Диссертация (1139549), страница 5
Текст из файла (страница 5)
ПЦРдиагностика осуществляется путём многократно повторяющихся цикловсинтеза (амплификации) специфической области ДНК-мишени в присутствиитермостабильной ДНК-полимеразы, дезоксинуклеозидтрифосфатов (дНТФ),соответствующего солевого буфера и олигонуклеотидных затравок – праймеров,которые определяют границы амплифицируемого участка репликации. Каждыйцикл состоит из трех стадий с различными температурными режимами. На24первой стадии при 94°С происходит разделение ДНК, затем при 54-58°Сприсоединение (отжиг) праймеров к гомологичным последовательностям наДНК-мишени, и при температуре 72°С протекает синтез новых цепей ДНКпутем удлинения праймера в направлении 5'-3'. В каждом цикле происходитудвоение числа копий амплифицируемого участка, что позволяет за 25-40циклов наработать ДНК, соответствующую размеру этого участка, в количестве,достаточном для ее определения с помощью электрофореза.
Метод имеетбольшуюдиагностическуюзначимостьипозволяетидентифицироватьотдельные типы ВПЧ [78].При идентификации ВПЧ с помощью метода гибридного поглощенияпроисходит ДНК-гибридизация в растворе с последующей сорбцией наполистероловой планшете [122]. Применение данного метода позволилоопределить более 200 генотипов ВПЧ, но перспективным для практическойработы является идентификация с помощью метода гибридного поглощенияВПЧ ДНК-типов высокого и низкого онкогенного риска, поражающихгенитальный тракт [142].Применение молекулярно-биологических методов для идентификацииВПЧ рекомендовано РОДВК [81], РОАГ [50] и CDC [150].
В то же время,согласно рекомендациям IUSTI [162], при аногенитальных бородавках ДНКтипирование не представляет информации, значимой для клиническогоиспользования, поэтому является нецелесообразным.Значимойявляетсядифференциальнаядиагностикааногенитальныхбородавок с клиническими проявлениями сифилиса и кожными болезнями(контагиозным моллюском, фиброэпителиальной папилломой и себорейнымкератозом) [81]. У мужчин остроконечные кондиломы также дифференцируют с«папулезным ожерельем» полового члена в виде 1-3 рядов отдельныхнесливающихся папул диаметром 1-2 мм, расположенных по окружности венцаголовки полового члена и/или симметрично около уздечки крайней плоти.
Уженщин проводится дифференциальная диагностика аногенитальных бородавокс микропапилломатозом вульвы, который представляет собой несливающиеся25папулы правильной формы, расположенные симметрично на внутреннейповерхности малых половых губ и в области преддверия влагалища, исчитается вариантом нормы [81, 201].Основным направлением лечения аногенитальных бородавок является ихдеструкция.
Клиническими рекомендациями РОДВК [81], CDC [128], IUSTI[162] и BASHH [129] предусмотрены следующие методы деструкциианогенитальных бородавок: цитотоксические методы (подофиллотоксин, крем 0,15%, раствор0,5% 2 раза в сутки наружно на область высыпаний в течение 3 днейс 4-хдневным интервалом); химические методы (комбинация азотной, уксусной, щавелевой,молочной кислот и тригидрата нитрата меди, раствор длянаружного применения); иммуномодуляторы для местного применения (имиквимод наружнона поражённые участки 3 раза в неделю до полного исчезновениякондилом, но не более 16 недель или внутриочаговое введениепрепаратов α-интреферона); физические методы (электрокоагуляция, лазерная деструкция,радиохирургическая деструкция, криодеструкция); хирургическое иссечение.Подофиллотоксин в лекарственной форме 0,15% крема рекомендуетсяприменять в терапии аногенитальных бородавок, расположенных в анальнойобласти и области вульвы.
Раствор 0,5% рекомендуется применять в терапиианогенитальных бородавок, расположенных на коже полового члена. Курсовоелечение продолжают до исчезновения клинических проявлений, но не более 4-5курсов.Подофиллотоксиннерекомендуетсяприменятьвтерапиианогенитальных бородавок, расположенных на слизистой оболочке прямойкишки, влагалища, шейки матки, уретры [43, 159, 186].Комбинация азотной, уксусной, щавелевой, молочной кислот и тригидратанитрата меди в лекарственной форме раствора для наружного применения26наносится однократно непосредственно на аногенитальные бородавки припомощи стеклянного капилляра или пластмассового шпателя, не затрагиваяздоровых тканей.
Не рекомендуется обрабатывать поверхность, превышающую4-5 см2, перерыв между процедурами составляет 1-4 недели [149].Крем имихимод наносят тонким слоем на пораженные участки кожи наночь (на 6-8 часов) 3 раза в неделю (через день). Утром крем смывают с кожитеплой водой с мылом. Курс лечения продолжают до полного исчезновениякондилом, но не более 16 недель [33, 147].Прииспользованииэлектрокоагуляциидеструкцияаногенитальныхбородавок осуществляется вследствие воздействия на них электрического тока[187].
Лазерная деструкция – это метод удаления остроконечных кондилом засчёт подвергания её тканей действию излучения хирургического лазера,разрушающего ткань кондиломы [200]. При радиохирургической деструкциирассечение тканей бородавок выполняется при помощи узконаправленныхвысокочастотных радиоволн [85]. В основе криодеструкции кондилом лежитразрушение кондилом при воздействии низких температур [187]. Прихирургическом иссечении удаление бородавок осуществляется при помощискальпеля [51].При рецидивирующем течении заболевания может быть рекомендованоприменение системных иммуномодулирующих средств [25, 81, 82, 90].Иммуномодулятор иммуномакс представляет собой лекарственное средстворастительногопроисхождениядляпарентеральногоприменения.Иммунофармакологические механизмы действия препарата состоят в том, чтоонактивируетNK-клетки,циркулирующиемоноциты,нейтрофильныегранулоциты, тканевые макрофаги и образование антител против чужеродныхантигенов.
