Дж. Уилсон, Т. Хант - Молекулярная биология клетки - Сборник задач (1120987), страница 127
Текст из файла (страница 127)
Этот подход менее однозначен, чем первый, поскольку неизмененная картина не позволяет однозначно заключить, что дефектный ген регулирует синтез других белков — возможно, что просто было проверено недостаточно много ревертантов. В целом два этих метода оказались весьма мощным средством анализа жгутиковых мутантов. У большинства мутантов, включая 7104, с нх помошью было выявлено прямое влияние мутаций на процесс сборки (т.е. показано, что мутантные гены кодируют белки, образующие часть структуры аксонемы). Более того, оба этих метода давали одинаковые результаты при выявлении белка, кодируемого поврежденным геном: немеченое пятно при анализе дикариона соответствовало смеГценному пятну при анализе ревертантов. Литература: 1 иск, 11..Г.Г..
Оепе!Гс апп Ыосьепйса1 рймесцоп сГ !Ле еисагуобс Пахейшп. Ю. Сей. Вге. 98:789 — 794, 1984. Микротрубочки цитоплйзмы 11-21 А. Б. колхицин центр организации микротрубочек (МТОС--ппсго!пЬп!е-огйип- х!п8 сеп1ег) динамическая нестабильность белки, ассоциированные с микротрубочками (МАРз — ппсгошЬп- 1е-аззос!а1ег) ргоге!пз) кинезин В. Г. 11-22 А. Б. Правильно. Неправильно. Быстро (в течение нескольких минут) блоки- руются только те клетки, которые в момент добавления колхи- цина находятся на стадии митоза. Правильно. Правильно. Правильно. В.
Г. Д Б. Анализ внутригенных ревертантов по второму сайту также 446 Глава 11 Неправильно. Динамическая нестабильность проявляется толь- ко у цитоплазматических микротрубочек с некэпированными концами. Правильно. Неправильно. Посттрансляционным модификациям (тирозили- рованию и ацетилированшо) подвергается полимеризованный тубулин; обратные процессы происходят на неполимернзован- ных субъединицах. Неправильно. Микротрубочки в аксоне ориентированы лишь в одном направлении. Движение везикул и органелл в обе стороны вероятнее всего достигается благодаря работе двух белковых «моторов», перемещающих частицы в противопо- ложных направлениях.
Правильно. Е. Ж. 3. И. К. 11-23 А Центросомы снижают критическую концентрацию, ибо служат центрами нуклеации для роста микротрубочек. Центры нуклеации облегчают возникновение новых микротрубочек; кроме того, они предохраняют связанный конец от деполимеризации, благодаря чему образовавшаяся микротрубочка имеет больше шансов сохраниться. Если нет таких центров нуклеапии, возникновение новых микротрубочек идет гораздо труднее, и оба их конца подвергаются распаду. Кривые образования микротрубочек в присутствии и в отсутствие центросом различаются по форме, так как в качестве критериев полимеризации в этих двух случаях использовали разные по своей природе параметры. В отсутствие центросом (рис. 11-17, А) о полимеризации судили по общему количеству образовавшегося полимера, которое зависит только от концентрации добавленного тубулина. Это количество с ростом концентрации тубулина также будет расти-линейно и неограниченно.
В присутствии центросом (рис. 11-17, Б) критерием полимеризации служило число микротрубочек, приходящихся на одну центросому. Поскольку число центров нуклеации на каждой центросоме ограничено (примерно по 60 центров в данном эксперименте), при высоких концентрациях тубулина наступает насыщение. Концентрация димеров тубулина, равная 1 мг/мл, соответствует концентрации тубулина, равной 9,1 мкМ. 1мгтубулина ммоль тубулина 1000 мл ~тубулин~— мл 1,1 х 10' мг тубулина л = 9,1 х 10 ' ммоль/л = 9,1 х 10 ' мМ; гтубулин3 = 9,1 мкМ.
В Эта величина ниже критической концентрации для сборки микротрубочек в отсутствие центросом. Таким образом, без предоставляемых центросомой точек нуклеации микротрубочек в клетке просто не будет. Вероятно, именно поэтому большинство микротрубочек в животных клетках «выходят» из центросом. Литература: М!гганпа, Т:, КггггЬлег, М.
34!сгогиЬп1е амепзЫу пис1еаГе4 Ьу Ыо1агед сепггозогпеа Ха!иге 312:232-237, 1984. 11-24 А. Микротрубочки, сборка которых происходит на аксонемах Цнгоскепег 447 жгутиков, являются продолжением уже имеющихся в них микротрубочек. Тем самым направление роста четко определено: плнзс-конец аксонемы будет центром нуклеации для микро- трубочки, плюс-конец которой в свою очередь остается свободным для присоединения новых субъсдивнц, Таким образом, вновь образованная микротрубочка своим минус-концом присоединена к аксонеме, а плюс-концом направлена от аксонемы (рис.
11-30, А). А.АКСОНЕМА Гн.конец Б. Плюс-концы микротрубочек должны наращиваться быстрее так как микротрубочки с открытыми плюс-концами (т.е. те, что присоединены к плюс-концу аксонемы) длиннее, чем мнкротру- бочки с открытыми минус-концами (присоединенные к минус- концу аксонемы). Аксонеме Н .конец В. Благодаря тому, что у аксонемы можно различить плюс- ж центносомА и минус-концы, становится очевидным, что скорость наращивания на плюс-концах выше, чем на минус-концах; микротрубочки, соединенные с плюс-концами, длиннее тех, которые соединены с минус-концами. Именно эта разница в скорости сборки н позволяет определить, какова полярность микротрубочек, образующихся на цснтросомах и кинетохорах. Длина микротрубочек, нуклеация которых пронзогпла на центросомах, свидетельствует о том, что открыт их плюс-конец.
