Диссертация (1154512)

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла

Федеральное государственное автономноеобразовательное учреждение высшего образования«РОССИЙСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ»На правах рукописиЮнес Роман АбдаллаевичАдаптивное значение для человека бактерий рода Lactobacillus и рода Bifidobacterium03.02.08 – экология03.02.07 - генетикаДИССЕРТАЦИЯна соискание учёной степеникандидата биологических наукНаучные руководители:доктор биологических наук Полуэктова Е.У.доктор биологических наук профессор Орлова В.С.Москва - 2016 г.1СОДЕРЖАНИЕВВЕДЕНИЕ ..........................................................................................................................................

5Актуальность проблемы ................................................................................................................... 51. Обзор литературы .......................................................................................................................... 91.1. Микробиота человека ................................................................................................................ 91.1.1 Общая характеристика микробиоты человека .................................................................. 91.1.2 Микробиота кишечника человека и её состав ..................................................................

111.1.3 Взаимодействие кишечной микробиоты с организмом хозяина ................................... 131.2. Лактобациллы и бифидобактерии – постоянный компонент микробиоты человека 181.2.1 Общая характеристика лактобацилл и бифидобактерий ...................................................... 181.2.2 Местообитание .......................................................................................................................... 191.2.3 Таксономическое разделение ...................................................................................................

191.2.4 Лактобациллы и бифидобактерии - пробиотики и психобиотики ....................................... 251.3 Гамма-аминомасляная кислота .............................................................................................. 291.3.1 Общая характеристика свойств гамма-аминомасляной кислоты ........................................

291.3.2 ГАМК и её рецепторы в организме человека ......................................................................... 291.3.3 Функции ГАМК в нервной системе человека и её связь с заболеваниями......................... 301.3.4 Синтез ГАМК микроорганизмами .......................................................................................... 311.3.5 Характеристика генов и белков, обусловливающих синтез ГАМК .................................... 341.3.6 Функции ГАМК в кишечнике .................................................................................................. 391.3.7 ГАМК-синтезирующие лактобациллы и бифидобактерии из кишечной микробиотычеловека как векторы доставки ГАМК в кищечник.

...................................................................... 391.4 Катехоламины и серотонин ..................................................................................................... 411.4.1 Общая характеристика катехоламинов и серотонина ........................................................... 411.4.2 Роль катехоламинов и серотонина в нервной системе человека ......................................... 431.4.3 Влияние катехоламинов и серотонина на метаболизм бактерий ......................................... 45ГЛАВА 2.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ....................................................................................... 512.1 Микробиологические методы .................................................................................................. 512.1.1 Штаммы бактерий, использованные в работе ........................................................................ 5122.1.2 Среды и условия роста..............................................................................................................

552.1.3 Определение вида лактобацилл ............................................................................................... 572.2 Использованные в работе животные ..................................................................................... 572.3 Молекулярно-генетические методы.......................................................................................

582.3.1 Выделение ДНК ......................................................................................................................... 582.3.2 Конструирование праймеров и проведение ПЦР .................................................................. 582.3.3 Электрофорез ДНК в агарозном геле ...................................................................................... 592.3.4 Секвенирование ДНК................................................................................................................ 592.3.5 Выделение тотальной РНК ....................................................................................................... 592.3.6 Обратная транскрипция ............................................................................................................

602.3.7 Количественная ПЦР в режиме реального времени .............................................................. 612.4 Биохимические методы ............................................................................................................. 622.4.1 Тонкослойная хроматография.................................................................................................. 622.4.2 Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) .................................................. 62ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ............................................................................

653.1 Идентификация и характеристика штаммов лактобацилл, выделенных из трёхбиотопов человеческого тела. ........................................................................................................ 653.1.1 Видовая идентификация изолятов лактобацилл, населяющих кишечник, ротовуюполость и влагалище человека. .........................................................................................................

653.2 Изучение синтеза ГАМК из лабораторной коллекции штаммами лактобацилл ибифидобактерий. ............................................................................................................................... 683.2.1 Отбор штаммов лактобацилл и бифидобактерий, синтезирующих и выделяющих в средуГАМК...................................................................................................................................................

683.2.2 Определение количества ГАМК, синтезируемой лактобациллами и бифидобактериями.693.2.3 Наличие генов глютаматдекарбоксилазы у штаммов лактобацилл и бифидобактерий. ... 723.2.4 Характеристика синтеза ГАМК у 4-х штаммов бактерий, отобранных в качествепробиотиков. ....................................................................................................................................... 753.2.5 Характеристика генов, обусловливающих синтез ГАМК. ...................................................

823.2.6 Изучение экспрессии гена глутаматдекарбоксилазы gad у штамма L.plantarum 90sk. ..... 86Данный раздел работы был выполнен в Институте морфологии человека РАМН совместно сЮ.Е. Козловским. ............................................................................................................................... 903.2.7 Определение влияния штамма L.plantarum 90sk на крыс в условиях холодового холода.9033.3 Изучение влияния катехоламинов и серотонина на рост и транскрипционнуюактивность лактобацилл и бифидобактерий..............................................................................

943.3.1 Оптимизация условий опытов по влиянию нейротрансмиттеров на рост лактобацилл ибифидобактерий. ................................................................................................................................ 943.3.2 Изучение влияния норадреналина, адреналина, дофамина и серотонина на ростлактобацилл и бифидобактерий........................................................................................................ 973.3.3 Изучение влияния норадреналина на транскрипционную активность генов L.plantarum90sk методом ПЦР в реальном времени. .......................................................................................

108ЗАКЛЮЧЕНИЕ .............................................................................................................................. 111ВЫВОДЫ ......................................................................................................................................... 112СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ, ИСПОЛЬЗОВАННЫХ В РАБОТЕ ......................................... 114СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ............................................................................................................ 115Приложение ..................................................................................................................................... 144БЛАГОДАРНОСТИ .......................................................................................................................

1544ВВЕДЕНИЕАктуальность проблемыСогласно данным Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ) эпидемией21 века стал стресс. Возрастание стрессовой нагрузки на душу населения связано сухудшением экологическоймегаполисах,нездоровымобстановки, высокойпитаниемиплотностью населениядругимисоциальнымивфакторами.Регулярный краткосрочный (острый) стресс идёт на пользу организму и связан свыбросом надпочечниками гормонов стресса (адреналин, норадреналин, кортизол идр.)”. Физиологический смысл этого явления – это инициация реакции “бег илибегство” чтобы избежать опасность. Однако постоянное воздействие раздражителя(хронический стресс) на организм человека может привести к таким психическимрасстройствам как депрессия, тревожное состояние, синдром хроническойусталости и др. В результате, организации по всему миру терпят серьёзныеэкономические убытки.Сегодня большое внимание уделяется изучению адаптации человека к стрессу.При сталкивании организма с хроническим стрессором, в организме происходятфизиологическиеизменения,которыеописываютсяобщимадаптационнымсиндромом (ОАС).

Характеристики

Тип файла PDF

PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.

Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.

Список файлов диссертации