Кокряков - Биология антибиотиков животного происхождения - 1999 (947290), страница 25
Текст из файла (страница 25)
Дефенсины морской свинки в концентрации 15 нг/мл увеличивают экспрессию С011в, С011с и С054 (межклеточная адгезивная молекула 1САМ-1) на поверхности нейтрофильных гранулоцитов от 42.1+1.6 до 58.312,3 % и адгезию НГ морской свинки и человека. Они ингибируют продукцию супероксидных анионов в процессе фагоцитоза комплемент-опсонизированных частиц зимозана, но не влияют Иа генерацию О, при фагоцитозе 18О опсонизированного латекса в активацию нейтрофилов формилметиониллейцил-пептндами и фог1рболмиристатацет атом. 7З. ВЛИЯНИЕ АНТИБИОТИЧЕСКИХ ПЕПТИДОВ И БЕЛКОВ НА НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ГЕМОСТАЗА Известна способность таких катионных белков, как протаыин (Кв асапеП1 ег а1., 1985), тромбоцитарный фактор 4 (Х1еМагоюз1с1, 1976о), "фактор из ткани селезенки (Ляпина, Азиева, 1985), вступать в элек=-тростатическое взаимодействие с гепарином и ингибировать в резуля ь, тате этого неферментативную фибринолитическую активность кровли, определяемую комплексными соединениями гепарина с протеинами и ,' аминами — основными гуморальными агентами противосвертывакио.
щей системы (Кудряшов, 1975; 01пзЬег8, НзгаЬ, 1988). В свете этжх данных представляло интерес изучение влияния парентерально нвее; денных дефенсинов на функциональное состояние противосвертываа' ющей системы организма в условиях, моделирующих некоторые па' тологические состояния гемостаза. Такой подход тем более обосназван, что наличие дефенсинов в плазме крови человека (РаауипсЬ «е1 а1., 1991) и кролика (Ни ес а1., 1993) доказано однозначно, Дефенсины кролика, введенные в дозе 125 мкг/кг, или 1.25 мг/к-х, ' достоверно снижают такие показатели противосвертывающей систеемы крови, как неферментативный фибринолиз и уровень гепард-та (вариант 2) (табл.
7). Будучи инъецированными в тех же дозах на фаз. не активации функции противосвертывающей системы (вариант 4-), : полипептиды способствовали достоверному снижению суммарнсзй „фибринолитической активности плазмы в 1.4 раза в первом и 2.6 рала во втором случае по сравнению с вариантом 3, когда животным вводили тромбопластин.
При этом резко снижался неферментативньжй фибринолиз плазмы (в 1.7 и 4 4 раза соответственно), В пользу этог о свидетельствуют также данные об уровне гепарина в крови. Повышение концентрации свертываемого тромбином фибриногена н этот период указывает на блокирующий эффект дефенсинов в отношениями комплексов гепарина с белками плазмы, в частности с фибриногеноз«». Дефенсин, по-видимому, разрывает связи между гепарином и белками крови, вследствие чего исчезает присущее комплексам гепарина антиполимеризационное действие и концентрация фибриногена, свертываемого тромбином, увеличивается.
Следовательно, дефенсин влияет в рассматриваемых условиях в основном на неферментативный фнбринолиз и антикоагулянтные свойства плазмы крови, обусловленные комплексными соединениями гепарина (Кудряшов и др., 1988). В другой серии опытов выяснили действие дефенсинов в кровотоке при депрессии функции противосвертывающей системы, вызываемой аминазином. Установлено, что при введении в дозе 125 мкг/кг дефенсин приводит к достоверному снижению неферментативного фибринолиза плазмы в 1.3 раза и уменьшению уровня гепарина на 60 % по сравнению с контролем (табл, 8). Показатели коагулограммы плазмы Таблица 8 Таблица 7 Т Биохимические показатели крови крыс после виутривеииого введения дефеисиив шзвотним с активацией функции противосвертиватощей системы (Мйп) Примеч ание.
Вариант 1. Введение 0.85 % раствора ХаС1, через 5 мин 0.85 % раствора ХаС1. Вариант 2. Введение 0.85 % раствора МаС1, через 5 мин раствора дефенсина. Вариант 3. Введение тромбопластина, через 5 мнн 0,85 % раствора МаС1. Вариант 4. Введение тромбопластнна, через 5 мин раствора дефенснна. Статистические показатели рассчитаны относительно соответствующих проб варианта 3. А — дефенсин в дозе 125 мкг(кг, Б — дефенсин в дозе 1.25 мт(кг. крови и концентрация фибриногена не отличались от контрольных величин. На основании этих данных можно считать, что дефенсины при депрессии функции противосвертывающей системы не усутубляют это состояние, влияя лишь на гепарин и его комплексные соединения. Уровень гепарина уменьшался, по-видимому, вследствие взаимодействия дефенсина с гепарином, при высвобождении последнего из комплексов с протеинами и аминами (Кудряшов и др., 1988; Ляпина и др., 1992).
