Отзыв на автореферат 1 (Структурные и каталитические свойства ферментов перекисного окисления липидов – 1215-липоксигеназ)

отзыв на автореферат диссертационной работы Игоря Владимировича Иванова «Структурные и каталитические свойства ферментов перекисного окислении липидов — 12/15-липокснгеназ»ч представленной на соискание ученой степени доктора химических наук по специальности 02.00.10 — биоорганическая химия Работа И.В. Иванова посвящена исследованию структуры и функции липоксигеназы (12/15-1.ОХ) кролика, которая имеет наибольшее сходство с липоксигеназами человека. Липоксигенезы осуществляют синтез оксилипинов из полиненасыщенных жирных кислот. Оксилипины являются не только эффекторами активации сигнальных путей, но и участвуют в трансдукции сигнала, выполняя функцию вторичных мессенджеров.

Однако липоксигеназы человека вовлечены в биосинтез лейкотриенов, которые приводят к возникновению ряда заболеваний человека - атеросклероза, аутоимунных, раковым заболеваниям и нечувствительности к инсулину. Попытки создания лекарственных препаратов на основе ингибиторов синтеза оксилипинов пока неудачны из-за низкой эффективности. Это свидетельствовало о том, что существующие представления о регуляции активности фермента недостаточно изучены.

Автор предложил гипотезу о том, что структурно-функциональные особенности фермента нужно изучать не на основании статической кристаллической структуры комплекса липоксигеназ с лигандом активного центра, а с помощью нового подхода — изучения динамической структуры фермента, включающей изучение внутри- и межмолекулярных взаимодействий фермента и лигандов в физиологической среде, Кроме широкого круга современных физико-химических методов в работе использованы способы направленного мутагененеза и компьютерного моделирования, что не позволяет усомниться в результатах исследования. Нужно отметить большое количество новых методических подходов для решения поставленной задачи.

Так, получены зонды активного центра фермента, впервые осуществлен синтез гидроксилированных ПНЖК на основе их ацетиленовых предшественников, разработаны способы введения тритиевой метки в структуру зондов. Предложенный автором подход позволил охарактеризовать структурно- функциональное устройство фермента. Нужно отметить большую новизну исследования. Впервые было проведено изучение внутри- и межмолекулярной организации г12/15-ЬОХ в растворе и предложена кинетическая модель липоксигеназной реакции, включающая участие кислорода не только как субстрата, но и как активатора фермента, участие аллостерического эффектора (13(5)-Н1р)ОРЕ) в качестве молекулярного триггера, сдвигающего равновесие в сторону образования димеров фермента, которые являются каталитически активной единицей.

Показана роль междоменного взаимодействия. В результате автором предложена новая структурная модель липоксигеназного катализа. Результаты работы могут иметь и большую перспективу в практическом применении, например для создания эффективных ингибиторов с целью лечения воспалительных н аутонммунных заболеваний, атеросклерода и др. Автореферат написан ясно и лаконично, выводы хорошо аргументированы, результаты работы достойно представлены научной общественности на конференциях и в статьях.

Замечаний не возникло. В итоге работа И.В. Иванова по актуальности проблемы, высокой новизне полученных данных, большому объему исследований и современному методическому уровню пол- .