Диссертация (1145828), страница 24

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 24)

— 2014. — T. 56, № 6. — C. 777-85.219.Sollier J., Cimprich K. A. Breaking bad: R-loops and genome integrity // Trends CellBiol. — 2015. — T. 25, № 9. — C. 514-22.220.Kang M. S., Yu S. L., Kim H. Y., Gorospe C. M., Choi B. H., Lee S. H., Lee S. K. YeastRAD2, a homolog of human XPG, plays a key role in the regulation of the cell cycle and actindynamics // Biol Open.

— 2014. — T. 3, № 1. — C. 29-41.221.Prakash S., Prakash L. Nucleotide excision repair in yeast // Mutat Res. — 2000. — T.451, № 1-2. — C. 13-24.126БлагодарностиХочу выразить глубокую благодарность моему научному руководителю СергеюГеоргиевичу Инге-Вечтомову за чуткое руководство, за неоценимую помощь в работе ипри написании диссертации, полезные советы и поддержку на всех этапах работы.Я хочу сердечно поблагодарить Елену Игоревну Степченкову, которая вместе сСергеем Георгиевичем была инициатором проведенного исследования, за обучениеметодам работы и методические советы, помощь в планировании экспериментов,плодотворное обсуждение результатов работы и ценные комментарии к текстудиссертации, а также за ее внимательное и чуткое отношение и безграничное терпение.Хочу поблагодарить Юлию Вячеславовну Андрейчук и Анну АлександровнуШиряеву за плодотворную совместную работу.

Выражаю благодарность ЮлииВикторовне Соповой и Александру Анатольевичу Рубелю за помощь и содействие восвоении методов флуоресцентной микроскопии. Хочу выразить огромную благодарностьПолине Борисовне Дроздовой за критическую оценку текста диссертации. Также я хочупоблагодаритьСергеяПавловичаЗадорского,веськоллективлабораториифизиологической генетики и кафедры генетики за хорошее отношение.Хочу выразить признательность Павлову Юрию Ивановичу за возможность пройтистажировку в его лаборатории и провести ряд экспериментов по теме диссертационногоисследования.Я хотела бы поблагодарить Буре Владимира Мансуровича за помощь в выбореподходящих методов математической статистики для анализа экспериментальных данных.Выражаюпризнательностьсотрудникамресурсногоцентра"Развитиемолекулярных и клеточных технологий" СПбГУ.В завершение благодарю свою семью за неоценимую помощь, понимание иподдержку.ПРИЛОЖЕНИЕ АЧастота событий, учитываемых в тесте на "незаконную" гибридизацию, при воздействии 6-гидроксил-аминопурина (ГАП)ВоздействиеОбщая частота"незаконной"гибридизации×10-7(медиана идоверительныйинтервал)Числопроверенных"незаконных"гибридовБезвоздействия63 83 1401322ГАП50 мг/л297 425 510Типы учитываемых нарушений, их (а) доля (%) и (б) частота ×10-7(медиана и доверительный интервал)ПотеряхромосомыIIIа46,6±2,7ба89230 37 6520±0,8б59 84 101Потеряправого плечахромосомы IIIаба38±2,624 32 5311±0,4б33 47 56Мутации ивременныеповреждения влокусе MATαа13,5±0,4%ба8,5Реципрокнаярекомбинациямежду локусомМАТα и кассетойHMRaаб11 1968±3,1б202 289 3470,5±0,005а0,30,4 0,70,3±0,003б1 1,4 1,7КонверсиякассетыHMRa в локусMATαабаб1,4±0,020,91,1 1,90,9±0,012,7 3,8 4,6Примечание:Одинарным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты, учитываемых событий после обработки ГАП, по сравнению счастотой тех же событий, возникших спонтанно (достоверность различий определяли по критерию Манна-Уитни (Р<0,05)).