Главная » Просмотр файлов » Biokhimia_T3_Strayer_L_1984

Biokhimia_T3_Strayer_L_1984 (1123304), страница 29

Файл №1123304 Biokhimia_T3_Strayer_L_1984 (Л. Страйер - Биохимия в 3-х томах) 29 страницаBiokhimia_T3_Strayer_L_1984 (1123304) страница 292019-05-10СтудИзба
Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 29)

Например, рифампицин - мощный ингибиторинициации синтеза РНК (разд. 25.18). Известно много антибиотиков, ингибирующих синтез белка (табл. 27.3). В случаенекоторых из них установлен и механизм действия. Стрептомицин - сильно основной трисахарид - препятствует связыванию формилметионил-тРНК с рибосомамии нарушает таким образом правильнуюинициацию белкового синтеза. Кроме того,стрептомицинвызываетнеправильноесчитывание мРНК. Если в качестве матрицы используется poly(U), то наряду с включением фенилаланина (UUU) происходитвключение изолейцина (AUU). Место действия стрептомицина в рибосоме былоопределено в результате опытов по реконструкции компонентов рибосом из чув27.

Синтез белка105Рис. 27.23.Стадия элонгации синтеза белка: связывание аминоацилтРНК, образование пептиднойсвязи и транслокация.ствительных и устойчивых к стрептомицину бактерий. Такие штаммы бактерийразличаются мутацией в единственномгене. Чем же различаются эти рибосомы?Поскольку рибосомы можно диссоциировать и реконструировать in vitro, представлялась возможность выяснить, где расположендетерминантчувствительностик стрептомицину - в 50S- или 30S-субчастице. Гибридные рибосомы из 50S-субчастицустойчивых бактерий и 30S-субчастиц чувствительных бактерий оказались чувствительными к стрептомицину, а рибосомы, полученные из субчастиц в обратной комбинации, устойчивы к нему.

Этот экспериментпоказал, что детерминант чувствительности к стрептомицину локализован в 30S-суб106Часть IV.ИнформацияТаблица 27.3. Антибиотики - ингибиторы синтеза белкаАнтибиотикДействиеСтрептомицинИнгибирует инициацию и вызывает неправильное считываниемРНК (у прокариот)Связывается с 30S-субчастицейи ингибирует связывание аминоацил-тРНК (у прокариот)Ингибирует пептидилтрансферазную активность 50S-субчастицы рибосом (у прокариот)Ингибируетпептидилтрансферазную активность 60S-субчастины рибосом (у эукариот)Связывается с 50S-субчастицейи ингибирует транслокацию (упрокариот)Вызываетпреждевременнуютерминацию цепи, действуя в качестве аналога аминоацил-тРНК(у прокариот и эукариот)ТетрациклинХлорамфениколЦиклогексимидЭритромицинПуромицинчастице.

Следующий эксперимент продемонстрировал,чточувствительностьк стрептомицину определяется каким-тобелком 30S-субчастицы, а не молекулой16S-PHK. Наконец, после ряда сложныхэкспериментов оказалось, что чувствительность к стрептомицину детерминируетсятолько одним белком, входящим в состав30S-субчастицы S12.27.21. Пуромицин вызывает преждевременную терминацию цепи, так как имитируетамииоацилированную транспортную РНКАнтибиотик пуромицин ингибирует синтезбелка, поскольку он освобождает новообразованные полипептидные цепи еше дотого, как завершается их синтез.

Пуромицин-аналог концевого участка аминоацилтРНК аминоациладенозина (рис. 27.24). Онсвязывается с А-участком рибосомы и препятствует связыванию аминоацил-тРНК.Кроме того, пуромицин содержит α-аминогруппу. Эта аминогруппа, подобно аминогруппе аминоацил-тРНК, образует пептидную связь с карбоксильной группой растущей пептидной цепи в результате реакции,катализируемойпептидилтрансферазой.Образующийся продукт представляет собой пептид с ковалентно присоединеннымостатком пуромицина на карбоксильномконце.

