Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 179
Текст из файла (страница 179)
(.)зе оп1у т а сЬеписа! гите Ьоод. РЬепо1 |з ех|гегпе1у |охк, Ь!ЯЬ)у соггояче, апг( сап саизе зечеге Ьигпз. 1| тау Ье Ьаппй! Ьу |пЬа!а|юп, !пЯезг(оп, ог зЫп аЬзогр|юп. 1Уеаг арргорпа|е ц!очез, цоцц1ез, апд ргогесг!че с!о|Ь!пц. АЬчауз ые т а сЬег|иса1 6лпе Ьоод. Е(пзе апу агеаз о( зЫп йаг соте |и сопсас| зч!|Ь рЬепо! зч!|Ь а!агре чо1тпе ог" гчагег апг! |чазЬ зч(|Ь гоар апг( |ча|ег; |1о по| ые е|Ьапо1! РЬепу1тегЬу1мЖопу! йиогЫе (РМЯЕ), С,Н,ЕО Я ог С Н СН ЯО р, !з а Ь!ЯЫу |ох|с сЬО1|пезгегазе |пЬ|Ь||ог. 1| !з ехггете1у г)езггисг!че |о йе тисоиз |петЬгапез ог" йе гезр|гасогу |гас|, еуез, апз( з)г!и 1| |пау Ье (ага! Ьу (пЬа1аг!оп, (пдезг!оп, ог зЫп аЪзогр|юп.
Юеаг арргорпа|е Я)очез апг) заГегу ц1аяез. АЬчауз изе т а сЬе|пка! 6лте Ьоод. 1п сазе ог' соп|ас|, !ттейасе!у йизЬ еуез ог з)с!и чч1|Ь сор|- оиз атоипгз ог" |ча|ег апг) йзсагг) соп|апипа|е|1 с1огЬ!пц. РЬозрЬоПс асЫ, Н|РО, (з Ь|ЯЫу соггоз!че ап|1 тау Ъе Ьагт!и! Ьу |пЬа!а|юп, !пЯезгюп, ог з)г)п аЪзогрг!оп. )Чеаг арргорпа|е ц!очез апг) загс!у ц!аяез. Нааатйоиз МасегзаЬ А12.13 люийог сЬогоиаЫу айег иялц гайоьосорея А сопчеизепс са1си1асог со регЕопп гоилпе гайоасбн- Иу са!си!а!юла сап Ье !олий аС; 6сср Озни зн.аз ар 6 рай. сош! са1 с и !а согз! зайса!с.сЕш 5-Айепоау!шесЬ)опспе !з сохк аис1 гпау Ье Ьаплул1 Ьу шЬа1а6оп, злаезс!ои, ог з)сси аЬзогрсюл.
ЪСгеаг арргорпасе а!очеа апй аа(есу а1аззея (Ле ш а сЬеллса! Еише Ьоой. Ро иос ЬгеасЬе ЕЬе йшс. аРа, зее $ойсшп йойесу1 ыНасе Я1апе шау Ье Ьапп6л1 Ьу шЬа1а6ои, !иаеасюп, ог з)с!л аЬзогрсюп. !с !з ехсгеизе!у Е)ашшаЫе. Кеер азчау Егош Ьеас, зраг)ся апй орел йаше. ТЬе нарог !з !гпсас!ла со сЬе еуея зЫп, шисоиз спешЬгапея апй иррег геьр!засосу сгасс.
