Диссертация (1151313), страница 57
Текст из файла (страница 57)
Мишенью последней частоты являются ядра клеток.5. Выявлены условия и эффекты УЗ воздействия на клетки животных семейства собачьих:271– частота генерации 0.88 МГц, диапазоны интенсивностей 0.05–0.7 Вт/см2, частотоймодуляции 10–30 Гц, а также 70–80 Гц, 200 Гц или 700–800 Гц в течение 15–30 с направленнодействует на безъядерные клетки размера 1–9 мкм; а на ядросодержащие клетки размера 6.6–19.8 мкм — интенсивность 0.05–0.7 Вт/см2, частота модуляции из спектра 10–30 Гц, а также 50–100 Гц, 200–300 Гц, 600 Гц или 800–900 Гц в течение 15–60 с;––у животных,зараженныхдирофиляриозоми имеющихмикрофиляремию,наблюдаются значительные колебания уровня АлАТ, ЩФ, общего белка, СОЭ, гемоглобина,повышение содержание лейкоцитов и общего билирубина, уменьшение число тромбоцитови гематокрита.
Существенно понижено содержание лимфоцитов (в 6 и более раз) и эозинофилов,количество сегментоядерных нейтрофилов значительно увеличено. Количество моноцитов в 1.5и более раз выше нормы. Действие на клетки крови животных с паразитемией диапазонамичастот модуляции 10–20 Гц или 800–1000 Гц, интенсивностью 0.4 Вт/см2, с экспозицией 10–30 свызывало уменьшение количества лимфоцитов и сегментоядерных нейтрофилов, деформациюи «вспенивание» ядра, «вакуолизацию» цитоплазмы, ядерный сдвиг лейкограммы влево, гемолизэритроцитов.Указанный эффект может служить диагностическим критерием.
УЗИ больнымдирофиляриозом животным следует делать при контроле цитологических и гематологическихпоказателей. УЗ терапевтической интенсивности не оказывает влияния на Dirofilaria repens дажепри максимальной экспозиции;– начало УЗ гемолиза эритроцитов при обработке крови больных животныхс моноинвазиями регистрируется через 25–30 с, смешанной инвазией — через 18–20 с;– тромбоциты крови больных животных агрегируют раньше, чем кровяные пластинкиздоровых; максимально быстро — при наличии внутриклеточных инвазий.Выявлена повышенная чувствительность бабезий к амплитудно-модулированному УЗ.6.Выявленыусловияи результатыдействиянепрерывного,модулированногои импульсного УЗ на клетки крови лошадей, изменяющие состояние ЦПМ, жизнеспособностьклеток и их морфологию:– непрерывным УЗ частотой 0.88 МГц, интенсивностью 0.05–1.0 Вт/см2 в течение 15–60 с — на ядросодержащие клетки размером более 7 мкм, а на безъядерные клетки размером до6 мкм — интенсивностью 0.7–1.0 Вт/см2в течение 20–40 с;– модулированным УЗ частотой генерации 0.88 МГц на ядросодержащие клетки размеромболее 7 мкм в течение 15–45 с диапазонами интенсивности 0.2–1.0 Вт/см2 и частот модуляции10–100 Гц, а также интенсивностью 0.05 Вт/см2 вблизи частоты 800 Гц или интенсивностью0.4 Вт/см2 и частотой модуляции вблизи 300 Гц, 600 Гц и 900 Гц.
На безъядерные клетки272размером до 6 мкм — в течение 30–60 с интенсивностью 0.05–0.2 Вт/см2 частотами модуляциииз диапазонов 90–100 Гц, 200–500 Гц и вблизи частоты 800 Гц, а также интенсивностью 0.2–0.4 Вт/см2 с частотами модуляции из диапазонов 10–80 Гц и вблизи частот 200 Гц и 800 Гц, илиинтенсивностью 0.7 Вт/см2 и частотой модуляции вблизи 100 Гц;– импульсным УЗ с частотой генерации 2.64 МГц диапазоном интенсивности 0.4–1.0 Вт/см2 в течение 20–60 с — на ядросодержащие клетки размером более 7 мкм, и безъядерныеклетки размером до 6 мкм — интенсивностью 0.7–1.0 Вт/см2в течение 25–60 с.7.
