Автореферат (Разработка системы снижения негативного действия антропогенного зарязнения на состояние здоровья сельскохозяйственных животных и получение безопасных продуктов животноводства), страница 3

Показатели исследовали на автоматическом биохимическоми ИФА-анализаторе СhemWell2910 (Combi) (производство США) с использованиемвидоспецифичных наборов реагентов для иммуноферментного определения кортизола,свободного трийодтиронина, свободного тироксина в сыворотке (плазме) крови(производство ООО "Хема-Медика", Россия, г. Москва).Для исследования снижения негативного действия экотоксикантов в организмесвиней применяли сорбимикс А, молодняка крупного рогатого скота – хитозан.

Дляулучшения качества здоровья и продуктивности у свиней использовали витаминноминеральные препараты (Алексанат Зоо с аквитином, альгинат кальция, гермивит),которые вводили согласно наставлениям (рисунок 1).Контроль над ростом и развитием животных проводили путем ежемесячноговзвешивания. Всех подопытных животных в период опытов ежедневно подвергаликлиническому обследованию по общепринятым методам (определяли состояние кожныхпокровов и отдельных систем организма (дыхательной, сердечной, пищеварительной).Исследования были проведены в сельскохозяйственных предприятиях, размещенных впромышленных территориях в весенне-летний период.8В сельскохозяйственных предприятиях были отобраны пробы растительныхкормов, составляющих ежедневный рацион животных. Отбор и упаковку пробпроводили по стандартной методике, применяемой для анализа растительных кормов(Г.А. Таланов, В.Н.

Хмелевский, 1991). После убоя осуществляли отбор органов и тканейот свиней 4-х летнего возраста и молодняка крупного рогатого скота (кости скелета,мышцы, печень, почки) для химического исследования, в которых определялисодержание Cd, Pb, Мn, Fe, Zn, Cu, As атомно-абсорбционным и атомно-эмиссионнымметодами спектрометрии на атомно-адсорбционном спектрофотометре AA6800F(производство Shimadzu, Япония).Гистологические исследования органов и тканей от животных проводили накафедре анатомии, физиологии и экспертизы Уральского ГАУ под руководствомпрофессора Л.И. Дроздовой.

Для проведения сравнительного гистологическогоисследования отбирали образцы органов и мышечной ткани из бедренной, подвздошной,грудной и длиннейшей мышц спины свиней. Материал нарезали на микротом-криостатеMIKROM-HM525 (производство Германия), получая срезы толщиной 10-15 мкм. Срезыокрашивали гематоксилином Эрлиха и докрашивали 1%-ым свежеприготовленнымводно-спиртовым эозином; помещали под покровные стекла в глицеринжелатин. Изучение микроструктуры образцов на гистологических препаратах и ихфотографирование на цифровую фототехнику проводили на световом микроскопе Leicа(производство Австрия) при разных увеличениях.Послеубойную ветеринарно-санитарную экспертизу мяса убитых свинейпроводили согласно правилам ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарносанитарной экспертизы мяса и мясных продуктов от 27.12.83 г.

с изм. от 17.06.88 г., насоответствие требованиям: ТР ТС 034/2013 Технический регламент Таможенного союза«О безопасности мяса и мясной продукции», ТР ТС 021/2011 Технический регламентТаможенного союза «О безопасности пищевой продукции». Определение токсичныхэлементов: кадмий (ГОСТ 30178-96), мышьяк (ГОСТ Р 51766-2001), ртуть (ГОСТ Р53183-2008), свинец (ГОСТ 30178-96). Показатели качества: CuSO4 (реакция ссернокислой медью) по ГОСТ 23392-78, рН (ГОСТ Р 51478-99, проба варкой (ГОСТ7269-79), проба на пероксидазу (правила ветеринарного осмотра убойных животных иветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов от 27.12.83 г. с изм. от17.06.88г).Химический состав органов и мышц свиней определяли по показателям:содержание жира в мясе по ГОСТ 23042-2015 с использованием фильтрующейделительной воронки (ускоренный метод); белок по ГОСТ 25011-81 (метод определениямассовой доли белка по Кьельдалю), массовую долю общей золы по ГОСТ 31727-2012гравиметрическим методом.Для анализа показателей биологической ценности разных групп мышц и печенисвиней определяли аминокислотный состав мяса путем измерения массовой долиаминокислот методом высокоэффективной жидкостной хроматографии на хроматографежидкостном LC – 20 Prominence производство фирмы Shimadzu (производство Японии)со спектрометрическим детектором (SPD – 20A).