Ъсгеаг арргорпасе а!очес апй заЕесу а1аззея А)знауз изе ш а сЬелиса! Ешпе Ьоой. Я1ка !з аи зггиаис аий глау Ье Ьаппуи1 Ьу шЬа1асюп, !паезсзоп, ог зЫп аЬюгрбоп. Ъсзеаг арргорпасе а1очез апй заЕесу а!аааея Ро пос ЪгеасЬе сЬе йшс, ЯЬег шсгасе, Аф(Оз, зх а ассоли ох!йсасла ааепс апй зЬои)й Ье Ьапй!ей ъчиЬ саге. 1с глау Ье Ьаппбл1 Ьу зпЬа1а6ои, шаезсюп, ог зЫл аЬюгр6оп. Ачозй сои!асс зчЬЬ зЫп. ЪСгеаг арргорпасе а!очес апс1 аа(есу и!азаея И сап саихе ехр!оз!опз ирои сопсасс зн!сЬ осЬег зласепа1я аойсшп асесасе, зее Асе6с ассй Бойсшп ахЫе, (з(а)Чз, сх Ь!а!з1у роьопош. 1с Ыос)сз сЬе сусосЬгопзе е1ессгоп сгапарогс зузсепз.
Бо1ис!ола солса!л!ла юйшп ахйе зЬои1й Ье с!еаг!у шаг)сей. 1с зпау Ье Ьапп(и1 Ьу шЬа!асюп, !иаея 6оп, ог а)с!л аЪзогрбоп. ЪСзеаг арргорпасе а!очес апй ааЕесу аоца!ез апй Ьапй1е И иИЬ агеас саге. $ойизп сасойу!асе гиау Ье саге(поаепк апй сопсаша агзепк. 1с зз Ь!аЫу сохк апз1 шау Ье Еаса1 Ьу !пЬа1ас!оп, шиезс(оп, ог аЫп аЪюгрбои.
1с а1ш зпау саше Ьапп со сЬе ипЬогп сЬз!й. Ейессз оЕ сопсасс ог шЬа!абоп лзау Ье с1е!ауей, Ро пос ЬгеасЬе сЬе йиас. Ъсзеаг арргорпасе у!лчеь апй за(есу цоаа1ея РЛе оп1у !и а сЬеписа! (игле Ьоой.,зее аЬо Сасойу1асе. йойшп сИгасе, зее С1сгк асЫ аойсизп йойесу1 яйЕасе (йРЯ) сз сох!с, ап згпсапс, апс1 розеа а гса)с оЕ аечеге йашаае со сЬе еуея Ес зпау Ье Ьаплуи! Ьу зиЬа!а6оп, !паезсюп, ог а)сш аЬзогрс!оп. ЪСгеаг арргорпасе а!очес апг1 заЕесу аоие1ея Ро иос ЬгеасЬе сЬе йшс.
аойсшп ИиогЫе, сз)ар, !з Ь!иЫу сохк аий самее аенеге (гпсасзоп. 1с шау Ье Еаза! Ьу шЬа!абоп, !лаея 6оп, ог а)с(и аЬаогрсюп. ЪСгеаг арргорпасе а!очес апй заЕесу а1аазея !Ле оп!у зп а сЬеписа! Ешпе Ьоог1. аой1шп Ьуйгодеп РЬоарЬасе, сн)а НРО, (войшл РЬоарЬасе, зИЬаяс) гпау Ье Ьаппуи1 Ьу шЬа! а6оп, шаез6оп, ог зЫ и аЪзогр6оп. ЪСзеаг арргорпасе а!очес апй аауесу и!аазея сЛе ш а сЬелиса1 (игле Ьоой. аойсшп ЬуйгохЫе, ХаОН, апй ао!и6опа сопсасшпи МаОН аге ЬсаЫу сохк апй сашбс апй зЬои1й Ье Ьалйей ьлй агеас саге. ЪСгеаг арргорпасе а!очес апй а Еасе гпазЫ А!1 сопсепсгасей Ьазеа аЬои1й Ъе Ьапй!ей ш а япи1аг слал лес. Бойшпз шсгасе, Ха)з)Оз, шау Ье Ьаппуи1 Ьу шЬа! асюп, шцезсюп, ог з)сш аЬзогр6оп.