Двойным подчеркиванием отмечено достоверное изменение доли классов учитываемых генетических событий после обработки ГАП посравнению с долей тех же событий, возникших спонтанно (достоверность различий определяли по z-критерию (Р<0,05)).ПРИЛОЖЕНИЕ БЧастота событий, учитываемых в тесте на "незаконную" гибридизацию, при воздействии 6-гидроксил-аминопурина (ГАП) на селективнойсреде для отбора гибридов без добавления гистидинаВоздействиеБезвоздействияГАП50 мг/лОбщая частота"незаконной"гибридизации×10-7(медиана идоверительныйинтервал)Числопроверенных"незаконных"гибридовТипы учитываемых нарушений, их (а) доля (%) и (б) частота ×10-7(медиана и доверительный интервал)Потеря правогоплечахромосомы IIIа7188 114649ба167228 262560а85±3,76179б75 9742,7±4,1бМутации ивременныеповреждения влокусе MATα97 123абРеципрокнаярекомбинация междулокусом МАТα икассетой HMRaа11±0,58104б10 1356,3±4,1128 1622,1±0,05а1,60,7аб1,9 2,50,36±0,004бКонверсиякассеты HMRa влокус MATα0,8 1а1,7±0,031,21,5 1,90,71±0,01б1,31,6 2,1Примечание:Одинарным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты, учитываемых событий после обработки ГАП, по сравнению счастотой тех же событий, возникших спонтанно (достоверность различий определяли по критерию Манна-Уитни (Р<0,05)).Двойным подчеркиванием отмечено достоверное изменение соотношения доли классов генетических событий после обработки ГАП посравнению с долей тех же событий, возникших спонтанно (достоверность различий определяли по z-критерию (Р<0,05)).ПРИЛОЖЕНИЕ ВЧастота событий, учитываемых в тесте на "незаконную" цитодукции, при воздействии 6-гидроксил-аминопурина (ГАП)ВоздействиеОбщая частота"незаконной"цитодукции×10-7(медиана идоверительныйинтервал)Типы учитываемых нарушений, их (а) доля (%) и (б) частота ×10-7(медиана и доверительный интервал)Числопроверенных"незаконных"цитодуктантовВременныеповреждения в локусеMATαфенотипцитодуктантовαаБезвоздействияГАП50 мг/л0,61 1,481,1±2,60,5а10 14аМутации влокусе MATαфенотипцитодуктантовa*а18,3±0,6Мутации влокусе MATαфенотипцитодуктантовn/mа0,5±0,0040,1±0,0041327б7Конверсия HMRa влокус MATαфенотипцитодуктантова7320,8 1,191±3,2б79 13б0,1аб0,2 0,25б0,003а7±0,20,5 0,7 1б0,005 0,0060,7±0,010,05 0,07 0,09б0,0005аб0,0008 0,0011,3±0,020,08 0,1 0,2Примечание:Одинарным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты, учитываемых событий после обработки ГАП, по сравнению счастотой тех же событий, возникших спонтанно (достоверность различий определяли по критерию Манна-Уитни (Р<0,05)).Двойным подчеркиванием отмечено достоверное изменение соотношения доли классов генетических событий после обработки ГАП посравнению с долей тех же событий, возникших спонтанно (достоверность различий определяли по z-критерию (Р<0,05)).