Следовательно, центросомы «организуют» сборку микротрубочек, связывая их минус-концы (рис. 11-11, Ь). Для мнкротрубочек, образующихся на кннетохорах, характерно бимодальное распределение по длине; следовательно, некоторые микротрубочки (те, что длиннее) связаны с кинетохором своими минус- концами, а некоторые (более короткие) — плюс-концами (см. рнс.
11-30, В). в, кинетохоР Лаге рагу ри МГгсЫзол, Тс Кггесушег, и. И'. Ргорегбеи оГ ГЬе !бпегосЬоге Гп Ыгго. 1. М!сгогпбп1е ппс!еабоп апсГ гпЬп1гп Гйпг(пщ. Ю. Сей В!»1. !01:755 765, !985. совершенно независимо. В то время как один укорачивается, другой может наращиваться, и оба могут укорачиваться или удлиняться одновременно. Кроме того, переходы от удлинения к укорочению и наоборот на обоих концах никак не коррелируют друг с другом. Рас. 11-30. Полярности микро- трубочек, нуклеацня которых про- изошла на аксонемах (А), центро- сомах (Б) н кннетохорах (В) (отает ! 1-24). Б.
Гипотеза СгТР-колпачка предсказывает, что быстро растущий конец, имеющий более' длинный колпачок, будет стабильнее, чем медленно растущий, у которого колпачок короче. Это означает, что, согласно простой гипотезе СзТР-колпачка, быстро удлиняющийся конец должен пребывать в состоянии полимеризацнн дольше, чем медленно растущий; иначе говоря, на быстро растущем конце переключение между фазами удлинения н укорочения будет происходить реже, чем на медленно удлиняюшемся. (Гипотеза ничего не говорит о том, как часто укорачиваюгцийся конец, у которого нет колпачка, может превращаться в растущий.) Если какие-то экспериментальные результаты на этот счет и имеются, то только против предсказаний простой гипотезы СгТР-колпачка.
Периоды роста на «активных» концах не более длительны (наоборот, они оказываются даже короче), чем на «неактивных». Таким образом, простая гипотеза ОТР-колпачка экспериментально не подтверждается; кроме тубулина связы- 11-25 А. Два конца одной микротрубочки, по-видимому, ведут себя 448 Глава 11 ваться с ОТР-колпачком и способствовать тем самым устойчи- вости быстро растущих концов могут и другие белки. происходит путем связывания с минус-концами, все свободные концы микротрубочек — это плюс-концы. Следовательно, все концы должны вести себя однотипно (быть «активными» или «неактивными»).
Полагают, что «активиые» концы соответствуют плюс-концам, однако специально таких исследований не проводили. Поскольку свойством стабилизировать микротрубочкя (предохранять нх от разборки) обладают ассоциированные с ними белки (МАР), следует ожидать, что при их добавлении уменьшится частота переключения между фазами наращивания и распада и увеличится длительность пребывания в фазе полимеризации (роста). Именно это наблюдается в эксперименте, Фактически переключение полностью исчезает, и наращивание происходит равномерно и непрерывно до тех пор, пока не будет достигнуто стационарное состояние, после чего длина микро- трубочек сохраняется неизменной. Латератува: Ногах Тс Нога»я', Н.
Ч!пийхабоп оГ!Ье г!упагп!с !пзгаЬ!!!гу и! !пг!!т!г!па! гп!его!пыл!ез Ъу г!аг!с-Г1е16 гп!сгогсору. 1чаГпге 321:605 — 607, ! 986. Промежуточные фнламенты 11-26 А. Б. В. Г. Д. кератины виментин десмин глиальный фибриллярный кислый белок нейрофнламенты ядерные ламины 11-27 А. Б. Правильно. Неправильно. Промежуточные филаменты крайне плохо раст- воримы и образуют остаток после экстракции клеток раствора- ми неионных детергентов и солей в высокой концентрации.
Правильно. Неправильно. Белки всех цитоплазматическнх промежуточных филаментов кодируются генами одного мультигенного се- мейства. Правильно. Правильно. Неправильно. Некоторые совершенно здоровые, живые клетки, например, те глиальные клетки, которые образуют в централь- ной нервной системе миелин, полностью лишены цитоплазма- тнческих промежуточных филаментов. Однако даже в этих клетках есть ядерные памины. Правильно.
В. Г. Д. Е. Ж. Сегмент ядерного ламина С, обозначенный как виток 1А, «ложится» на гептадный повтор в 9 позициях из 11 (см. рис. 11-31), что считается очень хорошим совпадением. Для образования «витого каната» совпадение не обязательно должно быть полным. Два других отмеченных сегмента (виток 1Б и виток 2, 11-28 В. Поскольку нуклеация сборки микротрубочки центросомой Иитоскепет 449 Рас. 11-31. Структура гепталпого повтора в области «влткв 1А» ядерного ламина С (ответ 11-28). Гплрофобпые аминокислоты, соот- ветствующие положениям А плп 13 гептвлпого повтора, обозначены знаком пднзс.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
