66622 (687662), страница 7

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 7)

2) бактерии группы кишечных палочек;

3) сальмонелла;

4) сульфитредуцирующие клостридии;

5) staphylococcus aureus;

6) плесени;

7) дрожжи.

Для автоматического подсчета KOE (CFU) в 1 г можно воспользоваться коммерческим калибровочным файлом FISH. COR. Микробиологические показатели для данной группы пищевых продуктов определяются по методикам, представленным в гл. 3 данных

Указаний.

5.3. Молоко и молочные изделия

1) молоко пастеризованное (группа А; группа В; во флягах и цистернах);

2) молоко коровье сухое цельное;

3) кисломолочные продукты (кефир, простокваша, сметана всех видов);

4) мороженое;

5) творог мягкий диетический;

6) масло крестьянское сладко-сливочное.

Определяемые показатели (указаны для всей группы продуктов):

1) мезофильные аэробные и факультативные анаэробные микроорганизмы;

2) бактерии группы кишечных палочек;

3) сальмонелла;

4) staphylococcus aureus.

Для автоматического подсчета KOE (CFU) в 1 мл (или 1 г) продукта можно воспользоваться коммерческим калибровочным файлом MILK. COR.

Микробиологические показатели для данной группы пищевых продуктов определяются по методикам, представленным в гл. 3 данных

Указаний.

5.4. Кондитерские изделия

1) кондитерские сахаристые изделия (конфеты, пастила, орехи и т.п.);

2) кондитерские мучнистые изделия (рулеты, торты, кексы, вафли и т.п.).

Определяемые показатели (указаны для всей группы продуктов):

1) мезофильные аэробные и факультативные анаэробные микроорганизмы;

2) бактерии группы кишечных палочек;

3) сальмонелла;

4) staphylococcus aureus;

5) дрожжи;

6) плесени.

Для автоматического подсчета KOE (CFU) в 1 г можно воспользоваться коммерческим калибровочным файлом CONFECT. COR.

Микробиологические показатели для данной группы пищевых продуктов определяются по методикам, представленным в гл. 3 данных

Указаний.

5.5. Консервы

Контроль микробиологического качества консервов проводится в соответствии с действующей "Инструкцией о порядке санитарно- технического контроля консервов на производственных предприятиях, оптовых базах, в розничной торговле и на предприятиях общественного питания", утвержденной Комитетом государственного санэпиднадзора Российской Федерации 21 июля 1992 г., N 01-19/9-11, и ГОСТами "Консервы. Методы микробиологического анализа", 1993 г. В данных Указаниях приводится методика определения соответствия консервов требованиям промышленной стерильности и микробиологической стабильности. Определяемые показатели:

1. мезофильные аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы;

2. мезофильные анаэробные микроорганизмы;

3. дрожжи и плесневые грибы;

4. молочнокислые микроорганизмы. Микробиологические показатели для данной группы пищевых продуктов определяются по методикам, представленным в гл. 3 данных Указаний.

5.6. Напитки

1. Минеральные воды (питьевые).

2. Напитки без консерванта и с консервантом.

3. Пиво:

а) специальные сорта (сухие вещества 12% и более);

б) массовые сорта (сухие в сусле 10 - 11%).

4. Соки: стерилизованные с большим сроком хранения исследуются на промышленную стерильность с термостатной выдержкой по ГОСТу.

Определяемые показатели (указаны для всей группы продуктов):

1) мезофильные аэробные и факультативные анаэробные микроорганизмы;

2) бактерии группы кишечных палочек;

3) сальмонелла;

4) pseudomonas aeruginosa.

Для автоматического подсчета KOE (CFU) в 1 мл можно воспользоваться коммерческим калибровочным файлом DRINK. COR.

Микробиологические показатели для данной группы пищевых продуктов определяются по методикам, представленным в гл. 3 данных

Указаний.

6. Исследование питьевой воды

Утратил силу. - МУК 4.2.1111-02, утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 26.02.2002

7. Исследование парфюмерно-косметической продукции

Исследование парфюмерно-косметической продукции проводится в соответствии с "Временным перечнем показателей, подлежащих обязательному контролю при проведении гигиенической сертификации средств гигиены полости рта и парфюмерно-косметических средств" от 21.12.93 ГКСЭН РФ.

