Автореферат (Патоморфологические изменения у осетровых рыб при экспериментальной и спонтанной герпесвирусной инфекции), страница 3

В коже отмечали: очаговое гиперпластическоеразрастание эпидермиса с образованием узелков (бляшек) (рис. 4, а), гипертрофиюслизистых клеток и переполнение их слизью, разрывы клеточных оболочек вплоть до12полного разрушения клеток, очаговую десквамацию и некроз эпидермиса, оголение иизъязвление жучек хвостового стебля (рис.

4, б).В печени наблюдали деформация и дискомплексация гепатоцитов, резорбциижира и развитие вакуольной дистрофии в ядрах отдельных клеток выявлялимаргинацию хроматина и кариопикноз. В терминальной стадии болезни наблюдалиочаговыйидиффузныйнекрозпаренхимы,проявлявшихсядиссоциацией,округлением и лизисом печёночных клеток (рис. 4, в).В почкахвыявляли гиалиново-капельную дистрофию в эпителиальныхклетках почечных канальцев (рис. 4,г), местами в канальцах отмечен некрозэпителиальных клеток.

В сосудистых клубочках и канальцах отмечали признакисерозного гломерулонефрита, в отдельных местах - деструкция клубочков. Вгемопоэтической ткани наблюдали очаги кровоизлияний.абвгРис. 4. Микроструктура кожи рыб опытной групп. Гематоксилин и эозин: а гиперплазия эпидермиса. Об. 10, ок.10; б - изъязвление жучки, некроз и слущиваниеэпидермиса и эпителия боковой линии. Об. 10, ок.10; в – диффузный некрозпаренхимы.

Об.40, ок.10; г - гиалиново- капельная дистрофия эпителиальных клетокпочечных канальцев. Об. 90, ок.10;В спиральном отделе средней кишки наблюдали: кровоизлияния, признакикатарального воспалении, проявлявшегосяскоплением мутной слизи с примесьюкрови, вакуолизацию и разрывы оболочек слизистых клеток, некроз и десквамациюэпителия слизистой оболочки (рис. 5, а). В жабрах выявляли гиперплазию и отёкэпителия (рис.5, б). Лимфоиднаяжелеза сердца увеличена за счёт гиперплазиигемопоэтической ткани (рис.5, в). В селезёнке –расширена белая пульпа (рис.

5, г). Урыб контрольной группы подобных изменений обнаружено не было.абвгРис. 5. Микроструктура средней кишки (а), жабр (б), лимфоидной железы сердца (в) иселезёнки (г) рыб опытной групп. Гематоксилин и эозин: а – катаральное воспаление,кровоизлияние. Об.10, ок.10; б - отёк. Об. 20, ок.10; в – увеличенная лимфоиднаяжелеза. Об. 10, ок.10; г – расширенная белая пульпа, Об.40, ок.1013Опыт 2. Результаты исследований при заражении сеголетков сибирскогоосетра изолятом SIz6/0311.Развитие клинических признаков и кумулятивная гибельсеголетковсибирского осетра, отражена в таблице 4, 5.Таблица 4 – Развитие симптомов у сеголетков, заражённых штаммом SIz6/0311Количестводней смоментазаражения323839-4039-49Клинические признаки и внешние измененияАпатия, вялость, отказ от кормаНарушение координации движений, еморрагии в области жучек ирта, некроз плавников, гиперплазия эпидермисаПятнистые кровоизлияния, геморрагии жабр, изъязвление жучекОчаговый некроз кожи, вторичная инфекция(сапролегниоз),адинамия, плавание вверх брюхомТаблица 5 – Кумулятивная гибель сеголетков сибирского осетра (n=40),заражённых изолятом SIz6/0311КоличестводнейпослезараженияКумулятивнаягибель, экз./%323909/234428/704940/100Результаты вирусологических исследований.