ПРИЛОЖЕНИЕ ГЧастота событий, учитываемых в тесте на "незаконную" гибридизацию, у штаммов с делецией гена OGG1ШтаммОбщая частота"незаконной"гибридизации×10-7(медиана идоверительныйинтервал)Числопроверенных"незаконных"Потерягибридовхромосомы IIIаwt199 232 2461322баogg1156 182 2021016бТипы учитываемых нарушений, их (а) доля (%) и (б) частота ×10-7(медиана и доверительный интервал)Потеряправого плечахромосомы IIIа46,6±2,7б93 108 11553,7±3,184101 110а38±2,676 88 9431,2±2,9б4959 64Мутации ивременныеповреждения влокусе MATαа13,5±0,4бабРеципрокнаярекомбинация междулокусом МАТα икассетой HMRaаб27 31 3314±0,52226 290,5±0,005а1,1аб1,2 1,30,5±0,005бКонверсиякассеты HMRaв локус MATα0,7 0,9 1а1,4±0,022,73,2 3,30,6±0,006б0,91,1 1,2Примечание:Одинарным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты, учитываемых событий у штамма с мутацией ogg1, по сравнению ссоответствующей частотой у штамма дикого типа (wt) (достоверность различий определяли по критерию Манна-Уитни (Р<0,05)).Двойным подчеркиванием отмечено достоверное изменение соотношения доли классов генетических событий у мутанта ogg1по сравнениюс соответствующей долей у штамма дикого типа (wt) (достоверность различий определяли по z- критерию (Р<0,05)).ПРИЛОЖЕНИЕ ДЧастота событий, учитываемых в тесте на "незаконную" цитодукцию, у штаммов с делецией гена OGG1ШтаммОбщая частота"незаконной"цитодукции×10-7(медиана идоверительныйинтервал)Типы учитываемых нарушений, их (а) доля (%) и (б) частота ×10-7(медиана и доверительный интервал)Числопроверенных"незаконных"цитодуктантовВременныеповреждения в локусеMATαфенотипцитодуктантовαаwt0,9 1,3 1,81327ogg134,1 7,31319а81,1±2,6баКонверсия HMRa влокус MATαфенотипцитодуктантова0,71 1,584,2±2,6б2,53,5 6ба18,3±0,60,16аМутации в локусе Мутации в локусеMATαMATαфенотипфенотипцитодуктантовцитодуктантовn/ma*0,23 0,33бб0,40,6 10,005а13,8±0,4ба0,5±0,0040,006 0,0080,5±0,0050,0170,022 0,038б0,1±0,0040,0008 0,001 0,0013аб1,5±0,020,050,06 0,1Примечание:Одинарным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты, учитываемых событий у штамма с мутацией ogg1, по сравнению ссоответствующей частотой у штамма дикого типа (wt) (достоверность различий определяли по критерию Манна-Уитни (Р<0,05)).Двойным подчеркиванием отмечено достоверное изменение соотношения доли классов генетических событий у мутанта ogg1по сравнениюс соответствующей долей у штамма дикого типа (wt) (достоверность различий определяли по z- критерию (Р<0,05)).ПРИЛОЖЕНИЕ ЖЧастота событий, учитываемых в тесте на "незаконную" гибридизацию, у штаммов с делецией гена PMS1ШтаммОбщая частота"незаконной"гибридизации×10-7(медиана идоверительныйинтервал)Числопроверенных"незаконных"гибридовТипы учитываемых нарушений, их (а) доля (%) и (б) частота ×10-7(медиана и доверительный интервал)ПотеряхромосомыIIIаwt3035 49132246,6±2,7баpms1103 138 1621308б1416 2344±2,745 61 71Потеряправого плечахромосомы IIIабаб38±2,61113 1838±2,63952 61Мутации ивременныеповреждения влокусе MATαа13,5±0,4баб44,7 6,617±0,51824 28Реципрокнаярекомбинация междулокусом МАТα икассетой HMRaабабКонверсиякассеты HMRaв локус MATαа0,5±0,0050,160,5±0,0040,47б0,2 0,260,63 0,74аб1,4±0,020,40,5 0,70,5±0,0040,470,63 0,74ПримечаниеОдинарным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты, учитываемых событий у штамма с мутацией pms1, по сравнению ссоответствующей частотой у штамма дикого типа (wt) (достоверность различий определяли по критерию Манна-Уитни (Р<0,05)).