Автореферат (1154711), страница 2
Текст из файла (страница 2)
1).В первой группе проводилась имплантация сетчатого эндопротеза вмягкие ткани поясничной области для изучения влияния материала эндопротезана реакцию мягких тканей, формирование соединительнотканной капсулы,7протективную активность В-системы иммунитета (рис.1).Во второй группе проводилось моделирование паховой герниопластики сцельюизучениявлияниясетчатогоэндопротезанатканиоргановрепродуктивной системы крыс-самцов и протективную активность В-системыиммунитета (рис.2).Третья группа являлась контрольной. Оперативные вмешательства наживотныхневыполнялись.Проводилосьморфологическоеиморфометрическое исследование тканей органов репродуктивной системы иизучалась протективная активность В-системы иммунитета.Во время эксперимента забирались образцы тканей для проведенияморфологического,морфометрического,иммуногистохимическогоисследований и выполнялись заборы крови для проведения иммунологическогоанализа перед операцией и на 7, 14,30,90 сутки после операции.Таблица 1.
Распределение животных по группамГруппаживотныхIIIIIIТип операцииОбщееколичествоживотныхИмплантациясетчатогоэндопротезав мягкие тканипоясничнойобластиМоделированиеоперациипаховойгерниопластикиКонтрольнаяКоличество животных вподгруппахППТПП402020562828108Рис.1 Имплантация сетчатогоэндопротеза в мягкие ткани поясничнойобласти. 1- сетчатый эндопротез; 2 кожа2.Рис.2. Моделирование операциипаховой герниопластики.1 - сетчатый эндопротез; 2 семявыносящий проток; 3 - придатоксеменника; 4 – семенник.Методы исследованияМорфологический иморфометрическийметоды. Исследованиепроводили с целью изучения реакции мягких тканей, оценки изменениясостояния органов репродуктивной системы после выполненных оперативныхвмешательств.
В первой группе иссекали лоскут мягких тканей поясничнойобласти с сетчатым эндопротезом. Во второй группе производили заборорганов репродуктивной системы крыс-самцов (семенник, придаток семенника,семявыносящий проток с фиксированным на нем эндопротезом). Вконтрольной группе производили забор органов репродуктивной системыкрыс- самцов (семенник, придаток семенника, семявыносящий проток).Гистологические препараты окрашивались гематоксилином и эозином, а такжекомбинированной окраской по Ван Гизону.
Для выявления реакции тканейоргановрепродуктивнойсистемыпроизводилиихморфометрическоеисследование. Для определения коллагенов в соединительнотканной капсулевокруг нитей эндопротезов производили окраску гистологических срезов Siriusred. Качественное исследование коллагенов производили при светооптическомисследовании, количественную оценку соотношения коллагенов I и III- типов9осуществляли в поляризационном свете.Иммуногистохимический метод. С помощью этого метода изучаласьпролиферативная активность клеток в гранулемах вокруг нитей сетчатыхэндопротезов с использованием иммуногистохимической (ИГХ) реакциимоноклональных антител к белку Ki-67.Иммунологический метод. Оценку протективной активности В-системыиммунитета производили при помощи тест-системы для экспресс-диагностикилатентнотекущих и клинически выраженных форм иммунологическойнедостаточности, разработанной в ИБХ РАН (Патент РФ №2196333).РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ1.Имплантацияполипропиленовогоититанизированногополипропиленового сетчатых эндопротезов в мягкие тканиРеакция мягких тканей.
Проведенное морфологическое исследованиепрепаратов показало, что при имплантации в ткани полипропиленового (ПП) ититанизированногополипропиленового(ТПП)сетчатыхэндопротезовразвивается однотипная реакция на инородное тело, результатом которойявляется образование гранулемы и формирование соеднинительнотканнойкапсулы. Однако, скорость ее формирования и качество входящих в ее составколлагеновых волокон зависят от материала сетчатого эндопротеза.На 7 сутки после операции в гранулемах вокруг нитей ТПП эндопротезабыло выявлено достоверно большее количество пролиферирующих клеток посравнению с ПП эндопротезом.
При этом соотношение коллагеновых волоконI и III типов в гранулемах вокруг нитей ТПП было так же достоверно выше(табл.2). Полученные данные указывают на более раннее начало формированиязрелой соединительной ткани при имплантации ТПП эндопротеза.К 30 суткам наблюдения пролиферативная активность клеток вгранулемах вокруг нитей как ПП, так и ТПП сетчатых эндопротезовдостоверно уменьшается по сравнению с 7 сутками. Однако, она по-прежнему10остается достоверно выше вокруг нитей ТПП эндопротеза, где ужеформируется зрелая соединительная ткань, в которой содержание коллагена Iтипа выше относительно коллагена III-типа по сравнению с ПП эндопротезом,что свидетельствует о более эффективной интеграции имплантата в ткани(табл.2).Через 90 суток после операции пролиферативная активность клеток вгранулемах вокруг нитей обоих эндопротезов продолжает снижаться.Достоверных различий в количестве пролиферирующих клеток в зависимостиот материала имплантируемого эндопротеза не определяется.
