцировкисперматогоний при бесплодии, что характерно для пожилых мужчин.7.Низкое содержание инсулиноподобного фактора роста-I в сперматогонияхприводит к гипосперматогенезу и нарушению созревания половых клеток впатогенезе мужского бесплодия.Практические рекомендации:Приведенныеданныесовершенствованиямогутметодовпослужитьобследованияосновойдляразвитиядисфункциональныхисостояниймужской репродуктивной системы, для разработки новых подходов при23диагностикеилеченииврожденнойтестикулярнойформыбесплодияикомбинированной адьювантной терапии опухолей яичка.Полученныерезультатыповзаимодействиюполовыхклетоксихмикроокружением в норме и при патологии целесообразно более широкоиспользовать в учебном процессе, учебных и методических пособиях приизложении материала, связанного сМужской репродуктивной системой курсаГистологии, Патологической анатомии, Онкологии, Урологии и Андрологии вМедицинскихВУЗах,набиологическихфакультетахуниверситетовипедагогических институтов.Предложен метод подсчёта на гистологических препаратах яичка мужскихполовыхклеток,сустентоцитов(клетокСертоли)иинтерстициальныхэндокриноцитов (клеток Лейдига) с использованием условных стандартов.Приведены морфологические критериидля оценки степени поражения примужском идиопатическом бесплодии на гистологических препаратах (биоптатах) –алгоритм тестикулярной дифференциальной диагностики.Дальнейшие перспективы развития исследованияНа основании полученных данных об особенностях патогенеза идиопатическойформы мужского бесплодия дальнейшей перспективой исследований в этойобласти представляется поиск эффективных методов коррекции бесплодия у этойгруппы мужчин, особенно – у мужчин с блок созревания и фокальном вариантеСертоли-клеточного синдрома.

В русле обозначенной проблемы в последующихработах могут быть использованы: 1) исследование лекарственных препаратов,влияющих на функции пролиферации, дифференцировки и апоптоза гамет упациентов с идиопатичской формой мужского бесплодия; 2) исследованиеморфологических особенностей строения паренхимы яичка у мужчин с бесплодиемнеясного генеза и другими экстрагенитальными заболеваниями, не влияющиминапрямую на репродуктивную функцию; 3) исследование прогноза и факторовриска(малигнизация)приСертоли-клеточномсиндроме;4)изучениевнутриорганной регуляции дифференцировки половых клеток в пожилом возрастеи связь с хроническими заболеваниями при передаче фенотипических признаковбудущему потомству.24ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ H&E – англ.

Hematoxylin and eosin – гематоксилин и эозин. SCO-s – англ. Sertoli-cell-only syndrome – Сертоли-клеточный синдром. SCO-sF – англ. Sertoli-cell-only syndrome focalis– Сертоли-клеточныйсиндром, фокальный вариант (сперматогенеза). ve – интенсивность иммуногистохимического мечения (верификация). м.о. – мерный отрезок.СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕДИССЕРТАЦИИ*1.О.В.Волкова,И.А.Бичерова,Г.Г.Кругликов,Г.А.Демяшкин.Морфо-цитохимические особенности гамет в процессе роста // «Морфология» - Москва. – 2006.- №4.

– С.34 – 35.2.Г.А. Демяшкин, Н.Ш. Амиров. Паракринные механизмы регуляции функцийсеменника (иммуноцитохимический аспект) // «Фундаментальные исследования» –Москва. – 2009. – №2. – С. 88 – 90.3.О.В. Волкова, И.А. Бичерова, В.А.

Степаненко, Г.А. Демяшкин. Механизмы,управляющие базисными процессами репродукции // «Морфология» – Москва. 2009. Т.136. №4. С. 32.4.Г.А. Демяшкин. Морфологическая характеристика сперматогенеза в норме и приидиопатическом бесплодии (иммуногистохимический аспект) // «Вестник медицинскогоинститута «РЕАВИЗ»: реабилитация, врач и здоровье». – 2015. – №4. – С. 107 – 119.5.Г.А.Демяшкин.Структурно-функциональнаяхарактеристикафокальноговарианта синдрома клеток Сертоли (иммуногистохимический аспект) // «Вестникмедицинского института «РЕАВИЗ»: реабилитация, врач и здоровье». – 2016. – №1 (21).С.