Разделение фенилтиокарбамидныхпроизводных аминокислот проводили на колонке с обращенной фазой С18 в режимеградиентного элюирования и их спектрометрическим детектировании на длине волны254нм.Определение жирнокислотного состава мышц и печени свиней проводили всоответствии с ГОСТ Р 55483-2013. Метиловые эфиры жирных кислот готовили по9ГОСТ Р 31665-2012.

Разделение и регистрацию компонентов подготовленной пробывыполняли на газовом хромато-масс-спектрометре GCMS-QP2010 Ultra (Shimadzu,производство Японии). Идентификацию компонентов пробы проводили на основанииданных о времени удерживания метиловых эфиров жирных кислот стандартной смеси(F.A.M.E. Mix C8-C24 Supelco, производство США), которую анализировали в тех жеусловиях, что и пробы. Для метиловых эфиров, отсутствующих в стандарте,идентификацию проводили путем сравнения экспериментальных масс-спектров сбиблиотечными (Wiley9, NIST11, LIBRARY FAMES, производство США).Рисунок 1- Схема исследований10Определяли состояние антиоксидантных систем (сыворотки) крови свинейнабором ImAnOx (производство АО Вектор-Бест, Россия, г.

Новосибирск), которыйпредназначен для количественного определения антиоксидантного статуса в образцахсыворотки и ЭДТА плазмы биохимическим методом в микропланшетном формате(чувствительность: 130 мкмоль/л). Содержание малонового диальдегида в (сыворотке)крови, печени, разных группах мышц свиней определяли по методике «Методопределения малонового диальдегида с помощью 2-тиобарбитуровой кислоты» (И.Д.Стальная, Т.Г. Гаришвили, 1970 г., Л.М.

Двинская, Л.И. Никифорова,1980 г).Всего исследовано: от свиней - 1285 проб тканей и органов, выполнено 12800анализов; от молодняка крупного рогатого скота - 720 проб тканей и органов,выполнено1200 анализов.Исследования проводили в благополучных по инфекционным и инвазионнымзаболеваниям животноводческих предприятиях. Данные о благополучии определяли наосновании результатов собственных исследований и ветеринарных отчетовДепартамента ветеринарии Свердловской области.Программа экспериментального исследования на животных утверждена Этическойкомиссией ФГБОУ ВО Уральский государственный агарный университет иметодической комиссией Уральскогонаучно-исследовательского ветеринарногоинститута.Статистические данные обрабатывали с помощью программы «Statistica, v.

6.0».Достоверность различий оценивали, используя t-критерий Стьюдента. Данныепредставлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего (M±m).2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ2.2.1 Анализ современного состояния антропогенного воздействия на организмсельскохозяйственных животных в промышленных территорияхИсследованияпроводилив3-хсельскохозяйственныхпредприятияхживотноводческой направленности из разных районов Уральского региона. Первоепредприятие (СХП1) было расположено от источника техногенных выбросов нарасстоянии 5-15 км, второе предприятие (СХП2) – на расстоянии 40 - 50 км. В качествеконтрольного было использовано сельскохозяйственное предприятие (СХП-контроль),расположенное в районе, свободном от источников промышленных выбросов.

