Автореферат (1139724), страница 5
Текст из файла (страница 5)
Gmel.,E. vulgare L.,Onosmaarmeniaca Klok. ex M. Pop., O. caucasica Levin ex M. Pop., O. sericea Willd. качественной реакцией с раствором натрия гидроксида 5 %, микросублимацией иТСХ. Результаты количественного определения в ЛРС суммы нафтохинонов впересчёте на шиконин методом спектрофотометрии представлены в таблице 3.Таблица 3 – Содержание суммы нафтохинонов в пересчёте на шиконин вкорнях родов Echium и OnosmaКорниСодержание нафтохинонов в пересчёте на шиконин, %E. plantagineum0,060 ± 0,002; ε = ± 3,74 %E. russicum1,42 ± 0,038; ε = ± 2,64 %E. vulgare0,20 ± 0,008; ε = ± 3,92 %O.
armeniaca0,10 ± 0,004; ε = ± 4,36 %O. caucasica0,14 ± 0,006; ε = ± 3,95 %O. sericea0,12 ± 0,005; ε = ± 4,16 %23Как следует из данных, представленных в таблице 3, наибольшее содержание суммы нафтохинонов установлено в корнях Echium russicum.Более глубокое фармакогностическое изучение последнего позволилоразработать для нового в медицинской практике ЛРС проект ФС «Синяка русского корни» и Инструкцию по их сбору и сушке, которые прошли экспертнуюоценку и утверждены в ФГБНУ ВИЛАР (г. Москва).При составлении раздела «Подлинность» проекта ФС «Синяка русскогокорни» использованы выявленные внешние и микроскопические диагностические признаки цельного, измельчённого ЛРС и порошка.
Для разработки нормкачества раздела «Испытания» проекта ФС «Синяка русского корни» анализировали образцы цельного, измельчённого ЛРС и порошка. В разделе «Опред еление основных групп биологически активных веществ» предлагаются методики определения нафтохинонов в корнях синяка русского с помощью качественной реакции, ТСХ и спектрофотометрии. Методика анализа, выбранная на основании экспериментальных данных, позволяет получить одно извлечение изЛРС для проведения качественного и количественного определения нафтохинонов (производных шиконина).
В раздел «Количественное определение»включена методика спектрофотометрического анализа суммы нафтохинонов впересчёте на шиконин.Определение норм для прочих разделов проекта ФС проводилось согласно требованиям соответствующих ОФС ГФ XIII. Данные по некоторым показателям качества синяка русского корней цельных, полученные экспериментально, представлены в таблице 4.Таблица 4 – Результаты анализа некоторых показателей качества синяка русского корней (цельное сырьё)Показатель и нормаВлажность, %Зола общая, %Зола не растворимая врастворе хлористоводородной кислоты, %Измельчённость сырья:частицы, проходящиесквозь сито с отверстиями размером 3 мм, %Посторонние примеси:другие части растения,не соответствующие ус-Номер партии сырья1234569,04±0,17 7,83±0,22 7,91±0,15 8,30±0,10 8,20±0,26 8,21±0,185,71±0,11 5,41±0,29 4,09±0,08 5,54±0,19 5,55±0,21 5,82±0,130,83±0,04 0,20±0,01 0,53±0,02 1,05±0,01 1,21±0,03 1,10±0,043,82±0,10 3,73±0,20 4,10±0,21 3,81±0,14 3,55±0,12 4,03±0,111,26±0,01 1,14±0,01 1,31±0,01 1,20±0,02 1,38±0,02 1,27±0,0124Показатель и норматановленному описаниюсырья, %побуревшие и почерневшие части корней, %органическая примесь,%минеральная примесь, %Количественное определение: содержание суммы нафтохинонов в пересчёте на шиконин, %12Номер партии сырья34561,28±0,05 2,33±0,06 2,48±0,05 2,77±0,05 1,12±0,06 1,74±0,040,73±0,11 0,71±0,09 0,68±0,12 0,20±0,15 0,34±0,15 0,66±0,080,65±0,07 0,18±0,01 0,48±0,01 0,74±0,04 0,83±0,07 0,87±0,011,42±0,04 1,95±0,05 1,62±0,07 1,63±0,08 1,44±0,05 2,07±0,08Исходя из полученных экспериментальных данных, в проекте ФС «Синяка русского корни» в разделе «Количественное определение» нормирование с одержания суммы нафтохинонов для цельного, измельчённого сырья и порошкаустановлено как «не менее 1,0 % в пересчёте на шиконин».По аналогии с видами рода Echium проводили сравнительное фармакогностическое исследование с точки зрения подлинности и химического составаранее не изучавшегося ЛРС северокавказских видов рода Onosmaсем.
