Автореферат (Морфологическая, иммуногистохимическая и морфометрическая характеристика зоба, аденом и карцином щитовидной железы), страница 3

2).Относительное количество эпителия максимально при раке щитовидной железы (в среднем 71,18±1,37%), минимальное количество наблюдалось при узловом нетоксическом зобе (всреднем 14,59±0,35%).Максимальное относительное количество стромального компонента наблюдалось придиффузном токсическом зобе (в среднем 14,79±0,67%), минимальное количество - при узловомнетоксическом зобе (в среднем 5,16±0,20%).11Относительное количество лейкоцитарной инфильтрации наблюдалось при аутоиммунном тиреоидите (в среднем 40,29±3,15%), минимальное количество было выявлено при узловомнетоксическом зобе (в среднем 3,44±0,20%).35100%90%571580%7913154031515113170%60%50%71237740%385830%4220%323610%110%ММФНТЗММФТЗДТЗАТАРГруппа патологииОтносительная площадь коллоидаОтносительная площадь эпителияОтносительная площадь стромыОтносительная площадь лимфоцитарной инфильтрацииРисунок.

2. Относительное количество тканевых компонентов щитовидной железы.Изучение полуколичественных параметров показало, что узловой нетоксический зоб характеризуется малым размером клеток и ядра, низким ядерно-цитоплазматическим индексом,плоской формой клеток, вытянутым нормохромным ядром, умеренной интрафолликулярнойпролиферацией эпителия, гомогенным коллоидом и диффузной лимфоидной инфильтрацией(Рисунок 3).Узловой токсический зоб характеризуется наименьшим размером клеток и ядра, минимальным ядерно-цитоплазматическим индексом, кубической формой клеток, округлым нормохромнымядром, очаговой интрафолликулярной пролиферацией эпителия, сетчатым коллоидом, выраженной краевой вакуолизацией коллоида, очаговой лимфоидной инфильтрацией, и кровоизлияниями(Рисунок 4).Диффузный токсический зоб характеризуется средним размером клеток и ядра, довольновысоким ядерно-цитоплазматическим индексом, кубической формой клеток, округлым нормохромным ядром, редкой интрафолликулярной пролиферацией эпителия, гомогенным коллоидом, и краевой вакуолизацией коллоида (Рисунок 5).12Аутоиммунный тиреоидит характеризуется небольшим размером клеток и ядра, среднимядерно-цитоплазматическим индексом, плоской формой клеток, округлым нормохромным ядром,гомогенным коллоидом и выраженной лимфоидной инфильтрацией (Рисунок 6).Аденома щитовидной железы характеризуется большим размером клеток и ядра, высокимядерно-цитоплазматическим индексом, кубической формой клеток, округлым гиперхромным ядром, диффузной интрафолликулярной пролиферацией эпителия и плотным коллоидом (Рисунок 7).Рак щитовидной железы характеризуется наибольшим размером клеток и ядра, максимальным ядерно-цитоплазматическим индексом, полиморфными клетками, округлым гиперхромнымядром, выраженной диффузной интрафолликулярной пролиферацией эпителия и папиллярнымиструктурами с короткими широкими сосочками (Рисунок 8).Для подтверждения значимости иммуногистохимических маркеров в диагностике фолликулярных образований были использованы наиболее информативные маркеры: галектин-3, цитокератин-19, HBME-1.Окрашивание антителами к галектину-3 показало его экспрессию опухолевыми клетками снакоплением галектина-3 в цитоплазме опухолевых клеток (до 60% клеток) и в фолликулярныхклетках, прилежащих к опухолевому очагу (15% клеток).

При этом, оценка экспрессии галектина3 при аденоме щитовидной железы показала меньший уровень накопления галектина-3 в клетках(15-25% клеток) (Рисунок 9, Рисунок 10).Оценка экспрессии HBME-1 в клетках фолликулярного рака показывает его преимущественное накопление в строме и капсуле с незначительным распространением в опухолевых клетках (36% клеток). В исследуемых случаях фолликулярной аденомы только в одном случае отмечалась экспрессия HBME-1 в единичных клетках (2% клеток). (Рисунок 11, Рисунок 12).Накопление цитокератина-19 отмечалось во всех случаях фолликулярного рака и фолликулярной аденомы, различаясь интенсивностью экспрессии. При этом накопление цитокератина преимущественно наблюдалось в цитоплазме фолликулярных тироцитов и у клеток фолликулярногорака оценивалось как очень интенсивное, в то время как клетки фолликулярной аденомы характеризовались умеренной экспрессией этого белка (Рисунок 13, Рисунок 14).В целях поиска объективных критериев морфологической диагностики тиреоидной патологии был применен дискриминантный анализ полученных морфометрических параметров.