Ъсзеаг арргорп'- асе фочеь алс1 за(есу а1аазея 1Ле зп а сЬешка! биле Ьоой. аойсизп псспсе, ХаХОз, ь !гпсас!па со сЬе еуея ишсоы гпешЬгапея иррег герзгасогу сгасс, аий з)сзл. 1с шау Ье Ьаггп6л1 Ьу зпЬа!асюп, !ииезс!оп, ог з)с!и аЬзогрс!оп. Ъсгеаг арргорпасе а!очес апй за(есу а!аяез апй а1знауа ше зп а сЬегпка! (игле Ьоой. Кеер азчау Егош асйя йой)иш ругорЬоарЬасе ь ап згпсапс апй сиау Ье Ьаппуи1 Ьу шЬа1аиоп, шаеьсюп, ог зЫп аЬзогрс!оп. Ъсгеаг арргорпасе а!очеа апй заЕесу а1аззея Ро пос ЪгеасЬе ЕЬе йшс.
аойшп аа1ку1асе !а аи згпсапс алй лзау Ье ЬаплЕи1 Ьу шЬа!абоп, !лаезс!оп, ог зЫп аЬзогрбоп. ЪСгеаг арргорпасе а!очез апй заЕесу а1аззех. Ро пос ЬгеасЬе ЕЬе йыс. А12.!4 Аррепг(сх 12: Саис(огсз ВреппЫше гпау Ье соггояче апс1 Ьапп6л1 Ьу шЬа1асюп, 1паеьсюп, ог ьЫп аЬюгрсюп. ЪЧеаг арргорпасе а1очеь апд засесу а!аььеь. Ьье лп а сЬеписа1 6ппе Ьоос!.
асгерсошус(и 1з сохсс апс( а ьиьрессес( сагсшоаеп апс) лиисааеп, 1с шау саиье аПега(с геассюпз. 1с псау Ье Ьаппй! Ьу шЬа1а6оп, 1паеьсюп, ог ьЫп аЬьогр6оп. ЪЧеаг арргорпасе а1очез апс) ьалесу и1аьзеь. Ви(6спс асЫ, Н ВО4, 1ь Ь(цЫу сохк апс) ехсгеше1у с)еьсгисссче со сизое ойЬе гписоиз гпегпЬгапеь апс( иррег геьрпасогу сгасс, еуеь, апс1 йлп. 1с саизез Ьигиз апс1 сопсасс сч)сЬ о!Пег гпасепа1ь (е.а., рарег) гпау саиье Пге. ЪЧеаг арргорпасе а1очез, засесу а1аьзез, апс) 1аЬ соас. ()зе лп а сЬепс!са! 6ппе Ьоос1. Я'г'ВВ бгееп 1/бо1й 1ь зиррПес) Ьу сЬе спапиГассигег аь а 10,000-го!6 сопсепсгасе ш РМ5О ъчЬкЬ сгапзрогсь сЬеписа1ь асгоьь сЬе ьЫп апс( осЬел 6ьялеь. ЪЧеаг арргорпасе а1очеь апс1 загесу ц1аььеь апд с)есопсаш(пасе ассог61па со Ва(есу Ойке аи16е1шез.
атее РМВО. ТСА, зее ТпсЫогоасеск асЫ ТЕМЕР, зее Х,Х,Х;Х'-ТесгашесЬу1есЬу!епес(!аш)пе Теггасусйие псау Ье Ьаппй1 Ьу спЬа1а6оп, 1пцеьгюп, ог ьЫп аЬьогрбои. ЪЧеаг арргорпаСе а!очез апс( засесу а!аззеь апс1 изе сп а сЬеписа1 6ипе Ьоод. Бо1исюпь ос сесгасус1ше аге ьепя6че со ПаЬс. Х,Х,Х',Х'-ТесгашесЬу!есЬу!епес(1алпше (ТЕМЕР) 1ь ехсгеше1у с(еьсгисс(че со с(ьзиеь о( сЬе шисоиз спеплЬгапеь апд иррег геьрсгасогу сгасс, еуез, апс( йлп.!пЬа1апоп шау Ье (аса1. Рго!опаес( сопсасс сап саиье ьечеге 1пйасюп ог Ьигпь.
