Диссертация (Молекулярно–генетические и клеточные механизмы дифференцировки симбиотического клубенька), страница 2
Описание файла
Файл "Диссертация" внутри архива находится в папке "Молекулярно–генетические и клеточные механизмы дифференцировки симбиотического клубенька". PDF-файл из архива "Молекулярно–генетические и клеточные механизмы дифференцировки симбиотического клубенька", который расположен в категории "". Всё это находится в предмете "биология" из Аспирантура и докторантура, которые можно найти в файловом архиве СПбГУ. Не смотря на прямую связь этого архива с СПбГУ, его также можно найти и в других разделах. , а ещё этот архив представляет собой докторскую диссертацию, поэтому ещё представлен в разделе всех диссертаций на соискание учёной степени доктора биологических наук.
Просмотр PDF-файла онлайн
Текст 2 страницы из PDF
1912.5.8. ПЦР ...................................................................................................... 1922.5.9. Используемые праймеры ................................................................... 1922.5.10. Анализ генной библиотеки ............................................................. 2022.5.11.
ПЦР с детекцией в реальном времени ........................................... 2022.5.11.1. Выделение тотальной РНК ........................................... 2022.5.11.2. Синтез кДНК ..................................................................
2032.5.11.3. ОтносительныйПЦР-анализврежимереальноговремени ..................................................................................................... 2032.5.12. SSAP анализ ...................................................................................... 2042.5.13. Лазерная микродиссекция ............................................................... 2062.5.13.1. Подготовка образцов ..................................................... 2062.5.13.1.
Лазерная микродиссекция образцов ............................ 2072.5.14. Подготовкаматрицыпослелазерноймикродиссекциидляэкспрессионного анализа ............................................................................. 2072.5.14.1. Выделение тотальной РНК и амплификация РНК .....
2072.5.14.2. Синтез кДНК и относительный ПЦР-анализ в режимереального времени .................................................................................. 2082.5.15. Количественныйанализэкспрессиитранскрипционныхрепортерных слияний lacZ и gusA .............................................................. 2082.6.
Методикианализавлиянияэкзогенныхгормонов,определениясодержания гормонов ...................................................................................... 2092.6.1. Анализ чувствительности тканей корня к экзогенному ауксину .. 2092.6.2. Определение содержания эндогенного ауксина ............................. 2102.6.3. Определение чувствительности клубенькообразования к этилену........................................................................................................................ 2102.7. Методика определения содержания кадмия .......................................... 2112.8. Статистическая обработка результатов ..................................................
211Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.........................................................................................2133.1. Выделение симбиотических мутантов ................................................... 2133.2. Генетический анализ ................................................................................ 2193.2.1. Гибридологический анализ ............................................................... 2193.2.2. Комплементационный анализ ........................................................... 2193.2.3.
Локализация симбиотических генов на генетической карте гороха........................................................................................................................ 2253.2.3.1. Локализация локуса Pssym31 на генетической картегороха........................................................................................................
2253.2.3.2. Локализация локуса Pssym38 на генетической картегороха........................................................................................................ 2353.2.3.3. Локализация локуса Pssym33 на генетической картегороха........................................................................................................ 2373.3.
Выявлениеосновныхсимбиотическихлокусовгороха,контролирующих ранние стадии реализации генетической программысимбиогенеза .................................................................................................... 2403.3.1. Анализ развития инфекции у серии мутантов, блокированных наранних стадиях развития клубенька (Nod− фенотип) ............................... 2413.3.2. Анализ развития клубеньковых примордиев у серии мутантов,блокированных на ранних стадиях развития клубенька (Nod− фенотип)........................................................................................................................ 2483.3.3. Последовательность функционирования симбиотических геновгороха, контролирующих ранние стадии развития клубенька ................
2523.4. Идентификация гена гороха, ортологичного гену лядвенца LjNIN,являющегосяпервымклонированнымгеномбобовыхрастенийиключевым регулятором симбиогенеза на ранних стадиях. ......................... 2563.5. Анализролиарабиногалактанпротеин-экстензиноввреализациигенетической подпрограммы инфекции тканей клубенька ризобиями угороха ................................................................................................................ 2613.6.
Анализролипероксидаводородавреализациигенетическойподпрограммы инфекции тканей клубенька ризобиями у гороха .............. 2673.7. Анализролиреорганизациитубулиновогоцитоскелетавдифференцировке клеток симбиотических клубеньков гороха и M.truncatula при реализации поздних этапов генетической программысимбиогенеза .................................................................................................... 2733.7.1.Организация микротрубочек в меристематических клеткахклубенька....................................................................................................... 2733.7.2.
