Курсовая работа: Функционирование лактатдегидрогеназы в гепатоцитах крыс в условиях аллоксанового диабета

РЕФЕРАТ

САХАРНЫЙ ДИАБЕТ, АЛЛОКСАНОВЫЙ ДИАБЕТ, ЛАКТАТДЕГИДРОГЕНАЗА, АКТИВНОСТЬ, ИЗОФЕРМЕНТЫ, ЭКСПРЕССИЯ
В ходе работы была исследованаскорость функционирования лактатдегидрогеназы в печени здоровых крыс и животных с аллоксановым диабетом.
Установлено значительное понижение активности лактатдегидрогеназы в клетках печени крыс, больных сахарным диабетом, что, вероятно, связано с инактивацией одной из цитоплазматических форм фермента. Полученные в ходе работы результаты позволяют заключить, что низкая активность ЛДГ при патологии коррелирует с невысокой скоростью транскрипции кодирующих ее субьединицы генов.








ОГЛАВЛЕНИЕ
ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ, СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ И ТЕРМИНОВ
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1.Общая характеристика лактатдегидрогеназы
1.1.1. Характеристика изоферментов ЛДГ
1.1.1. Генетическая детерминация лактатдегидрогеназы
1.1.3. Функции лактатдегидрогеназы
1.2. Субклеточная локализация и монокарбоксилатные переносчики лактата
1.3. Краткая характеристика сахарного диабета и его клиническая картина
1.4. Аллоксановый диабет в лабораторных условиях
Глава 2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Цели и задачи исследования
2.2. Объекты и методы исследования
2.2.1. Объекты исследования
2.2.2. Методы исследования
2.2.2.1.Индуцированиеаллоксанового диабета в лабораторных условиях
2.2.2.2. Измерение уровня глюкозы в крови подопытных животных
2.2.2.3. Получение материала для исследования
2.2.2.4. Экстракция ЛДГ
2.2.2.5. Выделение субклеточных фракций
2.2.2.6. Измерение активности ЛДГ спектрофотометрическим методом
2.2.2.7. Определение содержания белка.
2.2.2.8. Разделение изоферментов ЛДГ электрофоретическим методом.
2.2.2.9. Специфическое проявление ЛДГ
2.2.2.10. Разработка олигонуклеотидных последовательностей к генам
2.2.2.11. Выделение РНК.
2.2.2.12. Количественный анализ РНК
2.2.2.13. Электрофорез нуклеиновых кислот в агарозном геле.
2.2.2.14. Обратная транскрипция.
2.2.2.15. Полимеразная цепная реакция
2.2.2.16. Проведение полимеразной цепной реакции в реальном времени.
2.2.2.17 Статистическая обработка данных.
2.3 ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
2.3.1. Анализ динамики развития аллоксанового диабета
2.3.2. Активность ЛДГ в образцах печени
2.3.3. Изоферментный состав ЛДГ
2.3.4. Идентификация генов лактатдегидрогеназы в исследуемых образцах печени
2.3.5.Определение относительного уровня транскриптовлактатдегидрогеназы в образцах печени
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ, СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ И ТЕРМИНОВ ВВЕДЕНИЕ

АТФ – аденозинтрифосфорная кислота
ВОЗ – Всемирная организация здравоохранения
ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота
кДа – килодальтон, единицы молекулярной массы
кДНК– комплементарная дезоксирибонуклеиновая кислота
ЛДГ – лактатдегидрогеназа
мг – миллиграмм
мин – минута
мкл – микролитр
мл – миллилитр
мМ – миллимоль
мРНК– матричная рибонуклеиновая кислота
РНК–рибонуклеиновая кислота
НАД – никотинамидадениндинуклеотид
NADH– никотинамидадениндинуклеотид
НСТ – нитросинийтетразолий
ПВК – пировиноградная кислота
TEMED– тетраметилэтилендиамин
ФМС – феназинметосульфат
МСТ – монокарбоксилатный переносчик
ЭДТА– тилендиаминтетрауксусная кислота
ДТТ–дитиотреитол
ПЦР– полимеразная цепная реакция

ВВЕДЕНИЕ

Сахарный диабет является серьезным и распространенным заболеванием. Согласно данным ВОЗ, количество больных сахарным диабетом за последние десятилетия удвоилась, общее число больных сахарным диабетом, которое зарегистрировано в России превышает 4,5 млн. человек. [1]. Данная болезнь затрагивает все уровни организма. Основным симптомом этого хронического заболевания является повышенный уровень глюкозы крови вследствие недостаточной секреции (или её отсутствия) поджелудочной железой инсулина, а также плохой клеточный ответ на действие данного гормона. Сахарный диабет связан со многими метаболическими осложнениями, которые могут в совокупности привести