Автореферат (Экспрессия генов транскрипционных факторов LXRalpha, LXRbeta, PPARgamma и транспортера ABCA1 при атеросклерозе), страница 4

Более того установлено, что LXR ингибируют атеросклероз in vitro и invivo (Calkin et al., 2012). При этом было продемонстрировано, что активацияLXR увеличивает ОТХ за счет усиления экспрессии транспортеров ABCA1и ABCG1 в макрофагах, что отражает механизм LXR-зависимой защиты отатеросклероза (Calkin et al., 2012). В целом наши результаты согласуютсяс этими данными, указывающими на то, что влияние LXR может не оказыватьсущественного влияния на уровень ABCA1 и антиатерогенный потенциал LXRможет реализоваться путем воздействия на воспалительные процессы (Kappuset al., 2014).В нашем исследовании установлено сниженное содержания мРНК LXRβв макрофагах, активированных M-CSF, после 5 суток культивированияу пациентов с атеросклерозом по сравнению с контрольной группой, в то времякак в содержании мРНК LXRα разница не показана, что можетсвидетельствовать о влиянии экспрессии LXRβ в развитии атеросклероза.В недавней работе Shchelkunova с соавт.

было показано увеличениеэкспрессии гена LXRβ в макрофагах, нагруженных модифицированнымиЛПНП, по сравнению с контрольными макрофагами (Shchelkunova et al., 2013).Необходимо отметить, что взаимодействие с модифицированными ЛПНПсущественно усиливает воспалительный потенциал макрофагов и дальнейшуюаккумуляцию липидов. Также влияние повышенной концентрации эфиров ХСв клетке на уровень экспрессии генов ядерных рецепторов LXR подтверждаетсяв работе Albrehch с соавт. Так, в атеросклеротических бляшках сосудов уровеньмРНК гена LXRα был повышен по сравнению со здоровыми артериями18(Albrecht et al., 2004).

Таким образом, данные о взаимосвязи уровня экспрессиигенов LXR и уровня ХС в клетке могут объяснять снижение содержания мРНКLXRβ в макрофагах у пациентов с атеросклерозом по сравнению с контрольнойгруппой.Суммируя полученные результаты, можно предположить, что уровниэкспрессии генов LXRß и PPARγ в макрофагах могут быть значимымифакторами, ассоциированными с развитием атеросклероза.При анализе вклада уровня мРНК ABCА1, LXRα, LXRβ, PPARγ, MMP-9и уровня белка ABCА1 в макрофагах, активированных M-CSF, на развитиеатеросклероза была оценена их корреляция с показателями липидного обмена.В контрольной группе была обнаружена прямая корреляция уровня мРНКABCA1 в макрофагах с уровнем Х-ЛПВП (коэффициент корреляции r = 0,74,p < 0,05), которая отсутствовала в группе пациентов.

Не обнаруженовыраженных корреляций между уровнем Х-ЛПВП и уровнем белка ABCA1в макрофагах и у лиц контрольной группы, и у пациентов.Известно, что лица с экстремально низкими уровнем Х-ЛПВП плазмыкрови (менее 0,9 ммоль/л у мужчин, менее 1,1 ммоль/л у женщин)характеризуются пониженным уровнем экспрессии гена ABCA1 в макрофагах(Holven et al., 2013).

Действительно, в настоящее время опосредованныйтранспортером ABCA1 отток ХС рассматривается как один из ключевыхмоментов образования пре-β-ЛПВП и, следовательно, концентрации Х-ЛПВПв плазме крови (Oram, 2002). При дефекте транспортера ABCA1 обедненныелипидами частицы апо АI не трансформируются в пре-β-ЛПВП и далеев нативную форму ЛПВП. Было отмечено, что нокаут ABCA1 в тонкомкишечнике мышей сопровождался снижением уровня Х-ЛПВП на 30 %, а приодновременном нокауте ABCA1 как в тонком кишечнике, так и в печениуровень Х-ЛПВП уменьшился на 90 % (Brunham et al., 2006).Таким образом, вышеизложенные результаты могут указывать на то, чтовысокий уровень экспрессии ABCA1 может индуцировать образование частицЛПВП (Denis et al., 2003), однако механизм влияния уровня мРНК ABCA1в макрофагах на уровень Х-ЛПВП в плазме крови остается не до концаизученным.ЗАКЛЮЧЕНИЕБыло показано, что вариант G319 гена АВСА1 снижает относительный рискразвития атеросклероза у жителей Санкт-Петербурга.

Был определен уровеньмРНК генов ABCА1, LXRα, LXRβ, PPARγ и MMP-9 в макрофагах,19активированных М-CSF, у пациентов с атеросклерозом и у лиц без ССЗ. Былоустановлено повышение уровня мРНК ABCА1 и MMP-9 и снижение уровнямРНК LXRβ и PPARγ в макрофагах больных атеросклерозом по сравнениюс контрольной группой. Полученные результаты указывают, что уровеньэкспрессии данных генов может быть значимым фактором в развитииатеросклероза и может представлять мишень для антиатерогенной терапии.Выявленное в настоящем исследовании достоверное снижение уровня белкаABCA1 в группе пациентов с атеросклерозом по сравнению с контрольнойгруппой может отражать важность посттрансляционных модификаций данноготранспортера и свидетельствовать о его повышенном уровне деградациив макрофагах при атеросклерозе.ВЫВОДЫ1.