Организациямикротрубочеквнеинфицированныхклеткахклубенька....................................................................................................... 2743.7.3. Организацияэндоплазматическихмикротрубочеквокругинфекционных нитей в зоне II .................................................................... 2763.7.4. Вторичный выход бактерий в цитоплазму клетки хозяина в зоне IIIсовпадает с реорганизацией кортикальных микротрубочек в клубенькахгороха и M. truncatula .................................................................................. 2813.7.5. Организацияэндоплазматическихмикротрубочеквокругинфекционных капель в зоне II ..................................................................
2883.7.6. Различия в морфологии бактероидов коррелируют с различиями вформированииифункционированиисетиэндоплазматическихмикротрубочек в инфицированных клетках зоны III у гороха и M.truncatula ....................................................................................................... 2883.7.7. Дифференцировка бактероидов не влияет на формирование сетиэндоплазматических микротрубочек в инфицированных клетках гороха,новотсутствиедифференцировкибактероидовмикротрубочкидеполимеризуются в клубеньках M.
truncatula ......................................... 2893.8. Анализ роль этилена в реализации ранних и поздних этаповгенетической программы симбиогенеза у гороха ........................................ 3023.9. Анализ роли нитратов в реализации генетической программысимбиогенеза у гороха и L. japonicus............................................................. 3113.9.1. Анализ роли нитратов в развитии симбиотических клубеньков угороха.............................................................................................................
3113.9.1. Анализ роли нитратов в развитии симбиотических клубеньков у L.japonicus ........................................................................................................ 3133.10. Изучение изменений в характере экспрессии генов Rhizobiumleguminosarum bv. viciae при реализации генетической подпрограммыинфекции тканей клубенька ризобиями у гороха ........................................
3173.10.1. АнализэкспрессиипозднихсимбиотическихгеновR.leguminosarum bv. viciae nifA, fnrN и fixN в клубеньках серии Fix−мутантов гороха ............................................................................................ 3173.10.2. Анализ паттернов экспрессии ризобиальных симбиотическихгенов nodA и dctA на различных стадиях развития клубенька гороха.... 3223.10.2.1. Анализ уровней экспрессии генов nodA и dctA вклубеньках гороха ...................................................................................
3263.10.2.2. Количество культивируемых бактерий из клубеньковгороха........................................................................................................ 3323.11. Изучение проявления защитных реакций со стороны растения приреализации поздних этапов генетической программы симбиогенеза ........ 3343.11.1. Иммуноцитологическаялокализациянизко-метилированногопектина в стенках инфекционных нитей в симбиотических клубенькахнеэффективных мутантов гороха ...............................................................
3343.11.2. Гистохимическая локализация отложений суберина и каллозы всимбиотических клубеньках неэффективных мутантов гороха.............. 3373.11.3. Анализ уровнейтранскриптов генов7RA84 (пероксидаза),HSR203J (маркер реакции гиперчувствительности), и ABR17 (белокPR10) с помощью ПЦР в реальном времени ............................................. 3413.12. Изучение финальной стадии дифференцировки клубеньков —старения,завершающейреализациюгенетическойпрограммысимбиогенеза ....................................................................................................
3493.12.1. Гистологическая и ультраструктурная организация клубеньков умутантов SGEFix−-3 (Pssym26) и SGEFix−-7 (Pssym27) ........................... 3503.12.2. Анализуровнейтранскриптовгенов,ассоциированныхсостарением, в клубеньках дикого типа SGE и мутантных линий ............. 3553.12.2.1. Гены цистеиновой протеазы 1 (PsCyp1), цистеиновойпротеазы 15a (PsCyp15a) и тиоловой протеазы (PsTPP) ..................... 3553.12.2.2. Ген, кодирующий bZIP транскрипционный фактор(PsATB2) .................................................................................................. 3563.12.2.3.
Гены, 1-аминоциклопропан-1-карбоксилат синтазы 2(PsACS2) и 1-аминоциклопропан-1-карбоксилат оксидазы 1 (PsACO1)................................................................................................................... 3573.12.2.4. Ген, кодирующий альдегид оксидазу 3 (PsAO3) ........ 3583.12.3. Транскрипционные паттерны ассоциированных со старениемгенов в клубеньках дикого типа SGE и мутанта SGEFix−-7 (Pssym27),определенные с помощью лазерной микродиссекции ............................. 3593.12.4. Иммунолокализация АЦК в клубеньках дикого типа SGE имутантах ........................................................................................................ 3653.13. Получение генетической модели для исследования влияния кадмия наразвитие симбиотических клубеньков у гороха ...........................................
3743.13.1.ЭМСмутагенезискринингмутантовсповышеннойустойчивостью к кадмию ............................................................................ 3743.13.2. Гибридологический анализ мутанта с повышенной устойчивостьюк кадмию ........................................................................................................