Разработан способ окраски тромбоцитов, основанный на изменении проницаемости ихЦПМ после воздействия непрерывным УЗ частотой 0.88 МГц, интенсивностью 0.4 Вт/см2 от 30 сдо 45 с; либо модулированным УЗ несущей частотой 0.88 МГц, интенсивностью 0.05 Вт/см2в течение 30–40 с, или интенсивностью 0.2 Вт/см2 в течение 20–35 с, или интенсивностью0.4 Вт/см2 в течение 15–30 с, или интенсивностью 0.7 Вт/см2 в течение 15–20 с с любой частотоймодуляции из диапазона от 10 до 30 Гц или с частотой модуляции 800 Гц; либо импульсным УЗс несущей частотой 2.64 МГц, интенсивностью 0.4 Вт/см2 в течение 15–30 с в режиме 10 мс(Патент на изобретение № 2589679 и № 2589680).8. Определена возможность направленного изменения лейкограммы больных животныхпосле воздействия непрерывной УЗ волной частотой 0.88 МГц интенсивностью от 0.05 до0.1 Вт/см2 с экспозицией на кровь животных от 15–30 с, что приводит к уменьшению числалимфоцитов и изменению числа нейтрофилов у больных.
Результат является диагностическимкритерием наличия заболевания. (Патент на изобретение № 2574881).9. Найдены условия и оптимальный режим стимулирующего воздействия амплитудномодулированных УЗ волн на лейкоциты, увеличивающего на 25–30 % выход лейкинферона, приинтенсивности 0.05 Вт/см2, частоте модуляции 800 Гц, времени экспозиции 30 с — 1 мин.10. Ферментные системы организма, как наиболее лабильные в зависимости отинтенсивности, времени экспозиции и частот воздействия, претерпевали неоднозначноеизменение.
Их ответ был аналогичен реакции клеток.– Режим воздействия, одновременно повышающий активность ЛДГ, АсАТ, ЩФ, АлАТи КК плазмы крови МДЖ составляет: интенсивность 0.4 Вт/см2, частота модуляции 800 Гц.– Для плазмы крови лошадей параметры обработки, инициирующие увеличениеферментативной активности — интенсивность 0.2 Вт/см2, частота модуляции 10 Гц.273– Уменьшение активности АлАТ сыворотки крови МДЖ вызывает аплитудномодулированный УЗ частотой 20 Гц, но с разной интенсивностью: у кошек — 0.4 Вт/см2, усобак — 0.7 Вт/см2.11.
Показано, что воздействие УЗ на ткани лабораторных мышей in vivo вызываетдостоверное (p < 0.05) снижение на 13–16% числа первичных покоящихся сперматоцитови пахитенных сперматоцитов при непрерывном облучении и при разных частотах модуляции: 10,520 и 1000 Гц.
Количество зрелых сперматозоидов после воздействия УЗ с частотой модуляции520 Гц снижалось значительно (на 66%). Стимулирующее действие на сперматогенные клеткиоказывает инсонация интенсивностью 1.0 Вт/см2 частотой модуляции 250 Гц в течение 5 мин.Таким образом, результаты исследования показали изменение реакции биологическихобъектов (клеток крови, фотобактерий, архей) и целого организма животных разных видов на УЗоблучение в зависимости от интенсивности, частоты модуляции, времени экспозиции.Установлены активирующее, тормозящее и разрушающее действие УЗ волн.
Установленыоптимальные режимы УЗ воздействия для реализации этих эффектов.Рекомендации и перспективы дальнейшей разработки темыНа основании проведённых исследований клеток разной природы и целых организмоввыявлены параметры активирующего и стимулирующего, а также тормозящего и разрушающеговлияния непрерывного и модулированного УЗ. Разработанные параметры: интенсивности,длительности и диапазоны частот модуляции необходимо учитывать для создания методикприменения УЗ в лечебных и диагностических мероприятиях как в ветеринарии, таки в медицине.