Boraginaceae, используемых в фитотерапии воспалительных гинекологических заболеваний.Для определения основных групп БАВ малоизученного ЛРС – травы видов рода Onosma – получали разными растворителями фракции, результатыанализа которых с помощью качественных реакций, ТСХ и УФ-спектрофотометрии представлены в таблице 5.Таблица 5 – Результаты качественного анализа фракций, выделенных изтравы видов рода OnosmaТраваO.
armeniacaO. caucasicaФракцииГруппы БАВХХлорофилл, каротиноиды, алкалоиды, нафтохиноны (следы)Э-95Дубильные вещества, сапонины, алкалоидыЭ-70Дубильные вещества, флавоноиды, фенолкарбоновые кислотыДубильные вещества, флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты,Э-40сапониныВПолисахаридыХХлорофилл, каротиноиды, алкалоиды, нафтохиноны (следы)Э-95Э-70Э-40ВДубильные вещества, сапонины, алкалоидыДубильные вещества, флавоноиды, фенолкарбоновые кислотыДубильные вещества, флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты,сапониныПолисахариды25ТраваФракцииГруппы БАВХЭ-95Э-70Хлорофилл, алкалоиды, каротиноидыДубильные вещества, сапонины, алкалоидыДубильные вещества, флавоноиды, фенолкарбоновые кислотыO. sericeaДубильные вещества, флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты,Э-40сапониныВПолисахаридыПримечание: Х – хлороформ, Э-95, Э-70, Э-40 – этанол 95 %, 70 %, 40 % соответственно,В - вода очищеннаяСравнительный фитохимический анализ показал, что содержание нафтохинонов – производных шиконина в траве видов рода Onosma ниже пределаобнаружения.
Однако выявлены другие БАВ (флавоноиды, фенолкарбоновыекислоты, дубильные вещества), некоторые из них впервые.Методом ВЭЖХ в извлечениях этанолом 70 % из травы O. caucasica обнаружено 18 соединений, идентифицированы лютеолин-7-глюкозид, впервые –хлорогеновая кислота, эллаговая кислота, скополетин, мирицетин; из травыO. sericea – 12 соединений, (впервые – лютеолин-7-глюкозид, вератровая кислота, мирицетин), из травы O. armeniaca – 7 соединений (впервые – лютеолин7-глюкозид).
Результаты количественного определения суммы дубильных веществ в пересчёте на танин и суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин-7O-глюкозид представлены в таблице 6.Таблица 6 – Содержание некоторых БАВ в траве OnosmaТраваСумма дубильных веществ, %Сумма флавоноидов, %O. armeniaca1,95 ± 0,04; = ± 1,86 %0,39 ± 0,01; = ± 2,47 %O. caucasica2,91 ± 0,07; = ± 2,36 %0,42 ± 0,01; = ± 2,91 %O. sericea5,45 ± 0,09; = ± 1,60 %0,52 ± 0,02; = ± 2,07 %Таким образом, наибольшее содержание флавоноидов и дубильных веществ обнаружено в траве O. sericea.Стандартизация ЛРС видов рода Juglans сем.
JuglandaceaeИзучение новых видов ЛРС представителей рода Juglans проводили всравнении с сырьем, заготовленным от J. regia, хорошо известным как содержащее значительное количество нафтохинонов производных юглона, но неприменяемым в официнальной медицине. Выявленные внешние и микроскопические диагностические признаки (например, строение трихом и кристаллов26оксалата кальция) позволяют различать ЛРС видов рода Juglans между собой(рисунок 5).1 – простые одноклеточные волоски, 2 – головчатые волоски, 3 – желёзки,4 - друзы.
Цена деления микролинейки 0,01 мм.Рисунок 5 – Трихомы и включения листа Juglans nigra (А), J. cinerea (Б),J. regia (В)Биометрические характеристики анатомо-диагностических признаковЛРС видов рода Juglans представлены в таблице 7.27Таблица 7 – Биометрические характеристики анатомо-диагностическихпризнаков ЛРС видов рода Juglans (мкм)ПризнакКлетки перидермыКлетки паренхимыКаменистые клеткиТолщина слоя пробкиДиаметр лубяных волоконДиаметр друзКлетки верхней эпидермыКлетки нижней эпидермыУстьицаВолоски пучковыенежелезистыеВолоски железистые с 4клеточной головкой и ножкой2-клеточнойВолоски железистые с 4клеточной головкой и6-клеточной ножкойДиаметр желёзкиДиаметр друз оксалата кальцияПризматические кристаллыоксалата кальцияJ.
