vozbuditeli_venericheskikh_zabolevaniy_2 1 (834019)
Текст из файла
Возбудители венерическихзаболеванийк.м.н. Давидович НаталияВалерьевнадоцент кафедры клиническойбиохимии, микробиологии илабораторной диагностикиАктуальностьGlobal incidence ofselected STIs, 2009,WHOАктуальностьПлан лекцииTreponema pallidumNeisseria gonorrhoeaeChlamydiatrachomatisHaemophilus ducreyiMycoplasma hominisUreaplasmaurealyticumGardnerella vaginalisMobiluncusAtopobiumTrichomonasCandidaБледная трепонемаTreponema pallidumИзвестно 4 подвида T. pallidum, патогенных длячеловека:T.
pallidum pallidum — возбудитель сифилиса, наиболеешироко известенT. pallidum pertenue — возбудитель фрамбезииT. pallidum carateumT. pallidum endemicumTreponema pallidum••••МорфологияИзвитые бактерии0.2 μm * 5–15μm,10–20 завитков,Движенияротационные вокругсвоей осиКультуральные свойстваTreponema pallidum• Хемоорганогетеротроф,облигатный анаэроб• Не культивируются на простыхпитательных средах• Исследуются in vivo сиспользованием темнопольноймикроскопии• Не культивируются in vitro• Антигенные комплексы:полисахаридный, липидный ипротеиновый.Treponema pallidum,подвид pallidumВозбудитель сифилисаСифилис - хроническоесистемное венерическоеинфекционноезаболевание споражением кожи,слизистых оболочек,внутренних органов,костей, нервной системыс последовательнойсменой стадий болезни• Первые систематические мероприятия по борьбе ссифилисом были предприняты в царствование Петра I.В 1711 году был издан указ, согласно которому женщины,ведущие распутный образ жизни, помещались впрядильный дом, а «винные бабы и девки отсылалисьв мануфактур-коллегии»• «Лиц непотребного, неистового и соблазнительного житияженского пола помещать в смирительные дома»СифилисЛабораторная диагностикаTreponema pallidum• Выделение и идентификация патогена• Материал – отделяемое твердого шанкра (микроскопияв темном поле и ПИФ)• Серологический метод – определение антител• Реакция Вассермана.
Кардиолипиновый антигенбычьего сердца• Реакции преципитации (Кана и Закс-Витебского).Лабораторная диагностикаTreponema pallidum• Транссудат из твердогошанкра• ПрямаяиммунофлюоресценцияМетод прямойиммунофлюоресценции• Препараты исследуют сиспользованиемлюминесцентногомикроскопа при увеличениих200, х400 и х1000.• При этом клеткиокрашиваются вкраснооранжевый илижелтый цвет, бледнаятрепонема флюоресцируетярко-зеленым цветом,сохраняя всеморфологические признакиспирохеты.Тест на определение быстрыхплазменных реагинов (RPR)• При добавлении к плазме или сыворотке крови больногосифилисом суспензии стабилизированногокардиолипинового антигена, адсорбированного намелкодисперсных угольных частицах, происходитобразование комплексов «антиген-антитело»,собирающих частицы угля в более крупные агрегаты; приэтом результат реакции можно учитывать невооруженнымглазом.• Вид реакционной среды не изменяется, она остаетсягомогенной.Тест RPR• Тест RPR выполняют наспециальных картонных илипластиковых карточках одноразовогоиспользования, на которыхвыдавлены неглубокие лункидиаметром 18 мм.• Проводят разметку карточек: ручкойили карандашом надписывают номерисследуемого образца сыворотки илиплазмы крови в соответствии сзаписями в журнале регистрациирезультатов RPR-теста.• В лунки карточек вносят образцыисследуемой сыворотки или плазмыкрови и суспензию антигена.
Дляобразования комплексов «АГ+АТ»содержимое лунок перемешивают втечение 8 мин при комнатнойтемпературе на платформеорбитального шейкера.• При отсутствии антител висследуемом образце внешний видреакционной среды не изменяется,она остается гомогенной.Техника постановки RPR-тестаКритерии оценки результатаRPR-теста• Учет при хорошем освещении,держат в руках и слегка покачиваютдля четкой регистрации можноиспользовать 2х лупу• О наличии реагиновых АТ –образование флоккулята ипросветление реакционной средыRPR-тест - преимущества• RPR-тест – прост в исполнении, недорогой,не требует специального оборудования, нетребует длительного времени,высокочувствителен и специфичен• Положительная реакция через 2-4 неделипосле появления твердого шанкра• Специфичность 98%• Чувствительность: первичный сифилис -86%;вторичный – 100%; скрытый - 98%; поздний –73%RPR-тест – оценка эффективностилечения1.