Вокруг нитей иПП, и ТПП сетчатых эндопротезов достоверно увеличивается количествозрелого коллагена I-типа по сравнению с 7 и 30 сутками. При этом болеевысокое содержание зрелого коллагена отмечается в гранулемах вокруг нитейТПП эндопротеза (табл.2). Таким образом, различная пролиферативнаяактивность клеток в области контакта нитей сетчатых эндопротезов с тканямивлияет на процессы синтеза соединительной ткани. Так, в гранулемах, где былаотмечена невысокая пролиферативная активность клеток вокруг нитей ППэндопротеза, соотношение коллагена I и III типов ниже, чем в гранулемах сболее высокой пролиферативной активностью клеток вокруг нитей ТППэндопротеза на всех сроках наблюдения (рис.3, рис.4).Таблица 2Пролиферативная активность клеток в гранулемах и соотношениеколлагенов I/III (М+м)МатериалэндопротезаПолипропиленТитанизированныйполипропиленСуткинаблюдения7309073090Пролиферативнаяактивность %29,1+5,7%*15,9+4,3%*11,38+2,53%***33,6+3,1%*26,9+3,6%*11,85+5,40%***Примечание: * - р<0,001, ** - р<0,05, *** - р>0,0511Соотношениеколлагенов I/III1.085+0.022**1,174+0,036**1,38 +0,07**1,107+0.013**1,246+0,102**1,48 +0,112**Количество пролиферирующихклеток %40353025201510507 суток30 сутокПП эндопротез90 сутокТПП эндопротезРис.3 Изменение пролиферативной активности клеток в гранулемах вокруг нитей сетчатыхэндопротезов.1,6Соотнощениеколлагенов I/III1,51,41,31,21,117 суток30 сутокТПП эндопротезПП эндопротез90 сутокРис.4 Динамика соотношения коллагенов I/III в гранулемах вокруг нитей сетчатых эндопротезовПроведенное исследование показало, что ТПП эндопротез болееэффективно интегрируется в мягкие ткани за счет ускорения формирования ипреобладании зрелого коллагена I типа относительно незрелого коллагена IIIтипа вокруг нитей имплантата.
Уже на ранних сроках после операции в зонеимплантацииТППэндопротезаформируетсяболеепрочныйсоединительнотканный рубец, что может снижать риск ранних рецидивов исокращать период физической реабилитации пациентов после пластики грыжпередней брюшной стенки.Влияние на протективную активность В-системы иммунитета. Приимплантации ПП и ТПП сетчатых эндопротезов в мягкие ткани происходитактивация антителогенеза, сопровождающаяся синтезом IgG с повышением12уровня их титра и нарушением нормального распределения высоко- инизкоавидных антител, с преобладанием последних (табл.3).Таблица 3Изменение титра IgG в сыворотке крови в динамикеЭндопротезППТППКонтрольСредние значения титра IgG в у.е.Антителадо(n=20)СуммаВысокоавидныеНизкоавидные10,4±1,8**7,8±1,6**2,6±0,9**СуммаВысокоавидныеНизкоавидныедо(n=20)12,0±1,9**9,9±1,1**2,1±0,7**СуммаВысокоавидныеНизкоавидныедо(n=10)11±0,88,6±0,52,4±0,3(М±м)Сутки наблюдения71430(n=20)(n=15)(n=10)90(n=5)51,2±2,2*116,2±3,3*11,2±0,7*17,0±2,1**40±2,1*99,2±3,2*Сутки наблюдения714(n=20)(n=15)48,0±1,4*28,8±2,1*32,0±1,1*13,3±1,7**16,0±0*16,0±2,1*Сутки наблюдения714(n=10)(n=10)67,2±3,2*8,8±1,5*55,2±2,9*44,8±2,3*4,8±0,4**40,0±2,1*30(n=10)64,0±2,7*24,0±1,7*40,0±2,8*90(n=5)16,8±1,7*6,0±1,0**10,8±1,0*30(n=10)90(n=10)10,8±1,011,2±0,910,4±1,010,2±0,88,4±0,52,4±0,78,4±0,42,8±0,57,6±0,72,8±0,57,4±0,52,8±0,3Примечание: * - р<0,05, ** - р>0,05Имплантация ПП эндопротеза приводит к выраженной активацииантителогенеза, стойкой супрессии протективной активности В-системыиммунитета на всех сроках наблюдения, заключающейся в значительномпреобладании низкоавидных антител в общем титре IgG без динамики кнормализации соотношения с высокоавидными антителами.
При имплантацииТПП эндопротеза на ранних сроках (от 7 до 14 суток) отмечается умереннаяактивация антителогенеза без супрессии протективной активности В-системыиммунитета. Однако на поздних сроках (от 30 до 90 суток), наблюдаетсяразвитиесупрессиипротективнойактивностиактивностиВ-системыиммунитета, проявляющееся в умеренном преобладании низкоавидных антителнад высокоавидными в общем титре IgG (рис.5).13140120Титр IgG в у.е.100806040200до операции7 сутки 14 сутки 30 сутки 90 суткидо операции7 сутки 14 сутки 30 сутки 90 стукиПП эндопротезТПП эндопротезВысокоавидные антителаНизкоавидные антителаРис. 5.
Изменение титра IgG на 7,14,30 и 90 сутки после операции2.Моделирование паховой герниопластики с использованиемполипропиленового и титанизированного полипропиленового сетчатыхэндопротезовРеакция органов репродуктивной системы. Морфологическое изучениерепродуктивных органов при моделировании паховой герниопластикипоказало однотипные изменения в семеннике, придатке семенника исемявыносящем протоке на стороне операции при использовании как ПП, так иТПП сетчатых эндопротезов. В семеннике на всех сроках наблюденияотмечалось утолщение капсулы семенника, разобщение межканальцевыхсвязей, участки отслойки сперматогеного эпителия.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
