Диссертация (1141387), страница 27
Текст из файла (страница 27)
Раствор берут встандартную ампулу для ЯМР d=5 мм. Регистрировать спектр ЯМР1Н приследующих условиях: 90º импульс, смещение 5 м.д., развертка 15 м.д., 32 К точекна спектр, 32 повторения, задержка между импульсами 40 с.Определение содержания сапонинов проводят сравнением интегральнойинтенсивностиоткалиброванногопоостаточномусодержаниюпротонсодержащего изотопомера DMSO-d6, и сигналов сапонинов, описанных встатье Y.
Yayla et al. (2002 г.) (Рис 4). Условия регистрации спектра ЯМР1Нсапонинов образца должны быть такими же, как и для стандартного образца встатье. Спектр ЯМР 1Н СЭСЛ представлен в (Рис. 5).Рисунок 4. Результаты ЯМР 1Н сапонинов стиракса А, В, С и дезацилсапонин - Y.Yayla et al. (2002 г.)194Для сапонина В был выбран сигнал при 5.94 м.д., для сапонинов А и Свыбрана совокупность сигналов в области 5.70-5.8 м.д и 5.41 м.д. Сигналовдезацилсапонина, не перекрывающихся другими сигналами, не обнаружено.Для количественного определения измерют интегральную интенсивностьсигналов сапонинов стиракса. Процентное содержание каждого сапонина виспытуемом образце в пересчете на сухое вещество (X, % масс) вычисляют поформуле:X, % масс= 100 ∙ (S' /S'0) ∙ (M ∙ a0 /M0 ∙ a) ∙ [100/(100 – W)],S' –нормированноегдезначениеинтегральнойинтенсивностисигналазначениеинтегральнойинтенсивностисигналаопределяемого вещества;S'0 –нормированноестандарта;M – молекулярная масса определяемого вещества;M0 – молекулярная масса;a – навеска испытуемого образца;a0 – навеска вещества-стандарта;W – содержание влаги, %.Рисунок 5.
Спектр ЯМР 1Н сухого экстракта стиракса лекарственного195Упаковка, маркировкаи транспортирование. В соответствиистребованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственногорастительного сырья и лекарственных растительных препаратов».Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственногорастительного сырья и лекарственных растительных препаратов».Примечание.Реактивыиметодикиопределениячисловыхпоказателей,приведенные в настоящей фармакопейнойстатьепредприятия,описанывсоответствующих разделах ГФ XIII издания,вып.1, 2.Разработчики ФС:Доцент кафедры общейфармацевтической и биомедицинскойтехнологии РУДН, к.фарм.н., доцентС. Н.
СуслинаАспирант кафедры общейфармацевтической и биомедицинскойтехнологии РУДНЗина ХамамаДоцент кафедры общейфармацевтической и биомедицинскойтехнологии РУДН, к.фарм.н., доцентА. С. ХомикДоцент кафедры ботаники, физиологиирастений и агробиотехнологии РУДН,к.фарм.н., доцентВ. В. Вандышев196Приложение № 5Для служебного пользования. Экз. №__проектМИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯРОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГОСРЕДСТВАФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯСтиракса лекарственного экстракт сухой (СЭСЛ)Styrax officinalis L. еxtractum siccumФСВводится впервыеСрок введения установленс «_____» ________200__г.Срок действиядо «_____» _______200__г.Настоящая фармакопейная статья предприятия распространяется на сухойэкстракт из околоплодников стиракса лекарственного (СЭСЛ) для применения вкачестве лекарственного средства.ИЗДАНИЕ ОФИЦИАЛЬНОЕ197Стиракса лекарственного экстракт сухой, получаемый из околоплодниковдикорастущего многолетнего кустарника или невысокого дерева стираксалекарственного – Styrax officinalis L., сем.
стираксовых – Styracaceae, экстракциейспиртом с содержанием суммы тритерпеновых сапонинов не менее 28 %применяемый для производства лекарственных препаратов.ОписаниеПорошок сухого очищенного экстракта стиракса представляет собойаморфные частицы от светло-кремового до кремового цвета с серым оттенком, соспецифическим запахом (Рис 1.).Рисунок 1.