Двойным подчеркиванием отмечено достоверное изменение соотношения доли классов генетических событий у мутанта pms1по сравнениюс соответствующей долей у штамма дикого типа (wt) (достоверность различий определяли по z- критерию (Р<0,05)).ПРИЛОЖЕНИЕ КЧастота событий, учитываемых в тесте на "незаконную" цитодукцию, у штаммов с делецией гена PMS1Типы учитываемых нарушений, их (а) доля (%) и (б) частота ×10-7(медиана и доверительный интервал)Общая частота"незаконной"цитодукцииЧислоВременные-7проверенных повреждения в×10Штамм"незаконных"локусе MATα(медиана идоверительныйцитодуктантовфенотипинтервал)цитодуктантовαаwt1,1 2,1 2,581,1±2,6%1327баpms10,97 1,8 2,3308б0,91,7 262±5,4%0,61,1 1,4Конверсия HMRa влокус MATαфенотипцитодуктантоваа18,3±0,6%б0,2 0,38 0,45абМутации в локусеMATαфенотипцитодуктантовa*аб0,5±0,004%0,006а33±5,3%0,30,6 0,7б0,01 0,02Мутации в локусеMATαфенотипцитодуктантовn/mаб0,1±0,0003%0,001а4±0,2%0,040,08 0,09б0,002 0,0031±0,02%0,010,02 0,025Примечание:Одинарным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты, учитываемых событий у штамма с мутацией pms1, по сравнению ссоответствующей частотой у штамма дикого типа (wt) (достоверность различий определяли по критерию Манна-Уитни (Р<0,05)).Двойным подчеркивание отмечено достоверное изменение соотношения доли классов генетических событий у мутанта pms1по сравнению ссоответствующей долей у штамма дикого типа (wt) (достоверность различий определяли по z- критерию (Р<0,05)).ПРИЛОЖЕНИЕ ЛЧастота мутаций при воздействии УФ излучения 254 нм и УФ излучения 365 нм, в тесте на индукцию прямых мутаций устойчивости кканаванинуВоздействиеБез воздействийЧастота*10-7(медиана идоверительныйинтервал)1017 56УФ 265 нм 31 Дж/м2УФ 365 нм 0550 4999 6674УФ 265 нм 0УФ 365 нм 24000 Дж/м227 33 77УФ 265 нм 0УФ 365 нм 36000 Дж/м22345 95УФ 265 нм 31 Дж/м2УФ 365 нм 24000 Дж/м2637 4833 6151УФ 265 нм 31 Дж/м2УФ 365 нм 36000 Дж/м24513908 4119Выживаемость(медиана и доверительныйинтервал)Выживаемость в %(медиана и доверительныйинтервал)171 234 268100(медиана)5561 7722 28 42217 2618097 130162 226 2566698 13392 114 1443850 844673 82182122144 206Примечание:Пунктирным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты прямых мутаций устойчивости к канаванину при воздействии УФизлучения 365 нм по сравнению с частотой, возникшей спонтанно (достоверность различий определяли по критерию Вилкоксона (Р<0,05)).Одинарным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты прямых мутаций устойчивости к канаванину при совместномвоздействии УФ излучения 265 нм и 365 нм по сравнению с частотой, индуцированной только УФ излучением 265 нм (достоверностьразличий определяли по критерию Вилкоксона (Р<0,05)).