123 – 130.6.Г.А. Демяшкин. Новые подходы к диагностике мужского бесплодия: анализбиоптатов яичка с нормальным и нарушенным сперматогенезом» // «Вестникмедицинского института «РЕАВИЗ»: реабилитация, врач и здоровье». – 2016. – №2 (22).С. 110 – 128.7.Г.А. Демяшкин. Пролиферация и апоптоз мужских половых клеток всперматогенномэпителии внорме ипри азооспермии//Крымский журналэкспериментальной и клинической медицины. – 2016. – Т.

7. № 2. С. 19 – 32.8.Г.А. Демяшкин, Н.Г. Кульченко. Морфологические изменения в ткани яичка прибесплодии // Андрология и генитальная хирургия. – 2016. – №3. С. 45 – 49.259.Г.А. Демяшкин, Н.Г. Кульченко, А.А. Костин, Ю.В. Самсонов, Д.В. Москвичёв.Прогнозирование резервной функции яичек у пациентов с необструктивной азооспермией// Научно-практический журнал «Исследования и практика в медицине». – 2016. – Т.

3,№3. С. 42 – 48.10.Г.А. Демяшкин, Е.А. Коган, Т.А. Демура. Тканевой ингибин-В – маркёрсперматогенеза. Патогенез. 2016; 14(4):43 – 50.11.Г.А.Демяшкин, Е.Е. Филиппов. Морфофункциональная характеристикаинсулиноподобного фактора роста 1 в нормальном сперматогенезе и при идиопатическомбесплодии. Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2017.№ 1-2. С. 236-239.12.G. Demyashkin.

Tissue testicular Inhibin-B for Sertoli cell-only syndrome. EuropeanAssociation of Urology (EAU), Section of Andrological Urology (ESAU). Scientific Meeting.May, 2017. 66-67.*Курсивом выделены работы, опубликованные в журналах рекомендованных ВАКМинистерства образования и науки Российской Федерации или индексируемые в SCOPUSВыражаю искреннюю благодарностьДиссертационное исследование посвящаю научному руководителю, академику Российскойакадемии наук, заведующей кафедрой гистологии и эмбриологии педиатрического факультета(1969 – 2013 гг.) Российского государственного медицинского университета им. Н.И. Пирогова(РНИМУ), доктору медицинских наук, профессору Ольге Васильевне Волковой за развитиеотечественной эмбриологии и репродуктологии; профессорам кафедры гистологии и эмбриологиипедиатрического факультета РГМУ им.

Н.И. Пирогова: д.б.н., Г.Г. Кругликову, д.м.н., А.Ю.Цибулевскому, к.м.н., М.И. Пекарскому; ректору Российского государственного медицинскогоуниверситета им. Н.И. Пирогова (1984 – 2007 гг.), академику РАН, доктору медицинских наук,профессору В.Н. ЯрыгинуОсобую признательность и благодарность приношу Пациентам, которые принимали участие вклинико-морфологическом исследовании, а такжеврачу-лаборанту (биологу) патологоанатомического отделения ФГБУ «Национальныймедицинский исследовательский акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И.Кулакова», канд.хим.наук, Н.М. Файзуллиной; заведующему Отделом патологической анатомииопухолей человека ФГБУ «Российский онкологический научный центр им.

Н. Н. Блохина», д.м.н.,профессору А.И. Карселадзе; заведующему патологоанатомическому отделению ФГБУ«Национальный научно-практический центр детской гематологии, онкологии и иммунологииимени Дмитрия Рогачева», к.м.н., Д.М. Коновалову за помощь при проведении морфологическихисследований.Фотографии (цветные), таблицы, графики и дополнительная информация подиссертации «Морфологически анализ сперматогенеза – основа диагностикимужского идиопатического бесплодия (иммуногистохимический аспект), атакже другие материалы располагаются в облачном хранилище данных (cloudstorage).26Приложение I. Цитологические (в норме), а также гистологические игистохимические реакции при необструктивной азооспермииРис. a. Семенник Rattus Wistar.