Курс лечения – 6 внутримышечных инъекций по 200 ЕД препарата в1, 2, 3, 8, 9, 10 дни лечения (курсовая доза 1200 ЕД). Для леченияаногенитальных бородавок курс из 6 инъекций сочетают с деструкциейкондилом одним их общепринятых методов [10, 36].271.1.3 Хламидийная инфекция урогенитального трактаХламидийная инфекция является одной из наиболее распространённыхИППП[8,52,96]ихарактеризуетсямногоочаговымипоражениямимочеполовой системы и их последствиями, оказывающими существенноевлияние на репродуктивное здоровье пациентов. Урогенитальный хламидиозможет протекать бессимптомно, часто хронизируется и рецидивирует, чтоспособствует широкому распространению хламидийной инфекции [7].
Наличиехламидиоза нередко приводит к воспалительным заболеваниям органов малоготаза (ВЗОМТ), внематочной беременности и бесплодию [173, 182].Ежегодно в мире регистрируется около 90 млн. новых случаев хламидиоза[49], в России – свыше 1,5 млн. [43]. Хламидийная инфекция урогенитальноготракта характеризуется неуклонным ростом заболеваемости.
Так, по даннымCDC[128],впериодс1991по2011годыколичествоновыхзарегистрированных случаев хламидиоза в США возросло в 2,5 раза (со 179,7до 457,6 на 100 тыс. населения). Инфекция наиболее распространена среди лицмолодого возраста, которые живут активной половой жизнью.
По сведениямНациональной программы скрининга хламидиоза Великобритании, 10%мужчин и женщин в возрасте до 25 лет инфицированы хламидиями [183].Markos A.R. установлено, что частота передачи хламидийной инфекции отинфицированного партнера при сексуальном контакте превышает 75% [167].Большую эпидемиологическую значимость имеет асимптомное течениезаболевания,хламидийнойнаблюдающеесяинфекциипо[173].даннымЧастотаразныхавторовинфицированияв49-93%хламидиямибеременных составляет 10-40% [94, 182], при отягощённом гинекологическоманамнезе возрастает до 63% [43], что оказывает влияние на внутриутробноеразвитие плода, исход родов и течение послеродового периода.
У 40-60% детей,родившихсяотматерей,клиническиеформыстрадающиххламидийнойхламидиозом,инфекции:диагностируютконъюнктивит,ринит,назофарингит, пневмонию [182]. Длительно персистирующая хламидийнаяинфекция в 17 раз повышает риск развития рака шейки матки [75, 76].28Ежегодный мировой экономический ущерб от осложнений хламидийнойинфекции неизвестен из-за неопределённой инцидентности и превалентности,однакоимеющиесяданныеотражаютсущественнуюэкономическуюзначимость заболевания: ежегодная стоимость лечения осложнений хламидиозав Великобритании составляет не менее 110 млн.
евро в год, в США – 1-3 млрд.долларов [166].Самой частой клинической формой урогенитального хламидиоза у женщинявляется хламидийный цервицит, который у большинства (до 80%) пациентокпротекаетбессимптомно[187].Прицервицитахразличнойэтиологиихламидийная инфекция выявляется в 1040 случаях на 100 тыс. (примерно у 15%женщин) [100].Возбудитель хламидиоза Chlamidia trachomatis – это грамотрицательныеоблигатные внутриклеточные паразиты размером 250-1500 нм [69, 76]. Отвирусов хламидии отличаются наличием как ДНК, так и рибосом, они имеютцитоплазматическую мембрану и клеточную стенку. Рибосомы хламидий схожис рибосомами других грамотрицательных бактерий, однако в отличие отпоследниххламидииподобновирусамириккетсиямнеспособнысамостоятельно синтезировать высокоэнергетические соединения (АТФ), у нихотсутствуют цитохромы, поэтому метаболизм хламидий обеспечиваетсяпреимущественно за счёт метаболизма клеток хозяина и они не способны квнеклеточному размножению [145].Клеточная стенка хламидий состоит из двойных внутренних и наружныхмембран (рис.
1). Антигенные свойства хламидий определяются внутреннеймембраной, представленной липополисахаридами, в которые интегрированыбелки наружной мембраны (Outer Membrane Proteins, OMP). Антигеннаяструктура включает основной белок наружной мембраны Major Outer MembraneProtein (MOMP), на который приходится 60% общего количества белка, ибелками наружной мембраны второго типа (ОМР-2) [116, 144].29ЛПСНаружнаямембранаВнутренняямембранаРис. 1. Структура клеточной стенки хламидий [144]Цикл развития хламидий включает две формы, отличающиеся поморфологическим и биологическим свойствам: элементарные тельца (ЭТ) иретикулярные тельца (РТ).ЭТ – мелкие шаровидные структуры размером 200-500 нм, имеющиекомпактный нуклеотид и ригидную трехслойную клеточную стенку. Ониявляются инфекционной формой хламидий и окрашиваются по РомановскомуГимзе в розовато-фиолетовый цвет. В ЭТ содержится большое количестводисульфидных связей, за счёт которых они могут противостоять осмотическомудавлению [69,76].
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
