Диссертация (1151313), страница 54
Текст из файла (страница 54)
Ожидаемое нами кратное изменение активности сывороточных ферментов,связанное с их выходом из повреждённых клеток, зарегистрировано не было.Изменение частоты модуляции до 40 Гц (0.4 Вт/см2) увеличивало в 1.5 раза активность ККв сыворотке и в плазме крови, не влияя на другие ферменты, а до 900 Гц — в 3 раза увеличивалоактивность АлАТ и АсАТ по сравнению с контрольными показателями и в 2.3 — ЛДГ.Установлены достоверные (p < 0.05) сильные положительные связи между изменениемактивности ферментов: АлАТ с АсАТ: r = 0.85 в сыворотке и 0.92 в плазме крови, что близко крезультату корреляционного анализа активности этих ферментов в плазме крови кошек.Контрольактивностиуказанныхферментовв сывороткекровииспользуетсяв клинической биохимии при постановке диагноза [78].
Возможно, изменение активностив любую сторону под действием УЗ может послужить диагностическим критерием.Было показано [94], что у собак, в отличие от кошек, добавление напрямую гемоглобинак сыворотке практически не влияет на изменение активности АлАТ, а следовательно, изменениеферментативной активности в нашем эксперименте также не было связано с разрушениемэритроцитов.Другой активный режим воздействия (интенсивность 0.05 Вт/см2, частота 800 Гц) в 8–10раз уменьшал активность КК в сыворотке, не влияя на АлАТ и АсАТ. Облучениеинтенсивностью 0.7 Вт/см2, частотами 10–20 Гц изменяло активность всех ферментов в плазмев 1.2–1.8 раз (рисунок 105), увеличивая КК и ЛДГ и уменьшая активность остальных (p > 0.05).Эффект изменения активности исследуемых ферментов после инсонации сыворотки крови былподтверждён достоверно только в случае АсАТ: её активность понижалась до 3 раз по сравнениюс контролем.
Возможность изменения КК активности после облучения была также отмеченав обзоре Л. Джонса [301]. Ряд исследователей установили [159, 160] влияние модулированногоУЗ на ферментативную активность. Возможно, происходило прямое воздействие частотой наактивный сайт фермента. Действие на пробы крови собак модулированным УЗ интенсивности0.4 Вт/см2 с модуляцией 800–900 Гц приводило к значительному изменению активности: АсАТи АлАТ возрастала в 3 и более раз, что мы объясняли вероятным разрушением клеток. Но такоепредположение не раскрывает причин разнонаправленного ингибирования или активацииферментов АлАТ и КК и в плазме, и в сыворотке крови. Наиболее правдоподобной, с нашейточки зрения, можно считать частотно-резонансную гипотезу Л.Д.
Джонса [301] (схема нарисунке 103 со страницы 253). Возможно, наряду с выходом фермента из клеток послеизменения ЦПМ происходило прямое воздействие частотой управления на активный сайтфермента. УЗ угнетение ферментативной активности могло происходить и «по схеме»В.Г Артюхова [25]. Согласно данной теории, у диссоциативных ферментных систем удельная255активность может снижаться при увеличении концентрации фермента вследствие образованияассоциатов с меньшей активностью, чем исходные молекулы. Потеря активности объясняетсястерическойнедоступностьюдлявысокомолекулярногосубстратаактивныхцентровсубъединиц белкового тетрамера.На диаграммах (рисунки 104 и 105) представлены направления и относительноеизменение активности исследуемых ферментов. Подводя итог, можно ещё раз отметить, чтоувеличение активности трансфераз и ЛДГ в УЗ поле объясняется разрушением клеток крови.В остальных случаях изменение активности можно объяснить только резонанснойтеорией воздействия на активный центр фермента.Понижение активности ЩФ под действием модулированного УЗ у собак (800 Гц) можнообъяснить увеличением содержания гемоглобина после нарушения проницаемости ЦПМи целостности эритроцитов: по Кирку, прямое добавление гемоглобина к сыворотке крови кошеки собак ингибирует активность ЩФ в 5–10 раз [94].
Однако, как видно на диаграммах,в указанном случае происходит понижение активности фермента в 3 раза.Ряд исследователей [152] выявили частотную зависимость изменения активности ЩФ, ККи ЛДГ плазмы крови крысы, кролика и человека. При интенсивности 0.7 Вт/см2 активность ЩФвозрастала на 10–60% в зависимости от видовой принадлежности крови. Спектр активностичастот находился в диапазоне 310–380 Гц.
В тех же исследованиях приводились данныевозможности уменьшения и увеличения активности КК кролика под действием амплитудномодулированного УЗ интенсивностью 1.0 Вт/см2. Диапазон активных частот модуляции непревышал 2–10 Гц. Максимальное увеличение активности давало воздействие вблизи частоты8 Гц (увеличение до 80%), ингибирование на 10–30% вызывали воздействием 10-герцевоймодуляции.Нами была впервые показана возможность увеличения активности ЩФ в 5 раз привоздействии активными спектрами частот, лежащими в другой области (при частоте модуляциивблизи 800 Гц на интенсивности 0.05 Вт/см2 у собак).
В том же случае регистрировалипонижение активности КК в 9–10 раз.Изменение активности,% к контрольному значению256140%117%124%122%120%100%100%76%80%60%67%58%43%35%30% 26%40%22%13%20%0%-14%0.05-20%0.40.7Интенсивность, Вт/см²КИзменение активности,% к контрольному значению110%АлАТАсАТКК300%218%205%200%130%107%65%100%21%12%24%-32%-65%-83%-89%0.050.40.7Интенсивность, Вт/см²СИзменение активности,% от контрольного значения33%-10%-100%ЛЛДГ369%400%0%ЩФАлАТ140%120%100%80%60%40%20%0%-20%-40%-60%-80%АсАТККЩФЛДГ123%63%41%26%=К7%9%14%13%4%2%-6%-15%-13%0.050.40.7-12%-75% 1.0Интенсивность, Вт/см²АлАТАсАТККЛДГРисунок 104.