Двойным подчеркивание отмечено достоверное изменение выживаемости клеток при воздействии УФ излучения 265нм и 365 нм посравнению с выживаемостью при воздействии УФ излучения 265 нм (достоверность различий определяли по критерию Вилкоксона(Р<0,05)).УФ излучение 365 нм использовано для осуществления фотореактивации.ПРИЛОЖЕНИЕ МЧастота событий, учитываемых в тесте на "незаконную" гибридизацию, при фотореактивации (УФ излучение 365 нм)ВоздействиеБезвоздействийУФ 265 нм 0УФ 365 нм36000 Дж/м2УФ 265 нм31 Дж/м2УФ 365 нм 0УФ 265 нм31 Дж/м2УФ 365 нм36000 Дж/м2Примечание:Общаячастота"незаконной"гибридизации×10-7(медиана идоверительныйинтервал)Типы учитываемых нарушений, их (а) доля (%) и (б) частота ×10-7(медиана и доверительный интервал)ВыживаемостьЧислов%проверенныхмедиана и"незаконных"доверительныйгибридовинтервалПотеряхромосомыIIIа249277 3071001386б45,9±2,6114а292434 48363 103 138560б2894 3239 425338 51 80627б19832413 29595768 102167 1858,1±0,3235 264 346ааба8,6±0,3аа331 434б392326аа1,32,1КонверсиякассетыHMRa влокус MATαаа3,4 3,8 4,22,5±0,06баа711 120,8±0,01б14 16 200,2±0,0011,4±0,02б3,1 3,40,5±0,006ба1,4 1,60,7±0,01б2604 341982,8±40,5±0,004б58 6580,4±3,1а7,6±0,3а32 36 3713,4±0,6б196 21710,2±0,429512,9±0,4б45±4,1132аа98 109 121абМутации ивременныеповреждения влокусе MATα39,3±2,6б38,4±4112а127 141ПотеряправогоплечахромосомыIIIРеципрокнаярекомбинация междулокусомМАТα икассетойHMRa2326 340,8±0,01594б170207 254б150183 224б16421999 2451б3,34,1 5б1720 25Пунктирным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты прямых мутаций устойчивости к канаванину при воздействии УФизлучения 365 нм по сравнению с частотой, возникшей спонтанно (достоверность различий определяли по критерию Вилкоксона (Р<0,05)).Одинарным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты прямых мутаций устойчивости к канаванину при совместномвоздействии УФ излучения 265 нм и 365 нм по сравнению с частотой, индуцированной только УФ излучением 265 нм, (достоверностьразличий определяли по критерию Вилкоксона (Р<0,05)).Двойным подчеркивание отмечено достоверное изменение выживаемости клеток при воздействии УФ излучения 265нм и 365 нм посравнению с выживаемостью при воздействии УФ излучения 265 нм (достоверность различий определяли по критерию Вилкоксона(Р<0,05)).УФ излучение 365 нм использовано для осуществления фотореактивации.ПРИЛОЖЕНИЕ НЧастота событий, учитываемых в тесте на "незаконную" цитодукцию, при фотореактивацииВоздействиеОбщая частота"незаконной" ВыживаемостьЧислоцитодукциив%проверенных×10-7медиана и"незаконных"доверительный(медиана ицитодуктантовинтервалдоверительныйинтервал)Типы учитываемых нарушений, их (а) доля (%) и (б) частота ×10-7(медиана и доверительный интервал)Временныеповреждения влокусе MATαфенотипцитодуктантовαаБез воздействийУФ 265 нм 0УФ 365 нм 36000Дж/м2УФ 265 нм31 Дж/м2УФ 365 нм 0УФ 265 нм31 Дж/м2УФ 365 нм 36000Дж/м2Примечание:12,9 3,71001394ба1,52,5 3,681 100 110115ба31 45 6541 46 5532651 585964 7612,3 3а1,22 2,9230,2абаа0,5 0,7Мутации влокусе MATαфенотипцитодуктантовa*аб0,4 