Вид продукции:

1) Зубные пасты.

2) Парфюмерно-косметические средства:

2.1. ампульная косметика - стерильная продукция;

2.2. косметика для глаз, средства ухода за младенцами;

2.3. косметика для общего употребления.

Определяемые показатели (для косметики общего употребления):

1) Мезофильные аэробы и факультативные анаэробы - не более 10 в 1 г (куб. см).

2) Плесневые грибы, Candida - не более 10 в 1 г (куб. см).

Подготовка проб к исследованию.

Смешать 10 г исследуемого образца с 90 мл инактивационной смеси

Состав инактивационной смеси:

1. Твин-80 - 3,0%

2. Лецитин - 0,3%

3. L-Histidine HCl - 0,1%

4. Na S O х 5H O - 0,5%

5. Peptone - 0,1%.

Режим стерилизации инактивационной смеси - 1 атм. 15 мин.

Определение мезофильных аэробных и факультативныханаэробных микроорганизмов

1. Среда BiMedia 001А (готовится в соответствии с инструкцией -см. гл. 10).

2. Протокол измерения.

2.1. Дать среде BiMedia 001А уравновеситься при комнатной температуре в течение 6 ч.

2.2. Установить температуру 30 -С на приборе "Bac Trac".

2.3. В основном меню программы "Bac Trac" установить следующие параметры:

Параметры для инкубаторного блока (Adjust parameters):

Время исследования (Duration) 24 ч

Масштаб измерений (Scale):

М-параметр 0 - 50%

Е-параметр 0 - 50%

Время задержки (Delay) 1 ч.

3. Пороговые значения (Thresholds).

3.1. Выбирается соответствующий калибровочный файл для данного вида косметической продукции и параметры пороговых значений вносятся автоматически.

3.2. В отсутствие калибровочного файла одновременно с посевом исследуемого образца на среду BiMedia 001A производится определение общего количества бактерий классическим методом на чашках Петри.

Результаты, полученные при классическом методе исследования (KOE (CFU) в 0,1 мл), вносят в соответствующий файл (MAIN MENU/DATA FUNCTION/ENTER VALUES).

Основные этапы создания калибровочного файла рассмотрены в гл. 4 данных Указаний.

Учет результатов проводится по М-параметру.

4. Добавить в каждую измерительную ячейку по 9 мл среды BiMedia 001A.

5 Внести 1 мл предварительно подготовленного в соответствии с требованиями нормативной документации исследуемого образца в измерительную ячейку с 9 мл среды.

6. Тщательно перемешать содержимое, вращая ячейку между ладонями (не переворачивать ячейку!).

7. Для контроля среды используйте одну измерительную ячейку с 10 мл среды BiMedia 001A (без инокулята).

8. Выбрать в основном меню программы ЗАПУСК ИЗМЕРЕНИЙ (Start Measurement) и начать измерения.

9 После того как каждая позиция блока будет отмаркирована как свободная на экране монитора, поместить измерительные ячейки в прибор "Bac Trac".

Измерение начнется автоматически через 1 ч после загрузки ячеек в прибор. Рост микроорганизмов и время определения изменения импеданса (IDT) будут записаны автоматически.

При пересечении порогового значения происходит автоматический подсчет численности микроорганизмов в исследуемом образце.

УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:

Результат определения КОЕ (CFU) выдается автоматически в виде количества микроорганизмов в 0,1 мл исследуемого образца.

Определение дрожжей и плесеней

Определение дрожжей и плесеней рассмотрено в гл. 3.

Для количественного определения дрожжей и плесеней необходимо построить соответствующий калибровочный файл для данного вида продукции.

При наличии калибровочного файла все параметры пороговых значений вносятся автоматически.

Основные этапы создания калибровочного файла рассмотрены в гл. 4 данных Указаний.