Установленные факты можно применять в клеточной и молекулярной биологии.Они могут представить интерес для разработки методов экспериментальной медицины,фармакологии, диагностики и терапии злокачественных новообразований, индивидуальногоподборалекарственныхпрепаратови герондопротекторов,обеспечитьпоступлениелекарственных препаратов только в конкретные клетки. Воздействие спектром активных частотпозволяет выборочно разрушать в одной ткани ядра у клеток определённого, заранее заданногоразмера; направленно подавлять рост клеток, в том числе и ненормированный; нарушать аппаратмежклеточноговзаимодействияи клеточныхконтактов;регулироватьактивностьвнутриклеточных и мембран-связанных ферментов, а также транспортных систем клеток.Дальнейшие исследования в этом направлении должны быть направлены на детализациюэффектов организма в целом при использовании УЗ в диагностике и терапии.274Внедрение результатов диссертационной работыЭкспериментально полученные результаты частично использованы в учебных пособиях:1-м и 2-м изданиях А.
И. Журавлёва и других «Основы физики и биофизики» (допущеноМинистерством образования РФ в качестве учебного пособия для студентов вузов, обучающихсяпо специальностям 310800 «Ветеринария» и 310700 «Зоотехния» // М. : МИР БИНОН, 2005и 2008. — 384 с.);А. А. Олешкевич «Колебания и волны» (учебно- методическое пособие по биологическойфизике и биофизике.
Допущено УМО РФ по образованию в области ветеринарии и зоотехниив качестве учебно-методического пособия для студентов вузов, обучающихся по специальности36.05.01 Ветеринария (квалификация «ветеринарный врач»), по направлению подготовки36.03.02 Зоотехния (квалификация (степень) «бакалавр») // М. : Зооветкнига, 2015. – 57 с.);в разработанных практических рекомендациях: Ф.
И. Василевич, Т. В. Ипполитова,А. А. Олешкевич «Физиологические и биохимические аспекты применения ультразвукав ветеринарной медицине» (научно-методические рекомендации по практическому применениюнепрерывного и амплитудно-модулированного ультразвука для ветеринарии и биологии» // М. :Зооветкнига, 2016. – 27 с.);а также в учебном процессе при чтении лекций, проведении лабораторно-практическихзанятий и при выполнении научных исследований на кафедрах Физиологии, Паразитологиии ветеринарно-санитарнойэкспертизы,Радиобиологии,биофизикиивирусологии,Информационных технологий и физики ФГБОУ ВО МГАВМиБ — МВА имени К. И. Скрябина(Приложение Б2 на странице 323).275СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙАлАТаланинаминотрансферазаАсАТаспартатаминотрансферазаИФНинтерферонКконтроль (как правило, в таблицах, графиках и диаграммах)ККкреатинкиназаЛДГлактатдегидрогеназаМДЖмелкие домашние животныеСЭПэлектростатическое (статическое электрическое) полеУЗультразвук, ультразвуковойЦПцитоплазмаЦПМцитоплазматическая мембранаЩФщелочная фосфатазаЭМИэлектромагнитное излучениеЭМПэлектромагнитное полеВ лейкограммахБбазофилыЛлимфоцитыМмоноцитыНнейтрофилыПпалочкоядерные нейтрофилыСсегментоядерные нейтрофилыЭэозинофилыЮюные276СЛОВАРЬ ТЕРМИНОВ«гантели»: Специфическое расположение эритроцитов, наблюдаемое при микроскопиимаков крови.
Клетки сближаются и накладываются друг на друга, подобно тому, как складываютспортивный снаряд.инсона́ция: (от англ. sonication) Ультразвуковое воздействие.СВФ: Интегральный диагностический индекс степени влияния физического фактора нафрактальную размерность изображения мазка крови, в относительных единицах.277СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ1.Авторское свидетельство SU 1206693, МПК G01N 29/06. Способ визуализацииультразвукового поля / Т.
Н. Пашовкин, Г. В. Шильников, А. П. Сарвазян. — 23.01.1986 г.2.Авторское свидетельство SU 1575362, МПК G01N 29/06. Способ полученияинтерферона / А. А. Олешкевич, В. П. Кузнецов, В. Б. Акопян. — 07.11.1990 г.3.Авторское свидетельство SU 1597387, МПК C12N 5/00. Способ получения культурыклеток животных / А. А. Олешкевич, В. Б. Акопян, Л. П. Смирнова. — 07.10.1990 г.4.Агаджанян, Н. А.МагнитноеполеЗемлииорганизмчеловека[Текст] /Н. А. Агаджанян, И. И. Макарова // Экология человека. — 2005. — № 9.