Затем пептидилпуромицин сходитРис. 27.24.Структура пуромицина напоминает аминоацилированныйконец аминоацил-тРНК.с рибосомы. Пуромицин был использовандля изучения функционального состояниярибосом. Концепция существования Аи Р-участков возникла в результате опытовс использованием пуромицина для выяснения локализации пептидил-тРНК. Когдапептидил-тРНК находится в А-участке (дотранслокации), она не может вступать в реакцию с пуромицином.27.22. Некоторые короткие пептидысинтезируются без участия рибосомТеперь мы перейдем к другому механизмуобразования пептидной связи в биологических системах. Рассмотрим в качестве примера биосинтез грамицидина S - циклического пептидного антибиотика, состоящегоиз двух идентичных пентапептидов, соединенных «голова к хвосту» (рис. 27.25).

ЭтотантибиотикпродуцируютнекоторыештаммыспорообразующейбактерииBacillus brevis.Биосинтез грамицидина S происходитв отсутствие рибосом или мРНК. Для негонеобходим гораздо более простой синтетический аппарат, состоящий всего лишь издвух ферментов - EI и ЕII. Фермент ЕII(масса 100 кДа) активирует фенилаланин,остальные четыре аминокислоты пентапептидного фрагмента активируются EI (масса180 кДа).

Кроме того, оба фермента уча27. Синтез белка107переносится на иминогруппу L-пролинового остатка, присоединенного к EI, с образованием дипептида. В последующих реакциях участвует только E I . Активированная карбонильная группа остатка пролинав составе дипептида реагирует с аминогруппой валинового остатка, прикрепленного к тому же ферменту, и дает трипептид. Этот процесс повторяется с участиеморнитина и затем лейцина, образуя в результате пентапептид, связанный с ферментом.

С возникновением каждой новой пептидной связи растущий пептид переноситсяна новую сульфгидрильную группу. НакоРис. 27.25.Последовательностьаминокислот в грамицидине S, циклическом пептиде, состоящем издвух одинаковых пентапептидных групп.ствуют в образовании пептидной связи.В этой системе аминокислоты активируются путем образования тиоэфиров, связанных с ферментами. Вместо 3'-концевойгидроксильной группы тРНК активированные аминокислоты присоединяютсяк сульфгидрильной группе EI и EII:Если инкубировать L-пролин, L-валин,L-орнитин и L-лейцин с EI в присутствииАТР, они образуют тиоэфирные связис определенными сульфгидрильными группами ЕI.

Точно так же D-фенилаланинв присутствии АТР образует тиоэфирнуюсвязь с ЕII.Синтез пептида в этой системе инициируется взаимодействием EI и ЕII. ОстатокD-фенилаланина, присоединенный к ЕII,108Часть IV.Информациянец, активированные пентапептиды, присоединенные к двум различным молекуламEI, реагируют друг с другом с образованием циклического грамицидина S.Следует отметить две особенности этогобиосинтетического пути.1. Аминокислотная последовательностьграмицидина S определяется пространственной организацией и специфичностьюферментов EI и ЕII.

На каждую пептиднуюсвязь приходится по меньшей мере однасубъединица белка. Выходит, что этот способ синтеза уступает по экономичностирибосомному механизму. Поэтому пептиды, содержащие более чем примерно 15остатков, не синтезируются с помощьюэтого механизма.2. Синтез грамицидина S напоминаетсинтез жирных кислот в том отношении,что активированными промежуточнымипродуктами в обоих процессах служаттиоэфиры.

