Диссертация (Влияние глутоксима и моликсана на внутриклеточную концентрацию Са2+ в макрофагах роль каскада метаболизма арахидоновой кислоты и актинового цитоскелета), страница 12
Описание файла
Файл "Диссертация" внутри архива находится в папке "Влияние глутоксима и моликсана на внутриклеточную концентрацию Са2+ в макрофагах роль каскада метаболизма арахидоновой кислоты и актинового цитоскелета". PDF-файл из архива "Влияние глутоксима и моликсана на внутриклеточную концентрацию Са2+ в макрофагах роль каскада метаболизма арахидоновой кислоты и актинового цитоскелета", который расположен в категории "". Всё это находится в предмете "биология" из Аспирантура и докторантура, которые можно найти в файловом архиве СПбГУ. Не смотря на прямую связь этого архива с СПбГУ, его также можно найти и в других разделах. , а ещё этот архив представляет собой кандидатскую диссертацию, поэтому ещё представлен в разделе всех диссертаций на соискание учёной степени кандидата биологических наук.
Просмотр PDF-файла онлайн
Текст 12 страницы из PDF
Кроме того,существуют данные обэффективности этогопрепарата в леченииугревой болезни (акне)(Zouboulis, 2009).Каффеиковая (кофейная, 5-ЛОГ(Sud’ina et al.,3,41993; Сhung etдигидроксициннамовая)al., 2004) и 15кислота (Caffeic acid)ЛОГ (Sud’inaet al., 1993)-ЛОГНордигидрогуаретиковая Все(Needleman etкислота(Nordihydroguaiaretic acid) al., 1986).-Соединенияпродуцируютсявомногихрастениях,включаякофейноедерево(Сoffeaarabica),базилик(Ocimumbasilicum),чабрец(Thymusvulgaris),розмарин(Rosmarinus officinalis)и др.Фенилэтиловый эфиркаффеиковой кислоты- активный компонентпчелиного прополиса.Мощныеантиоксиданты,ингибируютобразование активныхформкислородаксантиноксидазой(Sud’ina et al., 1993).Противовоспалительноевоздействие(ингибированиебиосинтезалейкотриенов)(Koshihara et al., 1984).Противоопухолевыйэффект:подавлениероста,инвазиииметастазирования засчётсниженияактивноститранскрипционногофактора NF-κB (Сhunget al., 2004).Лигнан из стеблей илистьев креозотовогокуста(Larreatridentata).Противовоспалительноевоздействие.Противоопухолевыйэффекти59антиоксидантныесвойства (ингибируетобразование активныхформкислорода;восстанавливает пулGSH в клетке, а такжеактивностьтакихантиоксидантныхферментов,каксупероксиддисмутаза,глутатионпероксидаза,каталаза) (Rahman etal., 2009).α-Токоферол (Витамин Е;Alfa-Tocopherol)5-ЛОГЭскулетин (Esculetin)5- и 12-ЛОГ(Neichi et al.,1983).Альфа-токоферолаацетат,Токофер,Эвион, Эвитал, СантЕ-Гал, Форвитале идр.(Машковский,2005).Жирорастворимыйвитамин.
Источники:зелёныечастирастений(особенномолодыеросткизлаков), растительныемасла (подсолнечное,оливковое, хлопковое,кукурузное,арахисовое,соевое,облепиховое),мясо,жир, яйца, молоко.Антиоксидантнаяактивность (тормозитсвободнорадикальныепроцессы,предотвращаетобразованиепероксидов);стимулируетсинтезгема и гемсодержащихферментов, улучшаеттканевоедыхание,ингибируетсинтезхолестерина,нормализуетрепродуктивнуюфункцию(Машковский, 2005).-Соединение из семянмолочая(Euphorbialathyris).Противовоспалительное воздействие за счётингибированиясинтеза лейкотриенов(Neichi et al., 1983).60Противоопухолевыйэффект.Антиоксидантныесвойства – улавливаетактивныеформыкислорода(MartinEragon et al., 1998).4.