Носительство аллели G319 гена АВСА1 ассоциировано со снижениемотносительного риска развития атеросклероза (OR = 0,55; df = 1, (95 % ДИ:0,86–0,35) в популяции Санкт-Петербурга.2. Выявлены изменения уровней мРНК генов ABCА1, MMP-9 и геновтранскрипционных факторов LXRβ и PPARγ в макрофагах, активированныхМ-CSF. У больных атеросклерозом наблюдалось повышение уровнятранскриптов генов ABCА1, MMP-9 и понижение уровня транскриптов геновLXRβ и PPARγ по сравнению с контрольной группой.3. Определение уровня белка ABCA1 в макрофагах, активированныхМ-CSF, выявило достоверное снижение содержания белка ABCA1 у пациентовс атеросклерозом по сравнению с контрольной группой.4.

Показано наличие обратной корреляции между уровнем мРНК генаMMP-9 и уровнем белка ABCA1 в макрофагах, активированных М-CSF,у пациентов с атеросклерозом (r = –0,79, p < 0,05).5. Была выявлена корреляция между уровнем мРНК гена ABCA1в макрофагах, активированных М-CSF, и уровнем Х-ЛПВП в плазме кровив контрольной группе (r = 0,74, p < 0,05).СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ1. Родыгина Т. И. Влияние вариантов генов АВСА1 транспортераи параоксоназы 1 на риск развития и тяжесть течения атеросклероза /Т.

И. Родыгина, Е. П. Демина, А. М. Шейдина, В. В. Зверева, П. С. Курьянов,В. Н. Вавилов, А. Л. Шварцман, А. Д. Денисенко, С. Н. Пчелина // Регионарноекровообращение и микроциркуляция. – 2007. – Т. 4. – № 24. – С. 21–28.202. Демина Е. П. Экспрессия гена-транспортера ABCA1 в лимфоцитахи макрофагах периферической крови больных атеросклерозом / Е. П. Демина,В. В. Мирошникова,Т. И. Родыгина,П. С. Курьянов,А. Г. Виноградов,А. Д. Денисенко, А. Л. Шварцман // Молекулярная биология.

– 2011. – Т. 45. –№ 2. – С. 289–293.3. Демина Е. П. мРНК гена ABCA1 и уровень белка ABCA1в макрофагах, активированных М-CSF, у пациентов с артериальным стенозом /Е. П. Демина,В. В. Мирошникова,Н. В. Майоров,В. В. Давыденко,А. Л. Шварцман // Цитология. – 2013. – Т. 55. – № 8. – С. 580–585.4. Демина Е. П.

Снижение уровня LXRΒβ мРНК и PPARγ мРНКв макрофагах, стимулированных колониестимулирующим фактором М-CSFу больных атеросклерозом / Е. П. Демина, В. В. Мирошникова, Н. В. Майоров,В. В. Давыденко, А. Л. Шварцман // Экологическая генетика. – 2014. – Т. 12. –№ 1. – С. 14–18.Тезисы:1. Demina E., Rodygina T., Zvereva V., Kurianov P., Denisenko A., Sheydina A.ABCA1 Transporter in Atherosclerosis Development // 4th Congress of theAssociation of Cardiologists and Angiologists of Bosnia and Herzegovina. Mostar,Bosnia and Herzegovina, May, 2007. P.

98.2. Demina Е., Rodygina T., Kurianov P., Denisenko A., Sheydina A. Expressionof ABCA1 Transporter in Atherosclerosis // Conference for Young Scientists, PhDStudents and Students on Molecular Biology and Genetics, Dedicated to120th Anniversary of M. I. Vavilov. Kiev, Ukraine, September 20–22, 2007. P. 57.3. Демина Е. П.,Родыгина Т. И.,Курьянов П. С.,Виноградов А. Г.,Денисенко А. Д., Шварцман А.

Л. Генетические варианты АВСА1 транспортера вразвитии атеросклероза // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2008.Т. 7. № 6. С. 113–114.4. Demina E., Rodygina T., Sheydina A., Denisenko A., Shvarcman A.Association Between ABCA1 Transporter mRNA Level and Atherosclerosis //European Human Genetics Conference 2008. Barcelona, Spain, May 31 – June 03,2008. European Journal of Human Genetics. 2008. V. 16.

Suppl. 2. P. 294.5. Демина Е. П., Родыгина Т. И., Шварцман А. Л. Влияния уровняэкспрессии АВСА1 и генетических вариантов АВСА1 транспортера в развитииатеросклероза // Біологія: від молекули до біосфери. МатериалыIII Международной конференции молодых ученых. Харьков, Украина,18–21 ноября 2008. С. 85.6. Демина Е. П.,Курьянов П. С.,Зверева В. В.,Виноградов А. Г.,Шварцман А. Л. Обратный транспорт холестерина и развитие атеросклероза //21Материалы Съезда генетиков и селекционеров России, посвященного200-летию со дня рождения Ч. Дарвина, и V съезда Вавиловского обществагенетиков и селекционеров. Москва, 21–28 июня 2009.