Снижение титра преципитинов2. Снижение степени позитивности RPR-теста(положительная, слабоположительная,отрицательная)• Оценка степени излеченности• Дифференциальная диагностикареинфекцииТрепонемные тесты• К трепонемным реакциям относятся• ИФА,• РПГА или ее разновидность - методмикрогемагглютинации T. pallidum (МГА-TP),• Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ),• РИФ,• Иммуноблотинг (ИБ)• Тест с использованием хроматографических полосок«анализ по месту лечения» (point-of-care).В этих тестах применяют антиген бледной трепонемы (РИФ,РИБТ), рекомбинантные белки, полученные генноинженерным способом, или искусственносинтезированные пептиды (ИФА, РПГА,модифицированный иммуноблотинг ииммунохроматографический тест).Treponema pallidum• Антитрепонемные антитела.
РПГАTreponema pallidum• Реакция ИФА• Обнаружение IgM и IgGTreponema pallidumРеакция иммобилизации трепонем(РИТ)• Живые трепонемы (штаммНиколь) обездвиживаются вприсутствии антител сывороткибольногоNeisseria• СемействоNeisseriaceae• Род Neisseria• N. gonorrheae• N. meningitidis.• Другие виды родаNeisseriaнормальнаямикрофлораслизистых.N. gonorrheaeГонорея• Инфекционное заболевание,передаваемое половым путём ихарактеризующееся поражениемслизистых оболочек половых органов иорганов мочеиспускания• При гонорее поражаются слизистыеоболочки чаще всего половых путей, номогут поражаться слизистая прямойкишки, конъюнктива, ротоглоткаNeisseria gonorrhoeae• Морфология икультивирование• Гонококки Грам (-),располагаются в видекофейных зерен, диплококкиразмер 1 μm• Пили на поверхности бактерииобеспечивают их адгезию наклетки слизистой• Гонококки растут на средахбогатых белком.Культивируются в атмосфере5–10 % CO2Neisseria gonorrhoeaeФакторы агрессии• Пили- адгезия на слизистую уретры и влагалища• Opa –протеин наружной мембраны – адгезия наслизистую урогенитального тракта и инвазия путемэндоцитоза.• Порин наружной мембраны (Por) - препятствиеслиянию фагосомы и лизосомы, что приводит кразмножению гонококков в фагоцитах(незавершенный фагоцитоз).• ЛПС наружной мембраны – устойчивость ккомплементу и развитие воспаления.• Гонококки имеют сидерофоры – белки лактоферрин итрансферрин, способствующие ускореннойпролиферации возбудителя гонореи.• IgA1 протеаза гонококков - гидролиз секреторныхантител в мукозальном секрете слизистойурогенитального тракта.Neisseria gonorrhoeaeДиагностика• Метод выборамикроскопияокрашенныхпрепаратовметиленовой синьюи по Граму• БактериологическийметодNeisseria gonorrhoeaeЗабор материалаБактериологический метод• N.
gonorrhoeae весьма требовательнак составу питательных сред:определенные концентрацииаминокислот, пуринов и пиримидинов,усваиваемых бактерией источниковэнергии (глюкозы, пирувата).• Селективные среды (агар ТайераМартина и др.) содержатантибактериальные препараты,подавляющие рост постороннеймикрофлоры (линкомицин,ванкомицин, колистин, нистатин,амфотерицин В, триметоприм)• Некоторые ингредиенты питательныхсред (крахмал, уголь, кровь, дрожжи)действуют как адсорбирующиевещества и могут ингибировать ростN.
gonorrhoeae.Культуральное исследованиеПри обнаружении колоний с типичной для гонококковморфологией проводят предварительную идентификацию.При необходимости проводят подтверждающуюидентификацию для постановки окончательного диагнозагонореи.Первичную идентификацию нейссерий осуществляютпосредством:•визуальной оценки вида колоний;•микроскопии подозрительных колоний, окрашенных поГраму;•оксидазного теста.•В течение 18-24 ч инкубации N. gonorrhoeae образуетвыпуклые прозрачные колонии серо-белого цвета,диаметром 0,5-1,0 мм. При дальнейшей инкубацииколонии увеличиваются в размерах (до 3,0 мм) иуплощаются.
Нередко на одной чашке встречаютсяколонии различной морфологии.Культуральное исследование• Большие трудности возникают при идентификации N.gonorrhoeae в посевах из ротоглотки, так как частонаблюдается рост N. meningitidis и непатогенныхнейссерий, колонии которых схожи с колониями N.gonorrhoeae.• Колонии N. meningitidis - голубоватые,• непатогенных нейссерий - беловатые,• N. gonorrhoeae - бесцветные, слизистые.• Размер, цвет, морфология и консистенция колониймогут варьировать в зависимости от применяемойпитательной среды.• Идентифицировать возбудителя можно только приопределении сахаролитических свойств или спомощью других тестов, подтверждающих видовуюпринадлежность микроорганизма.Культуральное исследование• При рутинной диагностике обнаружениеоксидазоположительных грамотрицательныхдиплококков считают достаточным для подтвержденияих принадлежности к виду N.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.