8. Определение общего количества ингибирующих веществ (в том числе антибиотиков) в пищевых продуктах

Импедансный метод определения общего количества ингибирующих веществ предназначен для скринингового выявления нестандартной животноводческой продукции с целью дальнейшего количественного определения антибиотиков классическим методом. Использование импедансного метода для определения общего количества ингибирующих веществ в пищевых продуктах и производственном сырье основано на сравнении степени угнетения роста тест-культуры Streptococcus thermophylus ингибирующими веществами, содержащимися в исследуемом образце, с контрольной кривой роста.

1. Приготовление тест-культуры.

Культивирование тест-культуры Streptococcus thermophylus проводится в соответствии с ГОСТом 23454-79 "Молоко. Методы определения ингибирующих веществ", ИУС N 2268 от 28.12.91.

2. Подготовка проб к исследованию.

2.1. Подготовка проб к исследованию проводится по МУК 42.026-95 от 29.03.95 "Экспресс-метод определения антибиотиков в пищевых продуктах" (п. 3.1.1).

2.2. Определение ингибирующих веществ проводится в объеме, нормируемом МБТ N 5961-89 по всем видам животноводческой продукции.

3. Среда: стерильное обезжиренное молоко, проверенное на отсутствие ингибирующих веществ.

4. Протокол измерения.

4.1. Установить температуру 40 -С на приборе "Bac Trac".

4.2. В основном меню программы "Bac Trac" установить следующие параметры:

Параметры для инкубаторного блока (Adjust parameters):

Время исследования (Duration) 4 ч

Масштаб измерений (Scale):

М-параметр 0 - 30%

Е-параметр 0 - 50%

Время задержки (Delay) 1 ч

Пороговые значения (Thresholds):

М-параметр 4%

Е-параметр 10%.

Проводить учет результатов по М-параметру.

Пороговое значение по времени

(Time limit 1) 1 ч.

5. Добавить в каждую измерительную ячейку по 9 мл стерильного обезжиренного молока.

6. Добавить 1 мл исследуемого образца из соответствующего разведения продукта согласно нормативным документам МБТ N 5961-89.

6.1. Если количество ингибирующих веществ определяется в 1 г образца, то необходимо приготовить суспензию в соотношении 1:2 (образец, физ. раствор соответственно) и внести в измерительную ячейку 2 мл к 8 мл стерильного обезжиренного молока. В контрольную ячейку вносится 2 мл физ. раствора вместо образца.

7. Для контроля используйте одну измерительную ячейку с 9 мл стерильного обезжиренного молока (без инокулята) и 1 мл физ. раствора.

8. Внести 0,1 мл тест-культуры Streptococcus thermophylus в опытные и контрольную ячейки.

9. Тщательно перемешать содержимое, вращая ячейку между ладонями (не переворачивать ячейку!).

10. Выбрать в основном меню программы ЗАПУСК ИЗМЕРЕНИЙ (Start Measurement) и начать измерения.

11. После того как каждая позиция в блоке будет отмаркирована как свободная на экране монитора, поместить измерительные ячейки в прибор "Bac Trac".

Измерение начнется автоматически через 1 ч после загрузки ячеек в прибор. Рост микроорганизмов и время определения изменения импеданса (IDT) будут записаны автоматически.

УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:

Учет результатов основан на сравнении степени угнетения роста тест-культуры ингибирующими веществами, содержащимися в испытуемом материале, с ее ростом в контрольной ячейке (рис. 8.1). Оценка осуществляется по двум параметрам:

1) время пересечения 4% порогового значения по М-параметру менее чем за 1 ч; 2) диапазон масштаба изменения импеданса по М-параметру за 2,5 ч. Если исследуемый образец содержит ингибирующие вещества, то наблюдается увеличение времени пересечения порогового значения по М-параметру и уменьшение масштаба изменения импеданса по М- параметру по сравнению с контролем (тест-культура).

9. Типичные кривые изменения импеданса при исследовании санитарно-показательных, потенциально патогенных и патогенных микроорганизмов (рисунки кривых не приводятся)

10. Инструкции по приготовлению питательных сред

10.1. Инструкция по приготовлению среды BiMedia 001А BiMedia 001A - определение общей микробной численности

1. Растворить необходимое количество среды в дист. воде (соотношение указано на упаковке).

2. Разделить приготовленную среду на порции и стерилизовать при 1 атм. 15 мин.