regiaдлина ширинаКора20-305-1020-4010-2030-4015-3060-9010-1520-25Листья40-5020-3040-5020-3030-3520-2513010-15180ножка20-25,20-35головка20-35-60-8040-60J. nigraдлинаширинаJ. cinereaдлина ширина20-3020-4030-5020-305-1025-4010-2030-9030-4060-9010-1520-255-1010-2030-4060-9015-2010-2030-6030-6030-3530-4030-4020-2535-5035-5030-3515-3015-3020-25250-55010-15100-20010-1520-35ножка20-25,головка20-35--ножка20-25,20-35головка30-65волосокножка150-180,15-25,ножкаголовка120-15030-6060-7020-2540-5040-5010-2020-3030-3590-110Плоды15-3015-3030-4020-3025-30120-180Волосок железистый с 4клеточной головкой и 2клеточной ножкой––Волосок железистый с 4клеточной головкой и 6клеточной ножкой––80-12040-7040-6030-40Клетки эпидермыУстьицеВолосок простойКлетки мезофиллаКаменистые клеткиДиаметр желёзкиДиаметр друз–20-2510-2010-2020-2520-30ножка 1520,40-45головка30-40ножка 1525,110-130головка30-4530-6070-11040-10030-4070-9015-2050-7030-50----------28Таким образом, к анатомо-диагностическим микроскопическим признакам коры видов рода Juglans относятся наличие лубяных волокон с кристаллоносной обкладкой, каменистых клеток, друз оксалата кальция; листьев – строение трихом и кристаллов оксалата кальция; плодов – строение трихом, наличиев мезофилле каменистых клеток, крахмальных зёрен и друз оксалата кальция.При морфолого-анатомическом анализе ЛРС видов рода Juglans локализация нафтохинонов не определена.В результате сравнительного фитохимического анализа в исследуемыхвидах ЛРС установлены основные группы БАВ, среди которых преобладаютнафтохиноны, флавоноиды и дубильные вещества.
По их содержанию ЛРС, заготовленное от J. cinerea и J. nigra, не только не уступает J. regia, но и в случаеJ. nigra существенно превосходит (таблица 8).Таблица 8 – Содержание суммы нафтохинонов (в пересчёте на юглон) исуммы дубильных веществ в пересчёте на танин в ЛРС видов рода JuglansСодержание суммынафтохинонов, %Содержаниедубильных веществ, %кора0,058 ± 0,002; ε = ± 4,10 %5,28 ± 0,05; ε = ± 1,01 %листья0,032 ± 0,001; ε = ± 4,34 %3,25 ± 0,06; ε = ± 1,89 %кора0,11 ± 0,005; ε = ± 4,78 %7,39 ± 0,08; ε = ± 1,02 %листья0,24 ± 0,009; ε = ± 3,91 %8,67 ± 0,20; ε = ± 2,25 %плоды высушенные0,19 ± 0,008; ε = ± 4,19 %8,75 ± 0,18; ε = ± 2,07 %плоды свежие0,028 ± 0,001; ε = ± 2,37 %8,21 ± 0,10; ε = ± 1,18 %кора0,038 ± 0,002; ε = ± 4,62 %4,79 ± 0,05; ε = ± 1,13 %листья0,083 ± 0,002; ε = ± 2,02 %2,43 ± 0,05; ε = ± 2,01 %плоды высушенные0,069 ± 0,003; ε = ± 4,02 %3,48 ± 0,07; ε = ± 2,05 %0,0058 ± 0,0001; ε = ± 1,91 %2,98 ± 0,05; ε = ± 1,66 %ЛРСJ.
cinereaJ. nigraJ. regiaплоды свежиеКак следует из данных, представленных в таблице 8, максимальное содержание нафтохинонов зафиксировано в листьях J. nigra (0,24 ± 0,009 %).Впервые идентифицированы методом ВЭЖХ в листьях J. regia розмариновая кислота, мирицетин, плодах – эскулетин, вератровая кислота, розмариновая кислота, бензойная кислота, листьях J. nigra – гентизиновая и вератроваякислоты, а также умбеллиферон.Методом газовой хроматографии/масс-спектрометрии установлено, что вэфирном масле листьев видов рода Juglans содержатся моноциклические и бициклические терпены, сесквитерпены, ациклические и ароматические соедине-29ния. Доминирующими компонентами для листьев J. cinerea являются кариофиллен оксид 14,31 %, α-куркумен 8,13 %, спатуленол 7,25 %, J. regia – эвгенол23,02 %, кариофиллен оксид 14,31 %, β-эвдесмол 6,52 %, J.