Отзыв на автореферат 5 (Структурные и каталитические свойства ферментов перекисного окисления липидов – 1215-липоксигеназ)

Е1епа А ВохЫоча, Рп.Ю. Яс!еп1!з1, Рг!пс>ра! !пчеа69а1ог Агдоппе НАТ!ОНАТ ТАЬОААТОПТ Сеп1ег 1ог Мапоеса!е Ма1ег!а!а Агйоппе !у!а1!опа! !.аЬога1оцг 9700 Зон!и Сава Ачепце, ВЫ9. ххх Агдоппе, !!. 60439-хххх 1-630-252-2863 снопе 1-630-252-5739 1ах гохп!Еоча 0ап!.9оч 2 Ноября 2016 г.

В диссертационный Совет Д 212.131.06 на базе Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Московский технологический университет» 119571, г. Москва, пр. Вернадского, д.86 Отзыв на автореферат диссертационной работы Иванова Игори Владимировича "Структурные и каталитические свойства ферментов перекисного окисления липидов — 12/15-липоксигеназО представленной на соискание степени Доктора Химических Наук по специальности 02.00.10— бноорганическая химия.

качестве противовоспалительных и противоопухолсвых лекарственных средств. А С Я Сеаеапеп! а~ Епееау НЬаиоч непаеео Ьу ССЬтпдо Нааппе, аС Диссертация Игоря Владимировича Иванова — это результат многолетних комплексных исследований в области липоксигеназ, железосодержащих негемовых диоксиигеназ, отвечающих за трансформацию полиненасыщенных жирных кислот в клетке и производство физиологически активных метаболитов известных как окислипины. Несмотря на то, что первая липоксигеназа (из соевых бобов) была обнаружена более 60 лет назад, пе все особенности структуры и механизмов каталитической активности этого семейства ферментов ясны в настоящее время. Более того, изучение структурно- функциональных особенностей липоксигеназ млекопитающих представляет не только фундаментальный, но и практический интерес, так как ингибиторы биосинтеза оксилипипов могут найти применение в На защиту автором выносятся следующие основные положения: - разработка стратегий химического синтеза диагностических субстратов для изучения механизмов в активном центре липоксигеназ; — изучение транспорта и лигандирования кислорода в каталитический центр фермента и- структурные исследования липоксигеназы в условиях приближенных к реальным, т.е.

в растворе. Рациональныс и технологичные схемы синтеза производных жирных кислот, детально разработанные и оптимизированные автором, стали основополагающими для проведения большинства успешных биохимических и структурных исследований в области липоксигеназ, проводимых как в Институте Биохимии Медицинского Университета Вегйп-Слагйб, так и во многих других научных группах по всему миру.

Среди производных жирных кислот, полученных автором, региоселективные производные арахидоновой кислоты, вз/ гл -4 гидроксилированные кислоты на основе их ацетиленовых предшественников, а также азиды и тритий-меченные аналоги. Успешный синтез биоорганических соединений подобной сложности является показателем самого высокого класса экспериементального мастерства, и до сих пор вызывает глубокое уважение к автору, ученику Профессора Г.И.

Мягковой и последователю синтетической школы, основанной Профессором Н.А. Преображенским. Полученные соединения были использованы в качестве молекулярных диагностических зондов, что позволило детально изучить фермент-субстратные взаимодействия в каталитическом центре фермента.

Анализ полученых экспериемнтальных данных, а также компьютерные симуляции методами молекулярной динамики позволили И.В. Иванову и соавторам сформулировать новую структурная модель липоксигеназного катализа, которая предусматривает формирование переходных димеров фермента на предкаталитической стадии. Другими не менее важными и интересными являются результаты по исследованию транспорта молекулярного кислорода, его взаимодействия с каталитическим центром не только в процессе окисления субстрата, но и в процессе активации липоксигеназной реакции. Наконец, если в разделе направленного химического синтеза производных жирных кислот автор использует классические методы органической и биоорганической синтетической химии, третий раздел диссертации включает использование современных передовых методов структурной биологии.

Современные методы рентгеновского анализа структуры белка не ограничиваются исследованиями статической кристаллической структуры ш иасио, так как в реальных условиях молекула белка претерпевает динамические копформационныс изменения в процессе взаимодействий с окружающими молекулами, такими как вода, лиганды, ионы, газ и другие макромолекулы. АСАХИ (метод мапоуглового рентгеновского рассеяния) позволяет проводить структурный анализ биологических макромолекул в растворах в широком диапазоне размеров от небольших полипептидов до крупных молекулярных "машин".

Использование сфокусированных рентгеновских лучей синхротрона позволяет производить анализ при низких концентрациях молекул белка с высокой степенью разрешения. С применением АСАХИ, а также комплиментарных методов кругового дихроизма и динамической флуоресценции автором были изучены междоменные взаимодействия в молекуле липоксигеназы, в частности, была определена роль взаимодействий между М-терминальным доменом и каталитической субъединицей в каталитических свойствах фермента. Положения, выносимые на защиту диссертации, подробно изложены в 22 зкспериемнтальным статьях и 4 обзорах, а также опробированы авторам на многочиссленных научных симпозиумах. Перед нами качественно выполненная научно-квалификационная работа, автором исследований получены и опубликованы убедительные зкспериемнтальные данные и разработаны теоретические положения, совокупность которых можно квалифицировать как научное достижение.

Без сомнения, соискатель заслуживает искомой степени доктора химических наук, и остается пожелать Игорю Владимировичу дальнейших научных успехов. Рожкова Елена Анатольевна, к.х,н., ведущий научный сотрудник. Группа Нанофотоники и Биофункциональных Структур, Центр Наноразмерных Материалов Аргоннская Национальная Лаборатория, Аргонн, Иллиноис, США. .