3. После стерилизации среда должна уравновеситься в течение 6 часов при комнатной температуре. Примечание: приготовленная среда должна храниться при 4 -C. Срок хранения - 3 недели. Изменение режима стерилизации (более продолжительное автоклавирование) снижает качество среды!

10.2. Инструкция по приготовлению среды BiMedia 160B BiMedia 160В - определение БГКП (колиформы)

1. Растворить необходимое количество среды в дист. воде (соотношение указано на упаковке).

2. Разделить приготовленную среду на порции и автоклавировать при 1 атм. 15 мин. 3. После стерилизации среда должна уравновеситься в течение 6 часов при комнатной температуре. Примечание: приготовленная среда должна храниться при 4 -С. Срок хранения - 3 недели. Изменение режима стерилизации (более продолжительное автоклавирование) снижает качество среды!

10.3. Инструкция по приготовлению среды Pre-Media 205A Pre-Media 205A - среда для предобогащения сальмонелл

1. Растворить Pre-Media 205A в стерильной дистиллированной воде из расчета 26 г на 1 л воды.

2. Довести рН до 7,2 +/- 0,1 (если необходимо).

3. Разделить приготовленную среду на порции по 500 мл.

4. Автоклавировать среду при 1 атм. 15 мин. 5. Дать остыть среде при комнатной температуре. Примечание: приготовленная среда должна храниться при 4 -С. Срок хранения - 3 недели. Длительное нагревание и обработка при температуре выше рекомендуемой снижают качество среды!

10.4. Инструкция по приготовлению среды BiMedia 201B BiMedia 201B для определения сальмонелл Среда BiMedia 201В - модификация среды Rappaport-Vassilidas. 1. Растворить необходимое количество среды BiMedia 201B и добавки Supplement 201B в дист. воде (соотношение указано на упаковке). 2. Довести рН среды от исходного 5,7 - 6,2 (сразу после растворения) до 6,8 +/- 0,1, медленно (по каплям) добавляя 2 N р-р NaOH при постоянном перемешивании на магнитной мешалке, избегая выпадения осадка. 3. Разлейте приготовленную среду по флаконам по 500 мл и пастеризуйте на водяной бане при 80 -С в течение 10 мин. Для контроля температуры используйте дополнительный флакон с 500 мл воды и помещенным в него термометром. После того как температура в контрольном флаконе достигнет 80 -С, необходимо продолжать прогревание еще 10 мин. В качестве альтернативы можно использовать прогревание среды на пару при 100 -С в течение 10 мин. В этом случае можно не контролировать время, необходимое для достижения требуемой температуры. Не стерилизовать среду автоклавированием! 4. После пастеризации необходимо быстро охладить среду холодной водой до комнатной температуры. 5. Выдержать среду при комнатной температуре в течение 6 часов или в холодильнике (2 - 8 -С) в течение ночи перед использованием. 6. Приготовление аддитивов (добавок) 201В/1 и 201В/2. Оба аддитива (201В/1 и 201В/2) рассчитаны на 1 л среды. а) Растворить содержимое флакона аддитива 201В/1 в 1 мл 96% этанола. Добавить 1 мл р-ра аддитива во флакон с 1 л среды. б) Добавить 2 мл стерильной дист. воды во флакон с аддитивом 201В/2. Добавить 2 мл р-ра аддитива 201В/2 во флакон с 1 л среды. Примечания. Аддитивы следует добавлять только непосредственно перед использованием среды! Все аддитивы должны храниться при 4 -С. Максимальный срок хранения приготовленной среды (с аддитивами) - 3 дня при 2 - 8 -С. Максимальный срок хранения растворов аддитивов - одна неделя при 2 - 8 -С. Приготовленная среда BiMedia 201B без аддитивов может использоваться в течение 3 недель при 2 - 8 -С. При продолжительном сроке хранения рекомендуется заменить этап пастеризации среды стерилизацией с использованием мембранных фильтров. Выпадение небольшого количества осадка, а также помутнение раствора среды в процессе хранения допускается. Более продолжительное прогревание среды, а также обработка при температуре выше рекомендуемой снижают качество среды!

Характеристики

Список файлов курсовой работы