ЪЧеаг арргорпасе а1очез, загесу а1азьеь, апс) осЬег ргосессйе с1осЫиа. ()зе оп1у ш а сЬеписа! 6иие Ьоод. МазЬ сЬогоиаЫу айег Ьапс)Ппа. Р!аиппаЫе: Чарог шау сгаче1 а сопьЫегаЫе сПзсапсе со ьоигсе о( 1аи)сюп апд ПаьЬ Ьас1с. Кеер аьчау Сгош Ьеас, ьраг1сь, апс1 ореп Паше. ТРА, зее Тг!Пиогоасебс асЫ ТЬюигеа гпау Ье сагсшоаеик апс) шау Ье Ьаппй! Ьу лпЬа1абоп, 1паезс(оп, ог ьЫп аЬюгрсюп. ЪЧеаг арргорпасе а1очеь апд ьа(есу а1аььеь.
С лье ш а сЬеписа1 6лгие Ьоос(. Т(ьзиеь (Ьшпап), зее В!оос( (Ьшпап) апс( Ыоос) ргодиссь ТпсЫогоасебс асЫ (ТСА) 1з Ь(аЫу саиьис. ЪЧеаг арргорпасе а1очеь аис( загесу цоаа1еь. ТпсЫогосг!ПиогоесЬапе гпау Ье Ьаппй1 Ьу (пЬа1асюп, шаезс(оп, ог йш аЬьогр6оп. ЪЧеаг арргорпасе а1очез аис( ьа(есу аоаа1еь, ()ье 1и а сЬеписа1 йгпе Ьоод.
Кеер асчау (гош Ьеас, ьраг)сз, апд ореп Йагпе. Тпйиогоасе6с асЫ (ТРА) (сопсепсгасес)) шау Ье Ьапий1 Ьу спЬа1асюп, 1пцезйоп, ог ьЫп аЬзогр6оп. Сопсепсгасес) ас16з пшя Ье ЬапсПес1 чбсЬ агеас саге. Ресошроябоп саиьеь сохлс гишеь. ЪЧеаг арргорпасе а1очез апс1 а (асе шай. Рзе 1и а сЬешка1 гоше Ьоос1. Тг(ь гпау Ье Ьапп6л1 Ьу |пЬа1асюп, (иаеьсюп, ог йш аЬьогрсюи. ЪЧеаг арргорпасе а1очеь апд ьалесу ц1аззеь. Тпсоп Х-100 саиьез ьечеге еуе и псасюп апс1 Ьигпь. 1с лпау Ье Ьагги6л1 Ьу шЬа1асюп, 1пцеьсюп, ог йси аЬьогр6оп, ЪЧеаг арргорпасе а1очез апс1 загесу аоди1ез. Тгурап Ыие шау Ье а сагсшоаеп апс( шау Ье Ьаппй! Ьу шЬа1асюп, шаеьсюп, ог ьЫп аЬьогр6оп. Ро пос ЬгеасЬе сЬе с!иьс. ЪЧеаг арргорпасе ц1очеь апс( ьа(есу а1аззез.
ТгурсорЬап псау Ье Ьапий1 Ьу шЬа1асюп, шцезс(оп, ог йлп аЬюгрсюп. ЪЧеаг арргорпасе и!очеь апс1 ьа(есу а1аььеь. \Угеа псау Ье Ьаппги! Ьу спЬа1асюп, 1паез6оп, ог ьЫп аЬьогрсюп. ЪЧеаг арргорпасе ц1очез апс1 ьа(есу а!аззез. слЧ ПиЬс апс)!ог РЧ гас)1ас!оп (з с)апаегоиь апд сап с)ашаае сЬе ге6па о( сЬе еуеь. )з)ечег 1оо(с ас ап ипьЫе16ед 1Л' ПцЬс юысе чч)сЬ па)сес) еуеь. Ехашр1еь ол" 1Л' ПаЬс ьоигсеь сЬас аге сопипоп ш сЬе 1аЬогасогу шс1ис(е Ьапс1-Ье!с1 1ашрз апс1 сгапяПипипасогь.