0,622,1±4,5710 1423,4±4,90,43±0,0030,005а17,4±20,3б33 4873,2±5,118,5±0,6б80±7,473,6±4,8ба3181±2,5КонверсияHMRa в локусMATαфенотипцитодуктантоваба0,04 0,061,8±0,06баб0,07±0,00030,001 0,002 0,003а1,7±0,10,03а0,01 0,015Мутации влокусе MATαфенотипцитодуктантовn/m0,60,8 1,21,7±0,05б0,9±0,030,01а2,5±0,08ба0,02 0,030,7 1,1 1,61,7±0,05291б2337 42б712 13б0,50,9 1б0,50,9 1Двойным подчеркивание отмечено достоверное изменение выживаемости клеток при воздействии УФ излучения 265 нм и 365 нм посравнению с выживаемостью при воздействии УФ излучения 265 нм (достоверность различий определяли по критерию Вилкоксона(Р<0,05)).УФ излучение 365 нм использовано для осуществления фотореактивации.ПРИЛОЖЕНИЕ ПЧастота событий, учитываемых в тесте на "незаконную" гибридизацию, при воздействии камптотециномКонцентрациякамптотецинаОбщая частота"незаконной"гибридизации×10-7(медиана и доверительныйинтервал)Типы учитываемых нарушений, их (а) доля (%) и (б) частота ×10-7(медиана и доверительный интервал)Числопроверенных"незаконных"гибридовПотеряхромосомыIIIа0238292 370775б865310983 18195603ба44,4±3,5100а7мг/лПотеряправого плечахромосомы III3630а42±44608 7634ба33,7±3,3б130 165Мутации ивременныеповрежденияв локусеMATα78б98 125а42,4±436734663 772516,2±0,7б38а1585 2625аКонверсиякассетыHMRa влокус MATαа0,7±0,008б48 6014,4±0,61248РеципрокнаярекомбинациямеждулокусомМАТα икассетойHMRa1,50,5±0,007б43б2 2,455 90а5±0,11215190,7±0,01б3773 121Примечание:Одинарным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты, учитываемых событий после обработки камптотецином, посравнению с частотой тех же событий, возникших спонтанно (достоверность различий определяли по критерию Манна-Уитни (Р<0,05)).Двойным подчеркиванием отмечено достоверное изменение доли классов учитываемых генетических событий после обработкикамптотецином по сравнению с долей тех же событий, возникших спонтанно (достоверность различий определяли по z-критерию (Р<0,05)).ПРИЛОЖЕНИЕ РЧастота событий, учитываемых в тесте на "незаконную" цитодукции, при воздействии камптотециномКонцентрациякамптотецинаОбщая частота"незаконной"цитодукции×10-7(медиана идоверительныйинтервал)Типы учитываемых нарушений, их (а) доля (%) и (б) частота ×10-7(медиана и доверительный интервал)Числопроверенных"незаконных"цитодуктантовВременныеповреждения влокусе MATαфенотипцитодуктантовαа02 2,3 31327ба7мг/л1013,5 161637б81,1±2,61,6 1,9 2,4КонверсияHMRa в локусMATαфенотипцитодуктантовааб10 12,8 15аба18,3±0,60,3694,8±1,8Мутации влокусе MATαфенотипцитодуктантовa*б0,4 0,54а5±0,10,5 0,7 0,8бМутации в локусеMATαфенотипцитодуктантовn/mа0,5±0,0040,090,1 0,13б0,0015а0,1±0,00020,0060,009 0,010,1±0,0003б0,0017 0,00220,1±0,00020,0060,009 0,01Примечание:Одинарным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты, учитываемых событий после обработки камптотецином, посравнению с частотой тех же событий, возникших спонтанно (достоверность различий определяли по критерию Манна-Уитни (Р<0,05)).