Таким образом, как в условиях активации функции противосвертывающей системы, так и при ее депрессии внутривенно введенный дефенсин как катионный полипептид соединяется с отрицательно заряженным гепарином, высвобождая последний из комплексов с бел- Биокимические показатели крови чере че з 20 мин после введения дефеисинв в условная депрессии Функции противосвертывазо щей системвт е показат и ассчнтаны отн снтель пр но об конПримечание Статистически троля, Т1 — время начала свертывания крови (сек), Тз — время конца крови (сек), Т вЂ” разносп Тз — Т~. к ови.
Вследствие этого в крови наблюдается умеренное сниже- ками крови. сл ажно что дефенсин не у~угубляе~ депрессию функции про~ив тывающей системы. На основан луч ии по енных данных можно з к овото- чить что при различных состояния р иях о ганизма появление в р уров> е енно снижению повышенного ке д фенсинов приводит к умер му й и нефе ментативной ~ри рино Сл дефенсин мо- активностей до контрольных значе . Сл начений.
Следовательно, ф атив- жет применяться в условиях чрезмер зме ной активности нефермент к ови в акушер- ного ц и ринолиза ф б а для нормализации свертывания крови в ие ефенсина при повы- скои и хир~;ги ирургической практике. Использование дефе ак как он не создает шенной свертываемости крови возможно, так е ии экспе иментов нами аряду с активность дефенсииов ~ уд- была продемонстрирована ангиогенная акти . 1989а), никем ранее не описанная. При длительном еже- ряшов и др., а, н чном введении в заднюю 14 ей, в имышечно л крыс дефенсинов кролика в дозе 125 мхг кг выя лапху кр удов в скелетных мыпщах, диаметра артери- ние плотности микросос, твия ефенсинов остается л и капилляров.
Механизм подобного действия деч енси ол и капилляров. в контексте нашего изложения следует не расшифрованным. Однако в конте ости предположить возможность реализац р тр ии ассма иваемои активн дефенсинов на репаративной стадии воспаления (Кудряшов и др., 1990). В пользу этого предположения свйдетельствуют данные С. МпгрЬу и др. (1993) о митогенной активности малых концентраций дефенсинов, проявляемой в культуральных условиях. Формирование полноценного в функциональном отношении очага воспаления немыслимо без поддержания гемостаза на уровне микроциркуляторного русла органов и тканей.
Естественно предполагать участие в этом процессе катионных пептидов и белков, локализованных первоначально в гранулярном аппарате НГ и секретируемых во внеклеточное пространство под воздействием многочисленных меди- атаров воспаления (Непзоп е1 а1., 1992). Поскольку многие инициирующие воспаление факторы оказывают на сосуды повреждающее действие, перед организмом в этих условиях встает задача сокращения кровопотерь до минимума. Первые сведения о прокоагулирующей активности низкомолекулярных катионных белков (дефенсинов) кролика были получены на моделях ш ч11го в конце 60-х годов (ЗаЬа е1 а1., 1967; Наю1яег е~ а1., 1969). В ее основе лежит способность дефенсинов, как поликатионов, электростатически взаимодействовать с полианионным по природе гепарином, нейтрализуя при этом физиологические свойства последнего.
Выше нами были рассмотрены результаты совместных исследований с сотрудниками кафедры физиологии человека и животных МГУ им. М.В.Ломоносова (руководитель— акад. РАМН И. П, Ашмарин) по изучению влияния общей фракции дефенсинов кролика на систему неферментативного фибринолиза крови. Основной вывод этих исследований заключается в признании за дефенсинами прокоагулирующей активности. Кроме того, зарубежными исследователями была продемонстрирована способность дефенсинов человека влиять ингибирующим образом и на каскад ферментативного фибринолиза крови.
В частности, было показано, что дефенсины ингибируют фибринолиз, запускаемый активатором плазминогена тканевого типа ($РА) (Нфах1 е1 а1., 1995, 1996). Они способствуют связыванию плазминогена с фибрином и культуральными эндотелиальными клетками человека. Этот эффект напоминает тот, который был описан для липопротеина (а) (1.ш е~ а1., 1994), ингибирующего фибринолиз посредством крингл-крингл-подобного взаимодействия. Так же, по-видимому, действует и дефенсин человека, который конкурирует с плазминогеном за связывание с фибрином. Возможно, что антифибринолитическая активность дефенсина в очагах воспаления служит фактором, препятствующим распространению инфекции благодаря иммобилизации бактерий в фибриновых сгустках. Не последнюю роль в поддержании крови в растворимом состоянии щрают, по-жщимому, сериновые протеиназы (эластаза, катепсин О) нейтрофильных гранулоцитов. Группой американских ученых продемонстрирована способность лейкоцитарной эластазы осуществлять фибринолиз (Р1оп, 1986).
Причем данная фибринолитическая система функционирует в организме независимо от плазмина. В пользу этого говорит неидентичность продуктов переваривания фибрииогена двумя протеолитическими системами. Предполагают, что роль дополнительной фибринолитической системы может значительно возрастать в условиях очага воспаления, Все эти данные свидетельствуют о возможной функции катионных пептидов и белков в гемостазе. Один из важных механизмов поддержания гемостаза связан с тромбоцитами и их физиологически активными соединениями.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