Вирус был выделен из кожи,плавников, паренхиматозных органов, сердца. Титры вируса в пробах кожи иплавников было в среднем 7 lg ТЦД50/мг ткани, в печени, почках, кишечнике – 6 lgТЦД50/мг ткани, в сердце, жабрах – 5 lg ТЦД50/мг ткани, селезёнке – 4, мозге – 3 lgТЦД50/мг ткани.Клинические признаки и патологоанатомические изменения. У больныхрыб отмечали апатию, вялость, отказ от корма. В дальнейшем появлялиськровоизлияния в области жучек и рта, очаги гиперплазии, некроза тканей кончиковплавников. За 2-3 часа до гибели рыб подвергали вскрытию для патологоанатомических и патогистологических исследований.

При вскрытии наблюдалиточечные кровоизлияния на серозной оболочке брюшной полости. Печень бледная ирыхлая. Почки бледные, уменьшенные в объёме, средняя кишка с признакамивоспаления. В жабрах отдельных рыб бледные кончики.14Патогистологические изменения. Основные микроскопические изменениябыли обнаружены в коже, печени, почках спиральном отделе средней кишки, жабрах.В селезёнке и сердце микроскопические изменения были сходны с таковыми впредыдущем опыте.В коже, на стадии максимального подъёма эпизоотического процессаотмечали: очаговую гиперплазию эпидермиса в виде узелков – бляшек, гипертрофиюи разрыв слизистых клеток, слущивание клеток эпидермиса, изъязвление идеформацию жучек, десквамацию эпителия в канале боковой линии.

На дистальныхконцах хвостового плавника у многих рыб наблюдали некроз плавников (рис. 6, а).В печени у всех больных рыб выявляли деформацию, дискомплексациюгепатоцитов. При более тяжёлом поражении печёночные клетки в состояниивакуольной дистрофии, у многих рыб отмечали очаговый или диффузный некрозпаренхимы (рис. 6, б), который выражался в диссоциации и лизисе гепатоцитов,сопровождающийсямаргинациейхроматина,кариопикнозом,кариорексисом,кариолизисом, плазмопикнозом.Впочкахубольшинствабольныхрыботмечализначительныепатогистологические изменения: гиалиново-капельную дистрофию в эпителиипочечныхканальцев,очагикровоизлиянийвпаренхимепочек,серозныйгломерулонефрит, имевший проявления, морфологически сходный с описанным впредыдущем опыте. У части рыб был выражен некроз эпителия канальцев(некротический нефроз) и диффузный гломерулонефрит с распадом тканей клубочков(рис.

6, в).абвРис. 6. Микроструктура кожи (а), печени (б), почек (в) рыб опытной группы.Гематоксилин и эозин: а – некроз эпидермиса хвостового плавника. Об.10, ок.10; б очаговый некроз гепатоцитов, маргинация хроматина (чёрная стрелка), кариопикноз(красная стрелка). Об. 20, ок.10; в - некроз клубочков (чёрная стрелка) и канальцев(красная стрелка). Об.20, ок.1015Микроскопические изменения cпирального отдела средней кишки включаликатарально – геморрагическое воспаление, десквамацию и некроз эпителиальныхклеток, увеличение и разрывы слизистых клеток, кровоизлияния в слизистом иподслизистом слоях.

В жабрах больных рыб наблюдали отёк и слияние и расслоениежаберных пластинок, гиперплазию респираторного эпителия, у отдельных особейочаговый некроз и десквамацию эпителия. У рыб контрольной группы патизмененийобнаружено не было.Опыт 3. Результаты исследований при заражении сеголетков сибирскогоосетра штаммом SK1/0406.Развитие клинических признаков заболевания и гибели отражена в таблицах6,7.Таблица 6 – Развитие симптомов болезни у сеголетков сибирского осетра,заражённых штаммом SK1/0406Количестводней с моментазаражения1011-1213-1414-1515-1815-22Клинические признаки и внешние измененияАпатия, вялость, отказ от корма, учащённое дыханиеНеподвижное положение на дне, хаотичные движения,нарушение координации движений, положение головой внизПризнаки истощения, атрофия мышц, узелки(бляшки)Очаги некроза, геморрагии, усиленное слизевыделениеМножественныепетехии,вывернутаяпрямаякишка,воспалённый анусАдинамия, развитие вторичной инфекции (сапролегниоз)Таблица 7 – Кумулятивная гибель сеголетков сибирского осетра (n=40),заражённых штаммом SK1/0406.Количестводней послезараженияКумулятивнаягибель, экз /%Результаты1015202204/1033/8340/100вирусологическихисследований.Приинокуляциипатологическим материалом в клеточной линии SSO2 первые признаки ЦПЭпоявлялись через3 дня.

