Диссертация (1090330)
Текст из файла
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕУЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ«МОСКОВСКИЙ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ»МИНИСТЕРСТВА ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИРОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИНа правах рукописиВОРФОЛОМЕЕВА ЕЛЕНА ВИКТОРОВНАПОЛУЧЕНИЕ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХВОДОРАСТВОРИМЫХ СОПОЛИМЕРОВ НА ОСНОВЕN-ОКСИДОВ ПИРИДИНА14.04.02 – Фармацевтическая химия, фармакогнозияДИССЕРТАЦИЯ НА СОИСКАНИЕ УЧЁНОЙ СТЕПЕНИКАНДИДАТА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ НАУКНАУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬдоктор технических наук,профессор Кедик С.А.МОСКВА – 20182ОГЛАВЛЕНИЕВВЕДЕНИЕОСНОВНАЯ ЧАСТЬГЛАВА 1.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ1.1. Классификация современных адъювантов1.2. Получение N-оксидов пиридина1.3. Применение N-оксидов пиридинаВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 1ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ2.1. Объекты исследования2.1.1. Действующее вещество2.1.2. Исходные и вспомогательные вещества2.2. Методы исследования2.2.1. Физико-химические методы анализа N-оксида сополимера2.2.2. Методы контроля качества субстанции N-оксида сополимера2.2.3. Биологические методы2.2.4. Статистическая обработка данных, валидация аналитическихметодикГЛАВА 3.
СИНТЕЗ СОПОЛИМЕРА N-ВИНИЛПИРРОЛИДОНА С 2МЕТИЛ-5-ВИНИЛПИРИДИНОМ И 2-МЕТИЛ-5-ВИНИЛПИРИДИНN-ОКСИДОМ3.1. Синтез исходного соединения – сополимера N-винилпирролидона с2-метил-5-винилпиридином3.2. Получение N-оксида сополимера3.2.1. Метод контроля степени превращения реакции Nоксидирования пиридиновых звеньев3.2.2. Проведение реакции в уксусной кислоте3.2.3. Проведение реакции в буферных растворах3.2.4. Оценка влияния температуры на протекание реакции Nоксидирования3.2.5.
Оптимальные условия получения субстанцииВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 3ГЛАВА 4. СВЯЗЬ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ОТ СТЕПЕНИОКСИДИРОВАНИЯ СОПОЛИМЕРА N-ВИНИЛПИРРОЛИДОНА И 2МЕТИЛ-5-ВИНИЛПИРИДИНА4.1. Изучение антигенной активности4.2. Определение иммуногенной активностиВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 44101010254042434343434545535658595960606163646972737375803ГЛАВА 5. РАЗРАБОТКА МЕТОДОВ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВАN-ОКСИДА СОПОЛИМЕРА 2-МЕТИЛ-5-ВИНИЛПИРИДИНА ИN-ВИНИЛПИРРОЛИДОНА5.1.
Специфические методы анализа субстанции5.1.1. Содержание доли звеньев N-оксида5.1.2. Содержание доли звеньев 2-метил-5-винилпиридина5.1.3.Определениемолекулярно-массовыххарактеристиксубстанции сополимера N-оксида5.2. Общие методы анализа субстанции5.2.1. Показатель подлинность5.2.2. Родственные примеси5.2.2.1 Ацетаты5.2.2.2. Перекисные соединения5.2.2.3. α-пирролидон и N-винилпирролидон5.2.3. Остаточные органические растворители5.2.3.1. Бутилацетат и циклогексан5.2.3.2. Четыреххлористый углерод и хлороформ5.2.4. Количественное определение5.3.
Стабильность субстанции сополимера5.4. Проект спецификацииВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 5ЗАКЛЮЧЕНИЕСПИСОК СОКРАЩЕНИЙСПИСОК ЛИТЕРАТУРЫПРИЛОЖЕНИЯПриложение 1. Акт внедрения «Московский технологическийуниверситет»Приложение 2. Акт внедрения ЗАО «Институт фармацевтическихтехнологий»Приложение 3. Евразийский патент №027934Приложение 4. Евразийский патент №027979Приложение 5. Проект НД на субстанцию «Викодон – оксид»Приложение 6.
Протоколы валидацииПриложение 7. Лабораторный регламент на субстанциюПриложение 8. Отчеты по изучению иммуностимулирующего действияи антигенной активности субстанции818181828485858586898990901001011041071111121141151331341361381391401441481494ВВЕДЕНИЕАктуальностьПо данным Роспотребнадзора за 2017 год около 20 % заболеваний,приводящих к летальному исходу, являются инфекционными.
В качествепрофилактики данной группы заболеваний можно отметить искоренение очагаинфекции, введение карантина, повышение сопротивляемости организма ивакцинирование [36].Вакцинация – создания специфической невосприимчивости к инфекционнымзаболеваниям путем моделирования естественного инфекционного процесса сблагоприятным исходом.
В некоторых случаях входящие в состав вакцины,ослабленные или убитые микроорганизмы, обладают слабой иммуногенностью. Сцелью усиления иммунного ответа со стороны иммунной системы человека всостав современных вакцин вводят различные иммуноадъюванты. Их применениепозволяет снизить себестоимость вакцины и свести к минимуму побочныеэффекты.В последнее время получили широкое распространение полимерныеиммуноадъюванты: сополимер N-оксида 1,4-этиленпиперазина и (N-карбоксиметил)1,4-этиленпиперазиний бромида и сополимер N-винилпирролидона и 2-метил-5винилпиридина, позволяющие вызвать ранний иммунный ответ, уменьшитьтоксичностьиувеличитьантигеннуюактивностьвакцины.Вкачествеиммуноадъюванта в составе гриппозной вакцины хорошо себя зарекомендовалсополимер N-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина [26].
