Автореферат (1151459), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Структурные взаимосвязи в организации кожного покрова, каксоматической системе, у пушных зверей — представителей семействMustelidae, Canidae и Leporidae —показатели уровня его адаптированности кусловиям внешней среды.4. Структурно-биомеханические корреляции кожи как базовыепоказатели при оценке товарно-технологических свойств получаемогопушно-мехового сырья.Степень достоверности, апробация и публикация результатовисследованийВ основу работы положен анализ результатов комплексныхисследований, выполненных на 80 животных (кролик, норка и лисицаклеточногосодержания).Использовалиметодыанатомическогопрепарирования,светооптического,электронномикроскопическогоибиомеханического исследования.
Полученный цифровой материалподвергали статистической обработке по классическим методикам.Материалы исследований представлены и апробированы на 3-ейнаучной конференции молодых ученых ФГБОУ ВПО МГАВМиБ (Москва,2012), на 4-ой научной конференции молодых ученых ФГБОУ ВПОМГАВМиБ (Москва, 2013), секции молодых ученых Международной учебнометодической и научно-практической конференции «Актуальные проблемыветеринарной медицины, зоотехнии и биотехнологии», посвященной 95летию со дня основания ФГБОУ ВПО МГАВМиБ (Москва, 2014),Объединенном XII Конгрессе Международной ассоциации морфологов и VIIВсероссийском съезде анатомов, гистологов, эмбриологов (Тюмень, 2014).По научным разработкам, представленным в данной диссертационнойработе, опубликовано 6 научных статей по теме диссертации, из них 4 — визданиях, рекомендуемых ВАК РФ.Объем и структура диссертацииРукопись диссертации изложена на 125 страницах машинописноготекста (без учета приложений), иллюстрирована 35 рисунками, 21 таблицей,состоит из введения, обзора литературы, материалов и методовисследования, результатов исследования и их обсуждения, заключения,сведений о практическом использовании.
Список литературы включает 161источников, из них 126 отечественных и 35 зарубежных.6СветоваямикроскопиягистологическихсрезовМикроморфометрияЭлектроннаярастроваямикроскопияMustelidaeНорка305050208158LeporidaeКролик204040207127CanidaeЛисица305050208158801401406023443Итого:ВсегоВидживотногоБиомеханическиеиспытанияСемействоАнатомическоепрепарированиеСОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯМатериалы и методы исследованияЭкспериментальные исследования выполнены на кафедре анатомии игистологии животных имени профессора А.Ф.
Климова ФГБОУ ВОМГАВМиБ – МВА имени К.И. Скрябина и на базе ОАО «Племеннойзверосовхоз Салтыковский». Объектами служили половозрелые животныеразличных таксонов отряда плотоядных: семейства куньих — американскаянорка (n=30), собачьих — серебристо-черная лисица (n=30) и зайцевых —кролик породы Советская Шиншилла (n=20). Животных отбирали попринципу аналогов, с учетом происхождения, клинического состояния, пола,возраста, живой массы. (таблица 1).Таблица 1Характеристика изученного материала и методов исследованияСодержание и кормление животных соответствовали зоотехническимнормам.Материалом для исследования служили унифицированные образцыкожного покрова, отобранные с одного анатомо-топографического участка— латеро-каудальной поверхности бедра, в период плановой хозяйственнойэвтаназии.
Всего исследовано 80 животных в возрасте до 1 года.Для решения поставленных задач использовали комплексныйметодический подход, включающий: анатомическое препарирование,гистологическое исследование по классическим методикам, включающеесветовую, поляризационную и сканирующую электронную микроскопию,микроскопическуюморфометриюкожногопокрова,атакжебиомеханическиеиспытанияобразцовкожногопокрова,стандартизированных по размеру и форме и статистическую обработкуполученных цифровых данных.Морфологические методы исследования.
Образцы кожного покроваизучали методом световой микроскопии.Фрагменты кожи размером 10х10 мм отбирали с латеро-каудальнойповерхности бедра, фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина,промывали водопроводной водой в течение 24 часов, обезвоживали вспиртах восходящей концентрации (от 50º до 100º) и заливали в парафин пообщепринятой методике. Серийные парафиновые срезы толщиной 5-10 мкмизготавливали на универсальном автоматизированном микротоме HM-325(Microm international GmbH, Germany).7Морфологическую картину изучали при помощи светового микроскопа«Nikon» (Япония) после окраски гистологических срезов гематоксилином иэозином, по Ван-Гизону и орсеином согласно общепринятым методикам.
Дляидентификации коллагеновых структур в поляризованном светеиспользовали фенольную реакцию (Дедух Н.В., 1997). Полученный материализучали при помощи поляризационного микроскопа («Olympus bx51»,Япония).Микроскопическую морфометрию и статистическую обработкуцифровых данных проводили с использованием совмещенной с микроскопомсертифицированной программы анализа изображения ImageScope C (ООО«Системы для микроскопии и анализа»).Биомеханические исследования. Исследования механических свойствобразцов кожного покрова проводили на универсальной испытательноймашине Zwick 1464 в ФГБУ «Центральный научно-исследовательскийинститут травматологии и ортопедии имени Н.Н.