Внешние вид СЭСЛМикроскопические признаки СЭСЛФорма частиц СЭСЛ определяется с помощью СЭМ. Частицы сухогоэкстракта стиракса лекарственного имеют различные размеры и форму. Частицымногоугольные, с ломанными краями иногда удлиненные иногда округлые.Поверхность частиц – покрыта выступающими многогранными образованиями.Даже округлые частицы имеют очень неровную поверхность.Неровная поверхность частиц не позволяет им скользить относительно другдруга (Рис 2.).198Рисунок 2. Микрофотографии частиц порошка СЭСЛ под СЭМПодлинность1.
Тонкослойная хроматографияПриготовление растворов.Раствор стандартного образца (СО PQS). Около 0,05 г (точная навеска)стандартного образца Purified Quillaia Saponin HRS, EP standart растворяют в 2 млметанола, перемешивают. Срок годности раствора 10 сут.Испытуемый раствор. Около 0,6 г (точная навеска) сухого экстрактастиракса лекарственного (СЭСЛ) растворяют в 2 мл метанола, перемешивали втечение 1 мин, затем фильтровали. Срок годности раствора 10 сут.На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоемсиликагеля с флуоресцентным индикатором размером 10 × 20 см на алюминиевойподложке наносят 10 мкл испытуемого раствора (раствора сухого экстрактастиракса лекарственного в метаноле) и 10 мкл раствора стандартного образца (СО199PQS).
Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, ее помещают в камерупри температуре 20 °С со смесью растворителей: хлороформ-метанол-вода (6:3:1).Пластину вынимают из камеры после прохождения фронта растворителей 15 см,сушатвтечение5минут,затемопрыскиваютрастворомвзвесидефибринированной крови.На хроматограмме испытуемого раствора должно обнаруживаться зоныадсорбции белого цвета с Rf около 0,68 испытуемого раствора "сумма сапониновстиракса (ССС)" и Rf около 0,55 (сапонины СО PQS).2. 0,2 г СЭСЛ помещают в пробирку вместимость 20 мл, прибавляют 10 млводы, перемешивают и энергично встряхивают. Наблюдается образованиеобильной и устойчивой пены (сапонины).3. 0,2 г СЭСЛ переносят в две пробирки вместимость 20 мл. В одну изпробирок 2 мл воды и 8 мл раствора кислоты хлористоводородной 0,1Н, в другую2 мл воды и 8 мл раствора натрия гидроксида 0,1Н.
Обе пробирки интенсивновстряхивают в течение 1 мин. образуются пена, равная в обеих пробирках пообъему (тритерпеновые сапонины).4. 0,2 г СЭСЛ растворили в 5 мл изoтoнического рacтвoра нaтрия xлoридa,добавили полученный раствор к 1 мл взвecи дeфибринирoвaннoй крoви. Вконтрольную пробирку к 1 мл взвecи дeфибринирoвaннoй крoви добавили 5 млизoтoничecкого рacтвoра нaтрия xлoридa. В результате наблюдается образованиебелого опалесцирующего раствора «лаковая» крови, который через несколькоминут выпал в осадок в виде белых хлопьев. Надосадочная жидкость сталапрозрачной. В пробирке с контролем не наблюдалось изменений.5. К 0,2 г. СЭСЛ прибавляют 1 мл хлороформа и 5 капель концентрированнойсерной кислоты.
Появиться желтое окрашивание, постепенно переходящее в красноеокрашивание (тритерпеновые сапонины).Потеря в массе при высушивании. Не более 6,5 %. В соответствии с ОФС«Потеря в массе при высушивании».Тяжелые металлы. В соответствии с требованиями ОФС «Экстракты».200Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС«Микробиологическая чистота».Влажность СЭСЛ: составляет 6,5±0,8 %.растворимость СЭСЛРастворимость1.2.1.0005.15приСЭСЛопределяютсякомнатнойпотемпературе.методикеГФРезультатыXIII,ОФСрастворимостипредставлены в таб.
