Диссертация (1141269), страница 12
Текст из файла (страница 12)
ЗанПКО методики принималась минимальная концентрация эналаприла и эналаприлата в плазме, для которой возможно их количественное определение созначениями RSD и ε не более 20 % в диапазоне линейной зависимости, а соотношение сигнал/шум составляло не менее 10/1. Нижний предел количественного определения методики составил 5 нг/мл как для эналаприла, так и для эналаприлатаБыла подтверждена стабильность для стандартных растворов эналаприлаи эналаприлата (при хранении раствора в течение 14 дней при температуре от2°С до 8оС), кратковременная стабильность (для приготовленных проб в течение 24 ч при анализе на следующий день при температуре 5оС) и долгосрочнаястабильность эналаприла и эналаприлата в матрице, хранившейся в условияхзаморозки, на уровнях концентраций 5,00 и 100,00 нг/мл. Образцы выдерживали 3 цикла замораживания-размораживания.
Площадь пика при повторных анализах не менялась более чем на 15 %.При последовательном анализе проб с концентрацией эналаприла и эналаприлата 100,00 нг/мл и интактной плазмы на хроматограмме интактной плазмы отсутствовали пики, соответствующие по времени удерживания эналаприлуи эналаприлату. Таким образом, перенос пробы отсутствовал.944.2.3. Применение разработанной методики определения атенолола,бисопролола, верапамила, метопролола, нифедипина, пропранолола иэналаприлаС помощью разработанной методики был проведён анализ образцовплазмы пациентов, госпитализированных с симптомами острых отравленийГЛС.
Результаты анализов представлены в таблице 27.Таблица 27.Концентрация ГЛС в плазме крови пациентов с острыми отравлениями№ пациентаОбнаружено ГЛС, нг/мл1Эналаприл, 11,372Нифедипин, 21,823Бисопролол, 61,504Бисопролол, 12,84Нифедипин, 13,215Атенолол, 16,03Нифедипин, 62,656Исходная проба – ГЛС не обнаруженыПовторно (на фоне инфузионной терапии) – бисопролол,49,747Верапамил, 42,378Бисопролол, 36,429Бисопролол, 39,5510Бисопролол, 10,2511Эналаприл, 33,17Ещё в 5 случаях исследуемые ГЛС в плазме обнаружены не были. Почастоте встречаемости острых отравлений и с учётом отсутствия информации отоксических концентрациях данного вещества и наблюдаемой непредсказуемойтоксикокинетикой (пациент №6) самым опасным ГЛС оказался бисопролол.
В95случае пациента №6, вероятно, при повторном анализе наблюдается постепенное высвобождение бисопролола из депо.В всех исследованных образцах содержание ГЛС оказалось ниже приведенных в литературе значений токсических концентраций. Данное наблюдениеможно объяснить индивидуальными особенностями фармакокинетики, фармакодинамики и токсикокинетики ГЛС у пациентовПроба плазмы пациента №11 была затем исследована на содержание эналаприлата.Применение4.2.4.разработаннойметодикиопределенияэналаприла и эналаприлатаРазработанная методика была применена для определения концентрацийэналаприла и эналаприлата в плазме крови пациентов, проходивших лечение вЦентре персонализированной медицины (ЦПМ) ГКБ им.
И.В. Давыдовского ипринимавших лекарственный препарат Энап, таблетки 2,5 мг. Полученные данные приведены в таблице 28, типичные хроматограммы представлены на рисунках 26 и 27.Таблица 28.Индивидуальные концентрации эналаприла и его активного метаболита эналаприлата в плазме крови пациентов до и через 4 часа после приема лекарственного препарата Энап, таблетки 2.5 мг.№ паци- Концентрация в плазме до Концентрация в плазме через 4ентаприема Энапа, нг/млчаса после приема Энапа, нг/млЭналаприлЭналаприлат ЭналаприлЭналаприлат1.-ниже нПКОниже нПКО41,9742.ниже нПКО11,9155,13421,5043.-7,957ниже нПКО23,6924.ниже нПКО7,875ниже нПКО8,7575.-7,116ниже нПКО17,9706.ниже нПКО33,26415,90224,75096Рисунок 26. Хроматограмма пробы плазмы крови пациента до приема лекарственного препарата Энап.Рисунок 27.
Хроматограмма пробы плазмы крови пациента через 4 часа после приема лекарственного препарата Энап.97Часть пациентов принимала Энап постоянно ещё до поступления в ЦПМ,что объясняет обнаружение эналаприлата и эналаприла в пробах, отобранныхперед приёмом препарата в клинике.Индивидуальные значения и соотношение концентраций эналаприла иэналаприлата у пациентов через 4 часа после приёма Энапа демонстрируютразличия в скорости метаболизма эналаприла и являются ценной информациейдля лечащего врача при выборе оптимальной дозы и кратности приёма препарата. В некоторых случаях слишком быстрый или слишком медленный метаболизм может оказаться причиной неэффективности антигипертензивной терапиии поводом для отмены приёма Энапа.Также разработанная методика позволила определить концентрацию эналаприлата у пациента, госпитализированного с признаками острого отравленияэналаприлом. Концентрация эналаприлата в плазме крови пациента №11 составила 98,36 нг/мл.98ОБЩИЕ ВЫВОДЫ1.
Анализ статистики острых отравлений показал, что наибольшую токсикологическую значимость имеют атенолол, бисопролол, верапамил,метопролол, нифедипин, пропранолол и эналаприл. Для скринингапри острых отравлениях данными веществами целесообразно использовать хроматографические методы анализа (ТСХ, ГХ-МС), для подтверждающего анализа и количественного определения оптимальнымметодом является ВЭЖХ-МС/МС.2.