Ингибиторы эпоксигеназного пути - синтетические противогрибковыепрепаратыК этой группе препаратов относятся синтетические производные имидизола и триазола,ингибирующие Р450-монооксигеназную систему. Активны в отношении широкого спектрагибковых инфекций, также могут оказывать антибактериальное действие, направленное настафиллококки и стрептококки. Антимикотический эффект связан с нарушением цитохромР450-зависимого синтеза эргостерина, который необходим для образования клеточноймембраны грибов (Машковский, 2005).Р450Итраконазол,ПротивогрибковыйИтраконазолмонооксигеназ- Каназол,Орунгал, препаратширокого(Itraconazole)наясистема Споранокс.спектрадействия.(эпоксигеназы),Применяетсяпри5-ЛОГкандидозе различнойлокализации,онихомикозах, лишае,споротрихозе,бластомикозе и т.д.(Машковский, 2006).Было установлено, чтоитраконазолингибирует биосинтезлейкотриеноввнейтрофилах и, какследствие,рассматривается(нарядуспозаконазолом)вкачествеперспективногопротивовоспалительного агента (Steel et al.,2007, 2009).Р450КетоконазолПрименяется противКетоконазолмонооксигеназ- Низорал, Ороназол, дерматофитов,(Ketoconazole)наясистема Микозорал, Candoral, дрожжеподобных (род(эпоксигеназы) Cetonax, Fungocin и Candida) и плесневыхдр.грибов, возбудителейсистемных микозов,лейшманий(Машковский, 2005).61Клотримазол(Clotrimazolum)Р450Клотримазол,монооксигеназ- Антифунгол,наясистема Викадерм,Гине(эпоксигеназы) Лотримин, Имидил,Йенамазол,Кандибене, Кандид идр.Миконазол (Miconazole)Р450Миконазол, Гинезолмонооксигеназ- 7,Гино-Дактанол,наясистема Гино-Дактарин,(эпоксигеназы) Микозон, Дактанол,Дактарин,Дактодерм, Ланадерми др.Эконазол (Econazole)Р450Эконазол,Гиномонооксигеназ- Певарил,Ифенек,наясистема Экалин, Экодакс и(эпоксигеназы) др.(Машковский,2005).Широкийспектрпротивогрибковойактивности:применяется противпатогенныхдерматофитов,дрожжевыхгрибов,возбудителейразноцветного лишаяиэритразмы.Антибактериальноевоздействиенастафилококкиистрептококки(Машковский, 2005).Активен в отношениидерматофитов, кандидинекоторыхграмположительныхбактерий(Машковский, 2005).Эффективенвотношениидерматофитов,плесневыхгрибов,некоторыхграмположительныхбактерий(стафилококки,стрептококки)(Машковский, 2005).622.3.
Структурно-функциональная организация актиновогоцитоскелета2.3.1. Структура мономерного и полимеризованного актинаАктин – это один из наиболее многочисленных и наиболее консервативных белковэукариотической клетки (Domingues, Holmes, 2011; Gellert et al., 2015).
Актин присутствует вцитозоле в двух формах: мономерный (глобулярный) G-актин ( 42 кДа, 375 аминокислот) и Fактин, который представляет собой актиновые филаменты (микрофиламенты) (Gellert et al.,2015).Актиновые филаменты принимают участие в таких процессах жизнедеятельности, какмышечное сокращение, направленное движение клеток при помощи ламеллоподий, делениеклеток и цитокинез, транспорт везикул и органелл, внутриклеточная сигнализация, а такжеформирование межклеточных контактов (Doherty, McMahon, 2008). Многие из этих функцийактина опосредованы взаимодействием микрофиламентов с плазмалеммой и другимиклеточными мембранами (Doherty, McMahon, 2008).Актин относится к одному суперсемейству с белками теплового шока hsp70 (heat shockproteins 70) и киназами, фосфорилирующими молекулы углеводов, а также актиноподобнымибелками прокариот (sugar kinase/ hsp70/ actin superfamily) (Hurly, 1996).
В клетках и тканяхпозвоночных экспрессируются 3 изоформы актина. Так, α-актин характерен для скелетных,гладких мышц и миокарда, а β- и γ-актин экспрессируются в немышечных и некоторыхмышечных клетках (Domingues, Holmes, 2011). Изоформы различаются между собой всего понескольким аминокислотам, локализованным в пределах N-терминального фрагмента белковойцепи.Традиционно в молекуле G-актина выделяют 4 субдомена (subdomain 1 - 4) (рис.