Двойным подчеркиванием отмечено достоверное изменение доли классов учитываемых генетических событий после обработкикамптотецином по сравнению с долей тех же событий, возникших спонтанно (достоверность различий определяли по z-критерию (Р<0,05)).ПРИЛОЖЕНИЕ СЧастота событий, учитываемых в тесте на "незаконную" гибридизацию, при индукции транскрипции в центромере хромосомы IIIШтаммИсточникуглеродаОбщая частота"незаконной"гибридизации×10-7(медиана идоверительныйинтервал)Числопроверенных"незаконных"гибридовТипы учитываемых нарушений, их (а) доля (%) и (б) частота ×10-7(медиана и доверительный интервал)Потеря хромосомыIIIаwtглюкоза102140 1781322wtcen3галактоза137193 219564глюкоза961161554594878галактоза332011579275 724924516бба53332011б98 11354,7±4,6аcen3б65 8351,1±4,1баа46,6±2,7баПотеряправого плечахромосомы III63 85100579275 724924а38±2,6392631 41013,5±0,4баб69 8326,6±4,1ба53 6835,8±446Мутации ивременныеповреждения влокусе MATαа1419 249,4±0,41014а0,5±0,005ба17 2300,5а0,7 0,91,1±0,02б18 2114,6±0,8бРеципрокнаярекомбинациямежду локусомМАТα икассетой HMRa1,51,3аба1,5 201,4±0,021,4аб1,9 2,42,6±0,07б2 2,41,3±0,03бКонверсиякассетыHMRa влокус MATα3,7 5 5,72,8±0,082,7 3,3 4,40Примечание:Одинарным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты "незаконной" гибридизации при индукции транскрипции вцентромере хромосомы III по сравнению с соответствующей частотой у штамма дикого типа, выросшего на глюкозе и галактозе(достоверность различий определяли по критерию Манна-Уитни (Р<0,05)), и штамма со встроенным промотором в центромеру хромосомыIII, выросшим на глюкозе (достоверность различий определяли по критерию Вилкоксона (Р<0,05)..ПРИЛОЖЕНИЕ ТЧастота событий, учитываемых в тесте на "незаконную" гибридизацию, при использовании заблокированных на стадии G1 дрожжевыхкультурШтаммВоздействие(температураинкубации послескрещивания, дозаоблучения УФизлучением)wt22оCУФ 0wt22 оCУФ 17 Дж/м2wt37 оCУФ 0wt37 оCУФ 17 Дж/м2Общая частота"незаконной"гибридизации×10-7(медиана идоверительныйинтервал)Типы учитываемых нарушений, их (а) доля (%) и (б) частота ×10-7(медиана и доверительный интервал)Числопроверенных"незаконных"гибридова375 518322а4543 7047257 462б157 217135а31,5±4,112264891430 221833±4,1ба86б108 14993а48 73а42±4,124±3,6Реципрокнаярекомбинациямежду локусомМАТα и кассетойHMRaа0,4±0,004КонверсиякассетыHMRa влокус MATαа4,5±0,14а42±4,392 1267919,9±1,1баб1,3 1,91,2а3,2±0,0914 17 233,4±0,1502б20а29±3,8Мутации ивременныеповреждения влокусе MATα561б3896ПотеряправогоплечахромосомыIIIПотеряхромосомыIII716 248,7±0,3б1638аб776а37±4,2ба1910 2962825±3,4аб49 1358,9±3,9124а18±0,9б18 27905 1404ба145 2251±0,020,20,5 0,73,4±0,09б132 154 239аб11±0,52,2а5,2 7,94±0,12610б822 64б22 64 183б51 151 272б39 16б411 19сdc28-422 оCУФ 0сdc28-422 оCУФ 17 Дж/м2сdc28-437 оCУФ 0сdc28-437 оCУФ 17 Дж/м2а474 611 886507б163а893 1553 2475544б6,47,8 11326246ба59 128 163508210 30427,6±3,8аба34±4,1428 683баб1804,5±0,15282аб2,75,8 7,4а231 336б491 783б1 1,3 1,8бб36,5 8,4б540 860аа0,6±0,01б2,8аб3,6 5,2б46а29,4±588,8±453113 145аб1±0,020,6 1,3 1,66,6б80 12701,4±0,03а5,1±0,21,9 2,3 