Кроме того, EI содержит ковалентно связанный остаток фосфопантетеина. Возможно, этот тиол переносит растущую пептидную цепь с одного участка ЕIна следующий. Фриц Липман (FritzLipmann) предположил, что синтез полипептидных антибиотиков, возможно, представляет собой как бы атавизм, напоминающий о примитивном механизме синтезабелка, который использовался на заре эволюции. Синтез рибосомных белков могвозникнуть в результате эволюции синтезажирных кислот.ЗаключениеСинтез белка (трансляция) зависит откоординированного взаимодействия болеечем 100 макромолекул, к которым, помиморибосом, относятся мРНК, тРНК, активирующие ферменты и белковые факторы.Синтез белка начинается с активации аминокислотаминоацил-тРНК-синтетазами(активирующими ферментами) за счетэнергии АТР.

Синтетазы соединяют карбоксильную группу аминокислоты с 2'- или3'-гидроксильной группой остатка аденозина на 3'-конце тРНК. Для каждой аминокислоты имеется по меньшей мере одинактивирующий фермент. Кроме того, длякаждой аминокислоты имеется хотя бы од-на специфическая тРНК. Все транспортныеРНК, обладающие различной специфичностью, характеризуются общим планомстроения. Это - одиночные цепи РНК длиной примерно 80 нуклеотидов, содержащиенекоторые модифицированные (например.метилированные) производные обычныхоснований.

Последовательности основанийвсех известных тРНК могут быть написаны в виде клеверного листа, в которомпримерно половина нуклеотидов спарена.Кристаллографические исследования с помощью рентгеновских лучей показали, чтомолекула тРНК имеет L-образную форму.На одном конце L-образной структуры находится 3'-концевая ССА-последовательность, являющаяся местом присоединенияаминокислоты, на другом конце, на расстоянии около 80А,- антикодон. Информационная РНК узнает антикодон тРНК,а не присоединенную к тРНК аминокислоту.

Кодон мРНК образует пары основанийс антикодоном тРНК. Некоторые тРНКузнают более одного кодона благодаря тому, что спаривание третьего основания кодона менее избирательно, чем спариваниедвух других (гипотеза «качаний», неоднозначного соответствия; wobble-hypothesis).Синтез белка происходит на рибосомах,образованных из больших и малых субъединиц. В каждом из них примерно две трети массы приходится на долю РНК и однатреть-на белок. 70S-рибосома E.coli (масса 2500 кДа) состоит из 30S- и 50S-субчастиц.Синтез белка происходит в три этапа,называемых соответственно инициацией,элонгацией и терминацией. Информационная РНК, формилметионил-тРНКf и 30Sсубчастица рибосомы соединяются, образуя30S-комплекс инициации. Сигналом началатрансляции служит кодон AUG (илиGUG), которому предшествует богатая пурином последовательность, способная спа27.

Синтез белка109риваться с 16S-pPHK. Затем 50S-субчастица рибосомы присоединяется к этому комплексу, что приводит к образованию 70Sкомплекса инициации, готового к следующему этапу. Цикл элонгации включаетсвязывание аминоацил-тРНК (узнаваниекодона), образование пептидной связии транслокацию. Рост цепи происходитв направлении от N-конца к С-концу.Терминацию синтеза белка осуществляютфакторы освобождения, которые узнаюттерминирующиекодоныUAA,UGAРЕКОМЕНДУЕМАЯЛИТЕРАТУРАС чего начатьMiller О.L., Jr., 1973. The visualizationof genes in action, Sci. Amer., 228(3),34-42.Rich A., Kim S.H., 1978. The threedimensional structure of transfer RNA,Sci.

Amer., 238(1), 52-62.Clark B.F.C.,Marcher K.A.,1968.How proteins start, Sci. Amer., 218(1),36-42.и UAG, что приводит к гидролизу связимежду полипептидом и тРНК. При образовании 70S-комплекса инициации, присвязывании аминоацил-тРНК с рибосомойи на стадии транслокации происходит гидролиз GTP.