19а)(Graceffa, Domingues, 2003; Domingues, Holmes, 2011). В то же время при помощи электронноймикроскопии в актиновой цепи были визуализированы два α/β-домена. В соответствии с ихрасположением в микрофиламенте и размером, эти домены называют внешним (outer domain)/малым (small domain) и внутренним (inner domain)/ большим (large domain) (Graceffa,Domingues, 2003; Domingues, Holmes, 2011). Между доменами располагается двойнойшарнирный участок (hinge), который состоит из петли, содержащей остаток Lys336, и спиралиGln137-Ser145.
Таким образом, между доменами мономера актина образуются две щели (clefts)(Graceffa, Domingues, 2003; Domingues, Holmes, 2011). Верхняя щель (upper cleft) служит сайтомсвязывания нуклеотидов (АТФ, АДФ) и двухвалентных катионов. Нижняя щель (lower cleft),выстланная преимущественно гидрофобными аминокислотами, представляет собой основной63участоквзаимодействиясактин-связывающимибелками,атакжеобеспечиваетдолговременные взаимодействия между мономерами актина в микрофиламенте (Graceffa,Domingues, 2003; Domingues, Holmes, 2011).
Тесный контакт этих участков G-актинаобеспечивает изменение конформации актина при полимеризации и деполимеризации,регулируемое нуклеотидами и актин-связывающими белками (Graceffa, Domingues, 2003;Domingues, Holmes, 2011).Актиновые филаменты (F-актин) представляют собой правозакрученные двойныеспирали, в которых мономеры ориентированы «голова к хвосту» (head-to-tail), что обеспечиваетполярность полимера (рис.
19б) (Pollard, Borisy, 2003; Domingues, Holmes, 2011). Так, одинконец полимерной цепи называется «оперённым» (barbed end, (+) конец), а другой –«заострённым» (pointed end, (-) конец). Удлинение филамента происходит на «оперённом»конце, который ориентирован к периферии клетки (Pollard, Borisy, 2003; Domingues, Holmes,2011).Полимеризация G-актина в F-актин включает три основных этапа: 1) быстрая активациямономеров (связывание комплекса Mg-АТФ); 2) нуклеация – этап, лимитирующий скоростьпроцесса; 3) умеренно быстрая элонгация (Dalle-Donne et al., 2003 a).Спонтаннаяассоциацияактиновыхмономеровэнергетическиневыгоднаиз-занестабильности димеров и тримеров актина, однако, если она происходит, то дальнейший ростфиламента происходит очень быстро (Pollard, Borisy, 2003).
Связывание комплекса Mg-АТФ сG-актином стабилизирует мономер и способствует его встраиванию в микрофиламент (Pollard,Borisy, 2003). Присоединение мономеров на «оперённом конце» ограничено скоростьюдиффузии, причём всего 2% взаимодействий между мономерами приводят к их правильнойвзаимной ориентации и образованию межбелковой связи.
Скорость элонгации прямопропорциональна концентрации мономеров в растворе (Pollard, Borisy, 2003).Полимеризованный актин обладает выраженной АТФазной активностью, причёмгидролиз АТФ и диссоциация γ-фосфата представляет собой внутренний таймер, которыйопределяетвозрастмикрофиламентаисрокегодеполимеризации.ГидролизАТФполимеризованным актином – это один из ключевых факторов, регулирующих переход междуF- и G-актином (Domingues, Holmes, 2011).
Мономеры АДФ-актина постепенно отщепляютсяот филамента, причём, диссоциация идёт быстрее на заострённом конце. Таким образом,диссоциация АДФ-актина на оперённом конце и присоединение АТФ-актина на заострённомобеспечивают протекание очень медленного процесса под названием «treadmilling» («сучениенити») (Pollard, Borisy, 2003).64Рис. 18.
Cтруктура глобулярного и фибриллярного актина(по Domingues, Holmes, 2011 с модиф.)(a) Трёхмерная структура мономерного актина. Молекула G-актина содержит субдомены1 – 4 (цифры 1 - 4), которые образуют два домена. Между доменами располагается шарнирныйучасток (Hinge region, оранжевый) и две большие щели: нуклеотидная щель (Nucleotide cleft), скоторой связываются молекулы АТФ и АДФ, и щель связывания с мишенью (Target-bindingcleft).