Ч)елч оп1у сЬгоиаЬ а 61сег ог загесу а1аьзеь сЬас аЬюгЬ Ьаппй! ьчаче!епцсЬь. (ЗЧ гас)1асюп 1з а1ьо шисацепк аис) сагспюаеи)с. То пипиигае ехрозиге, ша1се яи.е сЬас сЬе ()Ч ПцЬс ьоигсе В ас(ес!иасе1у ьЫе1дес(. ЪЧеаг ргосессие арргорпасе а)очез счЬеи Ьо161па гпасепа!ь ипс)ег сЬе (Л' ПцЬс ьоигсе. Аррепйх 14 ТгадетагЬ Ргодысыпеп|1опег! ю гЬ|а Ьоо!с йа| |пау Ъе !гас!е|паг!сег! ог геа1агегег1-ггаг!е|паг!сег! аге 11агес! оп |Ье тчгн|ч.Мо1есы!агС1оп1па.со|п ЧеЬ а!ге гог 1пгогшаг1опа! Рыгроаеа оп!у.
Апу гга|1ешаг1ся ог патеь Ье1пц ыаег! аге гог ейгог1а! Рыгроаея оп1у, ичгЬ по 1п|епгюп ог 1п|г1па1па ыроп |Ьаг |га|1еп|аг1|. СЯНКА Ргеаа Ьаа ргонЫег! апг! |н111 соп|пше го ргонЫе, го йе Ьезг ог оыг аЪ|1пу, ассы- гаге апг! ыр-го-г!аге 1пгоггпаг1оп оп 1|а ЧгеЬ о!ге. Но|ненег, а11 геа1агегег! ггаг!е|паг!га апг! аегн1сеп|аг1сз аге йе ргореггу ог" йе|г геаресг1не огнпегь, апг! аге 11аге|! оп йе ЪЧеЬ о!ге ао!е!у гог Ыепг16саг1оп ог г!еясг1ргюп ог' |Ье арр!ЫаЪ1е аоог!а апс! аегн|сеа ТЬегегоге, р1еаае сопаы11 1пг!1нЫ- ыа1 шапыгасгыгега апг! о|Ьег гезоыгсеа 1ог сыггепг апг! арес11!с ргог!ысг ш1оппа|юп.
Аррегг|Е|х йе~егеггссз И.Е АРРЕ!х!$Э!Х КЕЕЕКЕ!Ъ!СЕЬ Лац С. апсЕ Вол| Р. 1972. ТЬе Ве! е1ес|горЬогеяз оЕ РЫА. ВГосЬ1т. В|арбуз. Асса 269: 192 — 200. А|Гать А., бовзсЫ|п8 Р., Каьег С., апсЕ 5сеагпз Т. 1998. Мегбо|1з Ги уеазг Кеаеися А 1аЬопиогу соиле тапиа1. СоЫ 5рпп8 НагЬог ЕаЬога|огу Ргеь, СоЫ 5рпп8 НагЬог, Неся Уог1|. А|!ать М.Р., Се!п11сег 5.Е., Но!| Е.А., Ечапз С.А., Сосаупе 1.Р., Агпапа|Ыез рб., ЗсЬегег 5.Е., Ы ЕЧг., Ноз1ипз Е.А,, баПе Е.Е, ес а1.
2000. ТЬе Вепогпе зециепсе оЕ РгозорЬПа те1апо8азгес 5пепсе 287: 2185 — 2195. А1|епигот В. апс1 В!огсЬ Е. 1986. А РЬуясосЬеписа! згисГу оЕ рго|еш б, а гпо1еси1е |чиЬ ипнр|е иппшпо81оЬиПп б-Ь|пй 1п8 ргорегбез, В Вю1. СЬет. 261: 10240 — 10247. . 1989. Ргосе|п 1.: Ап иптипо81оЬиПп ПЕЫ сЬаш-Ь|пйп8 Ьассепа! ргосе|п. СЬагассепгаПоп оЕ Ь~пйп8 апс! РЬуясосЬстка1 ргорегбезпЕ В1о!. СЬет. 264: 19740 — 19746.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