(1.).Таблица 1. – растворимость СЭСЛ при (20± 2)°C№опыта12345678910111213Растворитель /Система растворителейВода очищеннаяВода очищенная + ТЭАВода очищенная +трометамолВода очищенная +NaOHСпирт 95%МетанолГлицеринАцетонПропиленгликольДиметилсульфоксидПолиэтиленгликоль-400Хлороформн-бутанолПримерное количестворастворителя (мл),необходимое длярастворения 1 г вещества1:10001:101:101:101:1001:201:1251:201:2001:201:10001:2001:2000ОбозначениярастворимостиМало растворимРастворимРастворимРастворимУмернно растворимРастворимМало растворимРастворимМало растворимРастворимМало растворимМало растворимОчень мало растворимстепень сыпучести СЭСЛРезультаты технологических характеристик СЭСЛ представленные втаблице (2.).Таблица 2.
– Технологические характеристики порошка СЭСЛСыпучесть,Уголг/сНасыпнаяестественногомасса,Насадкамм±откоса,гград0,0110152500068±20,428±0,02Насыпнаяплотность,г/смЗ100,439±0,01500 0,575±0,01ИндексКарраКпр %25,64ИндексХауснера1,343201Регистрация УФ-спектрофотометрия СЭСЛ и СССОколо 0,010 г СЭСЛ помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл,растворяют в метаноле и доводят объем до метки (раствор А). Выделенную спомощью препаративной ТСХ ССС помещают в метанол последовательнофильтруют через целлюлозный, а затем через шприцевый фильтр CHROMAFILXtra PTFE (Тефлон) с размером пор 45 мкм (раствор Б).УФ-спектр раствора А и Б снимают на спектрофотометре АКВИЛОН СФ-102в кювете с толщиной слоя 1 см.
В качестве раствора сравнения используютметанол.УФ-спектрпоглощения0,1%метанольныхрастворовсапонинов,выделенных из стиракса лекарственного в области от 230 до 365 нм должен имеетмаксимум поглощения при длине волны 270 ± 1 нм и 315 ± 1 нм.Количественное определение. Содержание суммы сапонинов должно бытьне менее 28 %.К точной навеске 46,3 мг сухого экстракта стиракса лекарственного(СЭСЛ), добавляют 1 мл DMSO-d6, встряхивают в течение 1 минуты,центрифугироваться в течение 5 минут при 14000 об/мин. Раствор берут встандартную ампулу для ЯМР d=5 мм. Регистрировать спектр ЯМР1Н приследующих условиях: 90º импульс, смещение 5 м.д., развертка 15 м.д., 32 К точекна спектр, 32 повторения, задержка между импульсами 40 с.Определение содержания сапонинов проводят сравнением интегральнойинтенсивностиоткалиброванногопоостаточномусодержаниюпротонсодержащего изотопомера DMSO-d6, и сигналов сапонинов, описанных встатье Y.
Yayla et al. (2002 г.). Условия регистрации спектра ЯМР1Н сапониновобразца должны быть такими же, как и для стандартного образца в статье.Для сапонина В был выбран сигнал при 5.94 м.д., для сапонинов А и Свыбрана совокупность сигналов в области 5.70-5.8 м.д и 5.41 м.д. Сигналовдезацилсапонина, не перекрывающихся другими сигналами, не обнаружено.202Для количественного определения измерют интегральную интенсивностьсигналов сапонинов стиракса.
Процентное содержание каждого сапонина виспытуемом образце в пересчете на сухое вещество (X, % масс) вычисляют поформуле:X, % масс= 100 ∙ (S' /S'0) ∙ (M ∙ a0 /M0 ∙ a) ∙ [100/(100 – W)],S' –нормированноегдезначениеинтегральнойинтенсивностисигналазначениеинтегральнойинтенсивностисигналаопределяемого вещества;S'0 –нормированноестандарта;M – молекулярная масса определяемого вещества;M0 – молекулярная масса;a – навеска испытуемого образца;a0 – навеска вещества-стандарта;W – содержание влаги, %.Хранение. В защищенном от влаги и света месте при температуре от 15 до25 С.203Приложение № 6ПРОЕКТМИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВАФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯВагинальные пленки «ВСПЭС»ОФСВводится впервыеВагинальные пленки «ВСПЭС» твердые дозированные лекарственныеформы, которые быстро растворяются при контакте с вагинальной жидкостью,содержащие действующее вещество сухого экстракта стиракса лекарственного(СЭСЛ) и вспомогательные вещества, в том числе пленкообразующие ипластификаторы.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