В результате анализа были рассчитаны 6 дискриминантных уравнений, позволяющих классифицировать новые случаи тиреоидной патологии в 6 групп, соответствующих изучаемым.При исследовании только количественных показателей структуры щитовидной железыгруппировка объектов исследования методом дискриминантного анализа показала достоверностьразличий между исследованными группами по данным показателям с точностью более 95%(P<0.05). Однако наблюдалось ошибочное отнесение показателей из группы ММФНТЗ в группуММФТЗ в 20% случаев, в группу АТ – в 4,3%; из группы ДТЗ в группу АТ – в 29,2%; из группы Рв А – в 17,6% случаев.13Рисунок 3. Макро-микрофолликулярныйРисунок 4. Макро-микрофолликулярныйнетоксический зоб. Уплощенный фолли-токсический зоб Кубический эпителий скулярный эпителий с уплощенными иокруглыми ядрами; выраженная вакуо-овальными ядрами; гомогенный уме-лизация коллоида.

Окраска гематоксили-ренно плотный коллоид. Окраска ге-ном – эозином, ´200.матоксилином – эозином, Х400.Рисунок 5. Диффузный токсический зоб.Рисунок 6. Аутоиммунный тиреоидит. Уча-Участок микрофолликулярного строения сток микрофолликулярного строения с выс диффузной пролиферацией эпителия.раженной лимфоидной инфильтрацией,Окраска гематоксилином – эозином,формированием лимфоидных фолликулов´100.со светлыми центрами размножения.Окраска гематоксилином – эозином, Х100.14Рисунок 7. Аденома щитовидной железы.Рисунок 8.

Рак щитовидной железы. Уча-Участок микрофолликулярного строе-сток сосочковой структуры с выражен-ния; фолликулы выстланы атипичнымным полиморфизмом клеток. Окраска ге-высоким цилиндрическим эпителием сматоксилином – эозином, Х100.гиперхромными ядрами.

Окраска гематоксилином – эозином, Х100.Рисунок 9. Фолликулярный рак. Интен-Рисунок 10. Фолликулярная аденома.сивная экспрессия галектина-3 в опухо-Экспрессия галектина-3 средней интен-левых клетках. Иммуногистохимическаясивности. Иммуногистохимическая реак-реакция с антителами к галектину-3,ция с антителами к галектину-3, Х400.Х400.15Рисунок 11. Фолликулярный рак. Экс-Рисунок 12. Фолликулярная аденома.прессия HBME-1 в капсуле опухолевогоЭкспрессия HBME-1 в единичных клет-узла.

Иммуногистохимическая реакция сках опухолевого узла. Иммуногистохими-антителами к HBME-1, X200.ческая реакция с антителами к HBME-1,X200.Рисунок 13. Фолликулярный рак. Экс-Рисунок 14. Фолликулярная аденома.прессия цитокератина-19 в клетках опу-Экспрессия цитокератина-19 средней ин-холевого узла. Иммуногистохимическаятенсивности. Иммуногистохимическаяреакция с антителами к цитокератину-19, реакция с антителами к цитокератину-19,X400.Х400.При исследовании всей совокупности количественных и полуколичественных показателейструктуры щитовидной железы группировка объектов исследования показала достоверность различий между исследованными группами по данным показателям с точностью более 99.9%(P<0.001).

И наблюдалось 100%-е правильное распределение случаев по группам патологии.Проведение пошагового дискриминантного анализа по методу лямбда Уилкса позволиловыделить 25 наиболее значимых для классификации случаев параметров структуры щитовиднойжелезы: ширина эпителия, ширина ядра, объем ядра, наличие плоских А-клеток, вытянутого ядра,гиперхромных ядер, многоядерных клеток, очаговой и диффузной интрафолликулярной16пролиферации эпителия, наличие овальных В-клеток, нормохромных гипо- и гиперхромных ядер,мономорфное строение узла, наличие тубулярных и папиллярных структур, коротких, узких сосочков, гомогенного, плотного и сетчатого коллоида, краевой вакуолизации коллоида и наличиедиффузной лимфоидной инфильтрации.Дискриминантный анализ показал, что использование только количественных параметровструктуры щитовидной железы не позволяет провести абсолютно достоверную дифференциальную диагностику тиреоидной патологии.

Только совокупность количественных и полуколичественных параметров со 100%-й достоверностью позволяет классифицировать новые случаи тиреоидной патологии. А выделение статистически значимых для классификации параметров позволяет сократить объем исследования и ускорить процесс дифференциальной диагностики.В целях математического моделирования и выявления основных тенденций динамики тиреоидной патологии был применен факторный анализ методом главных компонент.