Приорова» МинистерстваЗдравоохранения Российской Федерации.Для определения биомеханических потенций исследуемого материалаотбирали образцы кожного покрова, стандартизированные по форме иразмеру (S=52 мм2). Оценивали следующие показатели:• разрывную нагрузку (сила): (P);• удлинение при разрыве: (L)• пластические свойства.Исследования проводили при нагрузке 1 и 5 кН (в зависимости отсвойств исследуемого образца). Скорость нагружения на растяжениесоставляла 25 мм/мин. Начальное удлинение (L0) равнялось 30 мм.Сканирующая электронная микроскопия.
Для определенияпространственной ориентации волокнистых структур и межволоконныхвзаимоотношений у исследуемых животных, не выявляемой обычнымигистотопографическими и гистологическими методами, использовалисканирующую электронную микроскопию. Материал промывали мыльносодовым раствором с последующим высушиванием в течение суток вэксикаторе с силикагелем с целью снижения его естественноговлагосодержания. Полное обезвоживание осуществляли в вакуумнойустановке. Для создания электропроводного слоя в ионно-напылительнойустановке Eiko IB-3 препараты напыляли платиной в атмосфере аргона.Изучение напыленных участков производили на сканирующемэлектронном микроскопе (FEY company «Inspect F50») при ускоряющемнапряжении 20 кВ на базе лаборатории ООО «Нанопромимпорт» Научногопарка МГУ им.
М.В. Ломоносова.Методы статистической обработки результатов. Для оценкисредних значений изучаемых показателей, выборочной дисперсии, среднегоквадратичного отклонения, коэффициента вариации, доверительногоинтервала и относительной ошибки использовали методы, изложенные врекомендациях Г.Г. Автандилова (1990), Г.Ф. Лакина (1990) и А.Плохинского (1970). Полученные экспериментальные данные подвергалиобщестатистической обработке методами вариационной статистики сопределениемкоэффициентавариабельности,характеризующего8структурно-функциональные особенности изучаемых структур и уровеньадаптированности организма к условиям существования с дальнейшимпостроением корреляционных матриц, позволяющих оценивать уровеньстабильности и силу взаимодействия элементов при помощи стандартныхпрограмм «Statistica 6.0» и «Microsoft Excel 2016».РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХОБСУЖДЕНИЕСравнительная микроморфологическая характеристика кожногопокрова исследуемых животныхВ результате проведенных исследований выявлено, что кожный покровисследуемых животных имеет общие закономерности строения,подразделяясь на три структурные зоны: эпидермис, дерму и подкожнуюжировую клетчатку.
Вместе с тем, представительство структурных зон и ихсоотношение в общем покрове у изучаемых нами пушных зверей достоверноотличаются и зависят от их видовой принадлежности.Видоспецифические особенности структурной организации кожикасаются, в частности, различной выраженности рельефа эпидермиса,связанной с развитием эпидермальных гребней. Так, у норки, для которой вусловиях естественного биоценоза характерен полуводный образ жизни,обнаружена ярко выраженная складчатость эпидермиса, тогда как у кролика,представителя семейства Leporidae, эпидермальные гребни сглажены.
Вкожном покрове лисицы, по сравнению с норкой и кроликом, отмеченанеравномерная складчатость эпидермиса, выражающаяся вариабельностьювысоты гребней (рисунок 1).Рисунок 1. Структурная организация кожного покрова:А – норка, Б – лисица, В – кролик.1 – эпидермис, 2 – сосочковый слой дермы,3 – сетчатый слой дермы, 4 – пучок волос, 5 – подкожная пластина.Гематоксилин и эозин, об.10, ок.10.9При сравнительном анализе кожного покрова у исследуемых животныхпо показателю общей толщины установлено, что максимального значения ондостигает у лисицы, минимального у кролика, промежуточное положение потолщине кожи занимает норка (таблица 2).Таблица 2Показатели общей толщины кожного покрова, мкмКроликНоркаЛисица832,622,701223,722,802501,639,38Различия между сравниваемыми величинами достоверны (р≤0,05)При определении морфометрических показателей толщины эпидермисанами было обнаружено, что она максимальная у лисицы, минимальна укролика и имеет среднюю величину у норки.
Следует отметить, что попроцентному соотношению эпидермиса к общей толщине кожного покровалидировал представитель семейства Canidae, минимальное значениеотмечено у кролика, промежуточное положение по его цифровомувыражению занимает норка (таблица 3).Таблица 3Морфометрические характеристики эпидермисаГруппы животныхТолщина эпидермиса,мкмкроликноркалисица21,310,1539,010,2793,060,73Соотношение толщиныэпидермиса и общей толщиныкожного покрова, %2,563,193,72Различия между сравниваемыми величинами достоверны (р≤0,05)При определении толщины дермы установлено, что лидером поданному показателю является лисица, минимальные значения отмечены укролика, тогда как представитель семейства Mustelidae — норка занимаетпромежуточное положение (таблица 4).Таблица 4Морфометрические характеристики дермыГруппыживотныхТолщина дермы, мкмкроликноркалисица811,3113,281184,7112,742408,5722,78Соотношение толщины дермы иобщей толщины кожногопокрова, %97,4196,8196,28Различия между сравниваемыми величинами достоверны (р≤0,05)При определении процентного представительства дермы в структурекожного покрова максимальные значения выявлены у кролика, у лисицы инорки эти показатели не имели достоверных отличий.