Для предварительной групповой идентификации изучаемых веществв моче пациентов, госпитализированных с симптомами острых отравлений гипотензивными лекарственными средствами, разработанаскрининговая методика с использованием ТСХ. Установлено, что дляразделения нейтральных и слабоосновных гипотензивных лекарственных веществ (атенолол, верапамил, пропранолол, нифедипин) оптимальной является система растворителей этилацетат - этанол конц. раствор аммиака (10:30:1), для слабых кислот (эналаприл) хлороформ - ацетон - ледяная уксусная кислота (10:2:2).
Наибольшая селективность при детектировании достигнута при использовании реактива Либермана.3. Разработана методика скрининга гипотензивных лекарственных веществ в моче человека методом газовой хроматографии с массспектрометрическим детектированием (ГХ-МС). Составлены библиотеки времен удерживания и масс-спектров для идентификации анализируемых соединений и их производных при анализе по разработанной методике.
Изучены особенности термодеструкции и образованияформилированных производных (артефактов) атенолола, бисопролола, метопролола, пропранолола, окисления нифедипина, и внутримолекулярной дегидратации эналаприла в разработанных условиях анализа методом ГХ.994. Разработана и валидирована методика одновременного количественного определения гипотензивных лекарственных веществ в плазмекрови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии стандемныммасс-спектрометрическимдетектированием(ВЭЖХ-МС/МС). Аналитический диапазон методики составил 9,80 – 4900,00нг/мл для атенолола, 7,61 – 3803,80 нг/мл для метопролола, 8,45 –4225,20 нг/мл для бисопролола, 9,14 – 4570,90 нг/мл для пропранолола, 7,73 – 3862,50 нг/мл для эналаприла, 9,54 – 2385,10 нг/мл для верапамила, 9,61 – 4806,90 нг/мл для нифедипина. Также разработана ивалидирована методика одновременного количественного определения эналаприла и эналаприлата в плазме крови в диапазоне 5 – 100нг/мл.5.
Разработанные методики применены для скрининга гипотензивныхлекарственных веществ в моче больных, а также для количественногоопределения атенолола, бисопролола, верапамила, метопролола, нифедипина, пропранолола и эналаприла в плазме крови больных, госпитализированных с симптомами острых отравлений гипотензивными лекарственными средствами.6. Разработанная методика одновременного количественного определения эналаприла и эналаприлата в плазме крови человека примененадля терапевтического лекарственного мониторинга и индивидуального подбора дозы эналаприла с целью оптимизации фармакотерапии.100СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ1.Российский статистический ежегодник.
2014: Стат.сб. М.: Росстат, 2014.693 с.2.GLOBAL STATUS REPORT on noncommunicable diseases 2014. WorldHealth Organization [Электронный ресурс] // http://www.who.int/en/: [сайт].[2015]. URL: http://www.who.int/nmh/publications/ncd-status-report-2014/en/(дата обращения: 11.октябрь.2015).3.Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9ноября 2012 г. N 708н "Об утверждении стандарта первичной медикосанитарнойпомощиприпервичнойартериальнойгипертензии(гипертонической болезни)".4.Mancia , Fagard , Narkiewicz , et al.
2013 ESH/ESC Guidelines for themanagement of arterial hypertension. The Task Force for the management ofarterial hypertension of the European Society of Hypertension (ESH) and of theEuropean Society of Cardiology (ESC) // European Heart Journal, Vol. 34,2013. pp. 2159–2219.5.Распоряжение Правительства РФ от 30 декабря 2014 г. N 2782-р Обутвержденииперечняжизненнонеобходимыхиважнейшихлекарственных препаратов для медицинского применения на 2015 г.6.Медицинская токсикология: национальное руководство / под ред. Е. А.Лужникова.
М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. 928 с.7.Mowry JB, Spyker DA, Cantilena LR Jr, McMillan N, Ford M. 2013 AnnualReport of the American Association of Poison Control Centers ’ NationalPoison Data System (NPDS): 31st Annual Report // Clin Toxicol (Phila), No.52 (10), 2014. pp. 1032-1283.8.КукесВ.Г.,СтародубцевА.К.Клиническаяфармакотерапия. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006. 640 с.фармакологияи9.101Khan M.G. Cardiac Drug Therapy. Humana Press, 2015. 791 pp.10. Майский В.В. Фармакология.
Учебное пособие для вузов. М.: ГЭОТАРМедиа, 2001. 231 с.11. Godfraind T. Calcium Channel Blockers. Basel: Springer Basel AG, 2004. 262pp.12. ПостановлениеПравительстваРФот29.10.2010N865"Огосударственном регулировании цен на лекарственные препараты,включенныевпереченьжизненнонеобходимыхиважнейшихЕ.М.Отравлениялекарственных препаратов".13. ЛагуткинаТ.П.,АксеноваП.Н.,Саломатинлекарственными средствами как индикатор социальной напряженности исоциального неблагополучия // Судебно-медицинская экспертиза, Т. 54,№ 4, 2011.
С. 23-26.14. Белова М.В., Ильяшенко К.К. Острые отравления кардиотоксическимипрепаратами по данным Московского городского токсикологическогоцентра за период 2010-2014 гг. // Здоровье столицы-2015: тез. докл. ХIVМоск. ассамблеи, 19-20 нояб. 2015 г. М. 2015. С. 209-210.15. Слюндин Д. Г., Ливанов А. С., Анучин В.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