Разнонаправленное изменение активности ферментов крови разных видов животных под действиемУЗ терапевтического диапазона интенсивностей и частоты модуляции 800 Гц. Время воздействия — 90 с. Здесь ина рисунке 105: К — ферментный спектр крови кошачьих, С — собачьих, Л — лошадей.257180%Изменение активности,% к контрольному значению200%150%100%50%80%69%60%40%50%47%42%30%60%75%41% 39%27%13%25%=К0%-15%-27%-50%0.2-47%0.40.71.0Интенсивность, Вт/см²Изменение активности,% к контрольному значениюСАлАТ150%100%50%АсАТККЩФЛДГ138%88%54%4%8%3%7%24% 17%0%-7% -5%-19%-50%-100%-88%0.2-50%-68%0.40.7-89%1.0Интенсивность, Вт/см²ЛАлАТАсАТККЛДГРисунок 105.
Максимальное изменение активности ферментов крови собак и лошадей под действием УЗтерапевтического диапазона интенсивностей и частоты модуляции 10–30 Гц. Время воздействия — 90 с. С —ферментный спектр крови собачьих, Л — лошадей.§ 17.4. Действие модулированного ультразвука на активность ферментовкрови лошадейИзменение ферментативной активности в плазме и сыворотке крови лошадей носилооднонаправленный характер. Так, обработка модулированным УЗ сыворотки крови приводилак уменьшению активности АлАТ в 3 раза, а плазмы — в 8–10 раз (0.4 Вт/см2, модуляция 10–20 Гц).
Инсонация УЗ той же интенсивности, но с частотой модуляции 800 Гц, оказываламинимальное воздействие на активность ферментов плазмы крови: достоверное увеличение(p < 0.05) регистрировали только относительно активности ЛДГ и КК, в 1.2–1.4 раза. Наактивность остальных исследованных ферментов влияние не регистрировали.258Облучение сыворотки крови вызывало изменение активности только ЛДГ (увеличениев 1.7 раза).
Модулированный УЗ интенсивностью 1.0 Вт/см2 снижал активность в плазме кровиАлАТ в 2–3 раза при воздействии частотами вблизи 20 Гц и 1000 Гц; в 3.5–6 раз вблизи 800 Гц,вызывая понижение активности в 10 и более раз на частоте модуляции 10 Гц (таблица 36 настранице 154).
В то же время, активность АсАТ после действия модулированного УЗ 800 Гц наплазму крови увеличивалась в 2–2.2 раза (рисунок 104).На других частотах модуляции (300–400 Гц) была показана [152] возможность увеличенияактивности ЛДГ (до 120%) после обработки плазмы крови крыс интенсивностью УЗ 0.7 Вт/см2.Тот же диапазон частот модуляции ровно во столько же раз уменьшал активность ЛДГ приинтенсивности 0.2 Вт/см2.
Таких ярких результатов на сыворотке и плазме крови лошадей намполучить не удалось на всём исследованном диапазоне: во всех случаях опытные результатыбыли близки к контрольным.Наличие достоверных средних положительных и отрицательных корреляционных связейбыло установлено между изменением активности КК и АлАТ (r = –0.47), КК и АсАТ (r = 0.44) всыворотке, а также КК и ЛДГ (r = 0.65) в плазме крови.Тем не менее, нельзя не выделить возможность изменения активности данного ферментау собак. Так, при частоте модуляции 800 Гц и интенсивности 0.05 Вт/см2 регистрировалиувеличение активности ЛДГ на те же 120%; а при частоте 10–30 Гц и интенсивности0.2 Вт/см2 — на 180%.Анализ результатов влияния УЗ на активность ферментов гомеостаза здоровых особейМДЖ и лошадей показал, что воздействие непрерывным УЗ интенсивностью 0.4–0.7 Вт/см2(45–60 c) вызывало увеличение активности ЩФ и ЛДГ плазмы крови кошек; АсАТ, КК, ЩФ иЛДГ — в плазме крови собак; и активность АсАТ, КК и ЩФ — в плазме крови лошадей.Некоторое уменьшение активности отмечено после обработки плазмы крови собак (АлАТ) илошадей (АсАТ, КК и ЛДГ).Более активное воздействие было выявлено в сыворотке крови под воздействиемамплитудно-модулированного УЗ.
Наибольшее повышение активности выявлено для всехферментов у кошек; на некоторых режимах наблюдали увеличение активности аминотрансфераз:АлАТ — 0.4 Вт/см2, 800 и 900 Гц у собак, 0.5 Вт/см2, 200 Гц у лошадей; АсАТ — 0.4 Вт/см2, 40и в особенности 800 Гц у собак, 0.05 Вт/см2, 100 Гц и 0.2 Вт/см2 200 Гц у лошадей. Такжеу лошадей обнаруживали увеличение активности КК на большинстве интенсивностейвоздействия (0.2–1.0 Вт/см2) на частотах модуляции, кратных 10 и 70–80 Гц (с множителями ×1,×2, ×10, ×20); у кошек подобный эффект наблюдали вблизи крайних режимов (0.05 и 0.7 Вт/см2),у собак — на средней интенсивности 0.4 Вт/см2 при частоте 50 Гц.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