При этом наблюдали округление клеток, образованиесимпластов и кластеров. Через 6-7 дней отмечали полную деструкцию монослоя.Титры вируса в пробах кожи и плавников было в среднем 6 lg ТЦД50/мг ткани, в16печени, почках, кишечнике – 6 lg ТЦД50/мг ткани, в сердце, жабрах, селезёнке – 5 lgТЦД50/мг ткани, мозге – 3 lg ТЦД50/мг ткани.Клинические признаки и патологоанатомические изменения. Больные рыбыбыли апатичными, вялыми, отказывались от корма, некоторые рыбы оставалисьнеподвижными на дне, учащённо дыша, часто периоды неподвижного положениясменялись беспокойными и хаотичными движениями.Тело больных сеголетков было с признаками истощения, что выражалось впотере массы и атрофии мышц в области спины, на разных участках кожи иплавниках появлялись бледно – голубоватые полупрозрачные узелки (бляшки)диаметром от 1 до 4 мм. В дальнейшем узелки подвергались некрозу. Эти очаги частоинфицировалисьвторичнойинфекцией,вызваннойгрибкомSaprolegnia.Ваквариумах наблюдали обильное выделение слизи больными рыбами.

За 1-2 дня догибели у всех рыб наблюдали множественные петехии и пятнистые геморрагии вкоже. В области жучек, особенно, хвостового отдела выявлялись изъязвления. Уотдельных рыб наблюдали воспалённую, вывернутую прямую кишку.При вскрытии у больных рыб жабры были сильно гиперемированы, тёмно –красного цвета, у части рыб с бледными кончиками жаберных лепестков. Набрюшине видны точечные кровоизлияния. Печень рыхлая, бледная, у некоторых рыбпочти белая. Селезёнка у отдельных рыб со светлыми пятнами.

Почки бледные,истончены. Слизистая оболочка средней кишки гиперемирована. Полость спиральнойкишки заполнена слизеподобной жидкостью желтоватого или кровянистого цвета.Лимфоидная железа в области сердца увеличена.Патогистологические изменения. В коже у больных рыб по всейповерхности выявляли гиперплазию эпидермиса, резкое переполнение слизью иразрывыоболочекслизистыхклеток,очаговуюдесквамациюэпидермиса,изъязвление и оголение жучек (рис. 7, а). В печени отмечали вакуольную дистрофию,очаговый и разлитой некроз паренхимы (рис. 7, б). В поражённых клетках наблюдалимаргинацию хроматина, кариопикноз, кариолизис или кариорексис.

В почкахнаблюдали гиалиново-капельную дистрофию и некроз эпителиальных клетокканальцев, гломерулонефрит и тотальный некроз клубочков (рис. 7, в). В среднейкишке у больных рыб отмечали катаральное и катарально-геморрагическоевоспаление, десквамацию эпителиальных клеток, кровоизлияния и мелкоочаговый17некроз цилиндрического эпителия. В жабрах части рыб наблюдали отёк,гиперплазию эпителия, слияние и расслоение жаберных пластинок, иногда очаговыйнекроз жаберныхлепестков. Микроструктурные изменения селезёнки и сердцасходны с изменениями в предыдущих опытах.

У рыб контрольной группы подобныхпатизменений выявлено не было.абвРис. 7. Микроструктура кожи (а), печени (б), почек (в). Гематоксилин и эозин: а –десквамация, некроз эпидермиса. Об. 10, ок.10; б - крупноочаговый некрозпаренхимы. Об.10, ок.10; в - серозный гломерулонефрит (красная стрелка), некрозклубочков, (голубая стрелка), некроз канальцев (чёрные стрелки. Об.10, ок.10;Результаты исследований при естественном течении герпесвируснойболезни сибирского осетра.У осетров, отобранных в осетровом хозяйстве, наблюдали более выраженныепатоморфологические изменения кожи, чем у рыб экспериментально зараженных.