Технологияполучения вакцин ограничивает возможный диапазон рН показателями от 7.0 до 7.6,соответствующий значению рН физиологических жидкостей. В этой областизначений рН для сополимера 2-метил-5-винилпиридина и N-винилпирролидона(МПВ и N-ВП) с высоким значением пиридиновых звеньев наблюдается разделениефаз, что затрудняет стадию фильтрования в технологическом процессе. В работахКедика С.А. и сотрудников показано, что с ростом числа пиридиновых звеньев вмакромолекулах сополимера его иммуноадъювантная активность возрастает, приэтом растворимость сополимера в воде уменьшается [13-15]. В литературе описаны5пути увеличения растворимости подобных соединений, одним из которых являетсямодификация сополимеров N-оксидированием пиридиновых звеньев [12].
Такимобразом, поиск, получение и стандартизация новых биологически активныхиммуноадъювантов с улучшенными технологическими свойствами являетсяактуальной задачей.Степень разработанности темыМетодики синтеза и химические свойства N-оксидов описаны в монографииКатрицкого А.Р. «Химия гетероциклических N-оксидов» (1971). В работахНижника Я.П. (2004) и Митянова В.С. (2014) большое внимание уделено методамполучения N-оксидов и изучению реакций комплексообразования N-оксидов сразличными соединениями. В работе Кацнельсон Б.А.
и Алексеева О.Г. (1995)описанырезультатыпримененияN-оксидовпиридинадлялеченияпневмокониозов.В работе Кедика С.А. и сотрудников (2012) показана биологическаяактивность сополимера N-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина, поэтомупредполагалось, что N-оксид данного сополимера, сохранит высокую биологическуюактивность, при улучшенных показателях растворимости. Также в указанных работахотсутствуют какие-либо данные о стандартизации полученных веществ, что непозволяетиспользоватьполученныеN-оксидыдляфармацевтическойпромышленности.Целью работы является синтез растворимых в воде сополимеров Nвинилпирролидонас2-метил-5-винилпиридином,N-оксидированныхпопиридиновым звеньям, и исследование их иммуноадъювантной активности.Для реализации поставленной цели были сформулированы следующиезадачи:• Выбрать N-оксидирующий агент, позволяющий провести направленныйсинтез сополимеров.• Изучить влияние рН и температуры на кинетику реакции N-оксидированияпиридиновыхзвеньеввинилпиридином.сополимеровN-винилпирролидонас2-метил-5-6• Разработать метод контроля степени превращения реакции N-оксидированияпиридиновых звеньев.• Выбрать оптимальную степень N-оксидирования пиридиновых звеньевсополимеров N-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина с помощьюбиологической модели и анализа растворимости полученных производных.• Разработать методы контроля качества для выбранного сополимера N-оксида2-метил-5-винилпиридина с N-винилпирролидоном и провести их валидацию.• Подготовить проект нормативной документации для субстанции сополимераN-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридин-N-оксида.Научная новизна работыВ ходе работы изучена реакция N-оксидирования пиридиновых звеньевсополимера N-винилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридина.
Из литературных иэкспериментальных данных выбран оптимальный N-оксидирующий агент.Исследовано влияние температуры и рН среды на скорость и полноту протеканияреакции.Разработанспектрофотометрическийметодконтроляполнотыпротекания реакции, основанный на гипсохромном смещении максимума полосыпоглощения. Показано, что данные спектрофотометрического метода хорошокоррелируют с данными, полученными методомС ЯМР спектроскопии.13Установлена корреляция между степенью N-оксидирования пиридиновых звеньевсополимераиN-винилпирролидона2-метил-5-винилпиридинасиммуноадъювантной активностью и растворимостью. Разработаны методыконтроля качества сополимера N-винилпирролидона с 2-метил-5-винилпиридин-Nоксидом.
Проведена сравнительная оценка иммуностимулирующего действиясополимераN-винилпирролидонаи2-метил-5-винилпиридин-N-оксидаповеличине изменения средне-эффективной иммунизирующей дозы (ЕД 50).Теоретическая и практическая значимость• Получена оригинальная субстанция сополимера N-винилпирролидона и 2метил-5-винилпиридина, N-оксидированного по пиридиновым звеньям(Евразийский патент №027934, №027979).7• Подобраныусловиясинтезадляосуществленияконтролируемогопроцесса N-оксидирования и возможного выбора степени превращения вещества.• При помощи методов13С ЯМР спектроскопии и УФ-спектрофотометриипроведен анализ структуры сополимеров N-винилпирролидона с 2-метил-5винилпиридин-N-оксидом.• Разработаны методы контроля качества субстанции сополимера Nвинилпирролидона и 2-метил-5-винилпиридин-N-оксида (проект нормативнойдокументации (НД), апробированный ЗАО «ИФТ» 23.11.2017) для дальнейшегоиспользования ее в качестве лекарственного средства иммуномодулирующегодействия.• Основные положения диссертации внедрены в учебный процесс кафедрыбиотехнологииипромышленнойфармацииФГБОУВО«Московскийтехнологический университет» Министерства образования и науки РоссийскойФедерации (акт внедрения от 12.01.2018).Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтическихнаук.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