Характеристики

Тип файла
PDF-файл
Размер
34,26 Mb
Тип материала
Предмет
Высшее учебное заведение

Список файлов книги

Свежие статьи
Популярно сейчас
А знаете ли Вы, что из года в год задания практически не меняются? Математика, преподаваемая в учебных заведениях, никак не менялась минимум 30 лет. Найдите нужный учебный материал на СтудИзбе!
Ответы на популярные вопросы
Да! Наши авторы собирают и выкладывают те работы, которые сдаются в Вашем учебном заведении ежегодно и уже проверены преподавателями.
Да! У нас любой человек может выложить любую учебную работу и зарабатывать на её продажах! Но каждый учебный материал публикуется только после тщательной проверки администрацией.
Вернём деньги! А если быть более точными, то автору даётся немного времени на исправление, а если не исправит или выйдет время, то вернём деньги в полном объёме!
Да! На равне с готовыми студенческими работами у нас продаются услуги. Цены на услуги видны сразу, то есть Вам нужно только указать параметры и сразу можно оплачивать.
Отзывы студентов
Ставлю 10/10
Все нравится, очень удобный сайт, помогает в учебе. Кроме этого, можно заработать самому, выставляя готовые учебные материалы на продажу здесь. Рейтинги и отзывы на преподавателей очень помогают сориентироваться в начале нового семестра. Спасибо за такую функцию. Ставлю максимальную оценку.
Лучшая платформа для успешной сдачи сессии
Познакомился со СтудИзбой благодаря своему другу, очень нравится интерфейс, количество доступных файлов, цена, в общем, все прекрасно. Даже сам продаю какие-то свои работы.
Студизба ван лав ❤
Очень офигенный сайт для студентов. Много полезных учебных материалов. Пользуюсь студизбой с октября 2021 года. Серьёзных нареканий нет. Хотелось бы, что бы ввели подписочную модель и сделали материалы дешевле 300 рублей в рамках подписки бесплатными.
Отличный сайт
Лично меня всё устраивает - и покупка, и продажа; и цены, и возможность предпросмотра куска файла, и обилие бесплатных файлов (в подборках по авторам, читай, ВУЗам и факультетам). Есть определённые баги, но всё решаемо, да и администраторы реагируют в течение суток.
Маленький отзыв о большом помощнике!
Студизба спасает в те моменты, когда сроки горят, а работ накопилось достаточно. Довольно удобный сайт с простой навигацией и огромным количеством материалов.
Студ. Изба как крупнейший сборник работ для студентов
Тут дофига бывает всего полезного. Печально, что бывают предметы по которым даже одного бесплатного решения нет, но это скорее вопрос к студентам. В остальном всё здорово.
Спасательный островок
Если уже не успеваешь разобраться или застрял на каком-то задание поможет тебе быстро и недорого решить твою проблему.
Всё и так отлично
Всё очень удобно. Особенно круто, что есть система бонусов и можно выводить остатки денег. Очень много качественных бесплатных файлов.
Отзыв о системе "Студизба"
Отличная платформа для распространения работ, востребованных студентами. Хорошо налаженная и качественная работа сайта, огромная база заданий и аудитория.
Отличный помощник
Отличный сайт с кучей полезных файлов, позволяющий найти много методичек / учебников / отзывов о вузах и преподователях.
Отлично помогает студентам в любой момент для решения трудных и незамедлительных задач
Хотелось бы больше конкретной информации о преподавателях. А так в принципе хороший сайт, всегда им пользуюсь и ни разу не было желания прекратить. Хороший сайт для помощи студентам, удобный и приятный интерфейс. Из недостатков можно выделить только отсутствия небольшого количества файлов.
Спасибо за шикарный сайт
Великолепный сайт на котором студент за не большие деньги может найти помощь с дз, проектами курсовыми, лабораторными, а также узнать отзывы на преподавателей и бесплатно скачать пособия.
Популярные преподаватели
Добавляйте материалы
и зарабатывайте!
Продажи идут автоматически
6417
Авторов
на СтудИзбе
307
Средний доход
с одного платного файла
Обучение Подробнее