Диссертация (1174191)

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ«МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМ.М.В.ЛОМОНОСОВА»ФАКУЛЬТЕТ ФУНДАМЕНТАЛЬНОЙ МЕДИЦИНЫНа правах рукописиВладимиров Георгий КонстантиновичСТРУКТУРА И ПЕРОКСИДАЗНАЯ ФУНКЦИЯ КОМПЛЕКСАЦИТОХРОМА C С КАРДИОЛИПИНОМ В ВОДНОЙ СРЕДЕ И ВНЕПОЛЯРНОМ ОКРУЖЕНИИСпециальность 03.01.02 – БиофизикаДиссертация на соискание ученой степеникандидата биологических наукНаучный руководитель:академик РАН, проф., д. б. н.,Владимиров Юрий АндреевичМосква, 2018ОГЛАВЛЕНИЕСписок сокращений ................................................................................................ 61Введение.........................................................................................................

7Актуальность работы........................................................................ 7Цели и задачи .................................................................................... 8Теоретическая и практическая значимость работы ...................... 9Научная новизна работы ................................................................ 10Положения, выносимые на защиту ............................................... 10Личный вклад автора ......................................................................

11Апробация результатов исследования .......................................... 12Публикации ..................................................................................... 122Обзор литературы ....................................................................................... 132.1Апоптоз и липидная пероксидация ............................................... 132.1.1 Роль апоптоза в развитии болезней человека ....................

132.1.2 Апоптоз по митохондриальному пути ............................... 142.1.3 Липидная пероксидация и апоптоз ..................................... 152.1.4 Возможность активации апоптоза в раковых клетках ...... 152.1.5 Окислительный стресс ......................................................... 182.1.6 Действие продуктов ЛПО на мембраны.............................

212.2Структура комплекса цитохрома с с кардиолипином................. 222.2.1 Цитохром c ............................................................................ 222.2.2 Кардиолипин ......................................................................... 252.2.3 Взаимодействие цитохрома c с кардиолипином ............... 2722.2.4 Гипотезы о структуре комплекса Цит-КЛ ......................... 282.2.5 Получение Цит-КЛ в неполярной среде ............................ 342.3Пероксидазная функция комплекса Цит-КЛ ...............................

342.3.1 Комплекс Цит-КЛ как апоптоген ........................................ 392.4Активированная хемилюминесценция как метод изученияобразования свободных радикалов при ЛПО .............................. 402.4.1 Химические и физические активаторы ХЛ ........................ 402.4.2 Химические активаторы ...................................................... 402.4.3 Физические активаторы .......................................................

412.4.4 Изохинолизиновые кумарины ............................................. 413Материалы и методы исследования .......................................................... 453.1Реагенты ........................................................................................... 453.2Аппаратура ...................................................................................... 453.3Подготовка объектов исследования .............................................. 463.3.1 ПриготовлениекомплексаЦит-КЛвнеполярномрастворителе .......................................................................... 463.3.2 Приготовление изолированных митохондрий из печеникрыс ........................................................................................ 473.4Методы исследования структуры цитохрома c в комплексе скардиолипином................................................................................

483.4.1 Спектрофотометрическоеопределениесостоянияжелезосерных связей в ЦитС............................................... 483.4.2 Измерение спектров поглощения смеси для регистрацииХЛ пероксидазных реакций, катализируемых Цит-КЛ .... 493.4.3 Измерение спектров флуоресценции.................................. 5033.4.4 Методдинамическогосветорассеяниядляизученияразмера частиц комплекса Цит-КЛ .....................................

503.5Хемилюминесцентный анализ образования липидных радикаловкомплексом Цит-КЛ ....................................................................... 523.5.1 Окисление липидов, катализируемое комплексом Цит-КЛ,помещенным в неполярное окружение. ............................. 523.5.2 Окислениелипидоввмембранахмитохондрий,катализируемое комплексом Цит-КЛ ................................. 53Статистическая обработка данных .............................................................. 544Результаты исследований ...........................................................................

554.1Уточнение протоколов приготовления комплекса Цит-КЛ ....... 554.2Строение нанокомплекса Цит-КЛ в гидрофобном окружении.. 564.2.1 Размеры комплекса Цит-КЛ ................................................ 564.2.2 Конформация цитохрома с в комплексе Цит-КЛ .............. 624.2.3 Общее заключение по разделу ............................................ 674.3Механизмреакцийобразованиялипидныхрадикаловкомплексом Цит-КЛ .......................................................................

684.3.1 Метод кинетической активированной хемилюминесценциидля изучения реакций образования липопероксильныхрадикалов комплексом Цит-КЛ........................................... 684.3.2 Образование липопероксильных радикалов в реакциях,катализируемых комплексом Цит-КЛ ................................

794.3.3 Изучениемеханизмацитотоксическогодействиякомплекса Цит-КЛ на раковые клетки ............................... 845Обсуждение результатов ............................................................................ 8745.1Комплекс Цит-КЛ в разбавленных водных растворах и внеполярной среде имеет тот же стехиометрический коэффициентлипид:белок, что и в микрокристаллическом осадке.................. 875.2Размеры наносфер Цит-КЛ в неполярном растворителе менееоднородны, чем в микрокристаллах, но имеют те же средниевеличины .......................................................................................... 885.3В наносферах Цит-КЛ ЦитС имеет конформацию частичнорасплавленной глобулы..................................................................

915.4Образование наносфер Цит-КЛ происходит по принципу «всеили ничего»...................................................................................... 935.5Строение комплекса Цит-КЛ в гидрофобном растворителе и вмикрокристаллах Цит-КЛ совершенно одинаковы ..................... 955.6Реакцииокислениялипидовсобразованиемсвободныхрадикалов в присутствии раствора Цит-КЛ идут по механизмупероксидазного цикла..................................................................... 965.7Возможно и перспективно применение комплекса Цит-КЛ вкачестве действующего противоракового средства нового типа........................................................................................................... 986Выводы ....................................................................................................... 1017Список цитируемой литературы .............................................................

1045СПИСОК СОКРАЩЕНИЙАФК – активные формы кислорода;БКЛ – кардиолипин, выделенный из сердца быка;ДСР – динамическое светорассеяниеКЛ – кардиолипин;ЛПО – липидная пероксидацияМУР – малоугловое рассеяние рентгеновских лучейПНЖК – полиненасыщенные жирные кислотыПО – программное обеспечениеПОЛ – перекисное окисление липидов;ПХ – пероксидаза из корней хрена;ТОКЛ – 1,1',2,2'-тетраолеилкардиолипин;ФБ – фосфатный буферный раствор;ХЛ – хемилюминесценция;Цит-КЛ – комплекс цитохрома с с кардиолипином;ЦитC – цитохром с;ЭПР – электронный парамагнитный резонанс;ЯМР – ядерный магнитный резонанс;CAS – спектрофотометрическое титрование;TLS – спектроскопическое титрование с термической линзой>Fe∙∙∙S(Met80) – связь между гемовым железом и серой метионина,находящегося в 80-м положении61ВВЕДЕНИЕАктуальность работыАпоптоз – запрограммированная смерть клетки, один из важных процессоввмногоклеточныхорганизмах,необходимыйдляподдержанияжизнедеятельности тканей на всех этапах развития организма.

Характеристики

Тип файла PDF

PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.

Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.

Список файлов диссертации