Во всехпредприятиях для кормления свиней и крупного рогатого скота использовали корма,полученные из зерна и кормовых культур, выращенных на собственныхсельскохозяйственных угодьях в непосредственной близости к источникам эмиссий. Вовсех предприятиях были исследованы разные виды корма на содержание тяжелыхметаллов. Полученные данные сравнивали с показателями максимально-допустимыхуровней (Максимально допустимый уровень химических элементов в кормах длясельскохозяйственных животных, 1987).2.2.1.1 Характеристика антропогенного загрязнения свиноводческих предприятийИсследованиями было установлено, что в кормах, используемых для кормлениясвиней в СХП1, содержание кадмия соответствовало верхней границе нормативныхзначений (МДУ* - 0,4 мг/кг) и составило - 0,38 мг/кг, свинца было больше МДУ в 1,4раза и составляло 7,05±0,32 мг/кг (* Максимально допустимый уровень химическихэлементов в кормах для сельскохозяйственных животных, 1987 г.).

В кормах СХП2также отмечали накопление кадмия и цинка в 1,2 раза выше МДУ.11В кормовых культурах, заготавливаемых в предприятиях контрольной зоны (СХПконтроль) показатели кадмия (0,032 мг/кг) и свинца (0,004 мг/кг) были значительнониже, более чем в 10 раз по сравнению с опытными предприятиями - СХП1 и СХП2.В сельскохозяйственных предприятиях, расположенных в территориях,характеризующихся повышенным содержанием тяжелых металлов и контрольной, былипроведены исследования по определению тяжелых металлов в органах и тканях свиней(Таблица 1).Результаты выявили повышенные количества тяжелых металлов в организмесвиней.

В органах и тканях животных из группы откорма СХП1 содержание кадмияпревышало ПДК в почках - в 1,6 раза (1,59 ± 0,05 мг/кг), а цинка в печени - в 1,5 раза(151,04 ±5,22 мг/кг).У свиноматок 4-летнего возраста содержание кадмия в почках составляло 1,2±0,03мг/кг, что было в 1,2 раза выше ПДК. Выявлены особенно высокие количества меди - впечени - 115,44± 4,90 мг/кг, что выше ПДК в 5,8 раза.Таблица 1 - Содержание тяжелых металлов в органах и тканях свиней изпредприятий 5-15 км зоны от источника промышленных выбросов (СХП 1)ОрганСодержание ТМ (мг/кг)CuZnFeMnСвиньи (из группы откорма), n=40Печень4,46151,04*279,592,340±0,19±5,22±8,17±0,009Почка18,2540,2653,191,260±0,72±1,71±1,78±0,032Мышца0,90561,1916,880,440±0,30±1,90±0,65±0,019Кость0,39119,5712,760,470±0,13±4,17±0,51±0,017Свиноматки (4 года)Печень115,44*107, 66 *373,902,196±4,90±2,91±11,21±0,007Почка6,4924,93117,191,36±0,19±0,98±4,01±0,03Мышца0,6337,0423,800,991±0,02±1,36±1,01±0,032Кость0,27100,426,610,51±0,11±3,19±0,20±0,02Р < 0,05 * Разница достовернаCdPb0,187±0,0071,59*±0,050,020±0,0030,04±0,0030,0067±0,00020,0033±0,00020,0090±0,00020,0850±0,00030,074±0,0031,20 *±0,030,021±0,0020,045±0,0010,0025±0,00030,0065±0,00030,0028±0,00040,103±0,003У свиней 8-10-месячного возраста, находящихся в 40-50 км зоне от источникатехногенной эмиссии, происходило увеличение накопления количества тяжелыхметаллов: в костях - свинца и цинка в 1,2 раза, в почках - кадмия в 1,2 раза, мышьяка в3,2 раза, в мышцах - цинка в 4,4 раза по сравнению с 6-7-месячными животнымисоответственно.При этом в почках свиней 6-7-месячного возраста содержание кадмия было ужевыше предельно допустимых концентраций в 1,2 раза.