3,2а5,1±0,17158 22934,7±4310а16±126±3,8123а31,6±3,954±5,43,4 4,2 5,9а38±4,2б1±0,02814 230,6±0,010,04а8,4 12,20,05 0,070,6±0,01б0,4 0,8 1Примечание:Одинарным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты, учитываемых событий, при воздействии УФ излучением у штаммадикого типа или штамма с мутацией cdc28-4 при соответствующих температурах, по сравнению с частотой без воздействия УФ излученияпри этих же температурах (достоверность различий определяли по критерию Манна-Уитни (Р<0,05)).Двойным подчеркивание отмечено достоверное изменение соотношения доли классов генетических событий у штамма дикого типа илиштамма с мутацией cdc28-4 при воздействии УФ излучением по сравнению с соответствующей долей у штамма дикого типа или штамма смутацией cdc28-4 без воздействии УФ излучением при одинаковой температуре (достоверность различий определяли по z- критерию(Р<0,05)).ПРИЛОЖЕНИЕ УЧастота событий, учитываемых в тесте на "незаконную" цитодукции, при использовании заблокированных на стадии G1 дрожжевых культурШтаммВоздействие(температура инкубациипосле скрещивания, дозаоблучения УФизлучением)wt22оCУФ 0wt22 оCУФ 17 Дж/м2wt37 оCУФ 0wt37 оCУФ 17 Дж/м2сdc28-422 оCУФ 0Общая частота"незаконной"цитодукции×10-7(медиана идоверительныйинтервал)Типы учитываемых нарушений, их (а) доля (%) и (б) частота ×10-7(медиана и доверительный интервал)Числопроверенных"незаконных"цитодуктантовВременныеповреждения влокусе MATαфенотипцитодуктантовαа3,2 5,5 5,925318,5 24499бб0,23 0,9182б11,40,131,2 5,222615 24 39505а0,17 0,7аб0,21,1 4,698,2±2,3б1524 382,6аб3,3 4,30,05 0,2б0,1 0,441,2±0,020,20,3 0,5а0,04 0,05б0,18 0,24абб0,002аб0,0025 0,009аб0,02 0,070,2±0,0020,030,05 0,082,6±0,070,48 0,630,5±0,010,00090,00120,005а1,3±0,040,0020,02 0,0240,38а1,1±0,040,4±0,010,011±0,020,14аМутации влокусе MATαфенотипцитодуктантовn/m0,8±0,020,028,4±0,50,01бб0,8 0,923,1±6,2ааа17,6±0,90,04бМутации влокусе MATαфенотипцитодуктантовa*14,2±10,4б14,6 1987,6±6,2баб4,6 5,175,3±6,3а0,22,578,8±3,6а0,17а84,6±6,1а14,5Конверсия HMRaв локус MATαфенотипцитодуктантоваб2,7±0,10,004аб0,03 0,140,4±0,0050,060,1 0,15сdc28-422 оCУФ 17 Дж/м2сdc28-437 оCУФ 0сdc28-437 оCУФ 17 Дж/м2а4757 69527ба0,4 1 1,9177б7 1734144бб54 650,9 1,9б1,1±0,020,53а99±3,40,4а3а94,3±3,40,65 0,8аба0,4±0,0050,18б0,22 0,26а0,5±0,0100,0040,005 0,008б02,4 2,90,5±0,01а020,004 0,005 0,00899±2,23 6,9 174,2±0,1б1±0,020,030,06 0,1Примечание:Одинарным подчеркиванием отмечено достоверное изменение частоты, учитываемых событий, при воздействии УФ излучением у штаммадикого типа или штамма с мутацией cdc28-4 при соответствующих температурах, по сравнению с частотой без воздействия УФ излученияпри этих же температурах (достоверность различий определяли критерию Манна-Уитни (Р<0,05)).Пунктирным подчеркиванием отмечено достоверное изменение доли класса генетических событий после обработки УФ излучением притемпературе 37оС по сравнению с долей того же класса при температуре 22оС (достоверность различий определяли по z- критерию (Р<0,05))..

Характеристики

Список файлов диссертации