Диссертация (Современные методы контроля качества зубных паст и ополаскивателей лечебно-профилактического назначения), страница 11

Пик на хроматограммеидентифицируют по масс-спектру, а интегрирование по площадям пиков избранных ионов илипиков избранных реакций образования конкретного иона позволяет количественное определятькомпонент при неполном разделении пиков на хроматограмме;идентификация примесей и установление неизвестной структуры;количественное определение следовых количеств веществ в фармакокинетике иметаболомике;количественное определение более 70 элементов с пределами измерения от 10 до0,1 ppt (parts per trillion) методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой.Также стоит отметить такие преимущества масс-спектрометрии (МС), как высокаячувствительность, исключительно малый объем анализируемой смеси для проведения37испытания, крайне высокая скорость получения данных (скорость сканирования), огромноеколичество данных по окончанию эксперимента, относительная простота конструкции прибораи невысокая стоимость в сравнении с полученным объемом готовой информации [77].Таким образом, широкая распространенность таких современных физико-химическихметодов, как ГХ и ГХ-МС, и включение их в виде новых или отредактированных общихфармакопейных статей в состав ГФ XIII издания говорит о совершенствовании и разработкеновых методик в рамках фармацевтического анализа по различным критериям: сокращениютрудоемкости, быстрому отклику при мониторинге по типу on-line, надежности, селективностиопределения и повышению его чувствительности, снижению финансовых затрат, повышениюпроизводительности и т.

д.Безусловно, ГФ имеет законодательный характер в фармацевтической промышленности,так как определяет контрольные функции: на основании данных анализа делается вывод осоответствии лекарственного средства требованиям фармакопеи и решается вопрос овозможности его применения в медицинской практике. Но помимо ГФ в стране действуют ряднациональных стандартов, в которых также отражены показатели качества на разного родапродукцию и методы их контроля.Качество ЭМ регламентируется целым перечнем стандартов, однако в рамках даннойдиссертации будут рассмотрены лишь несколько из них, где приведены показатели качества,характеризующие состав ЭМ, и соответствующие методы анализа. Разработка, опубликование иприменение этих документов – это результат стандартизации, деятельности, направленной надостижение оптимальной степени упорядочения в определенной области посредствомустановления положений для всеобщего и многократного применения в отношении реальносуществующих и потенциальных задач [45].

Межгосударственные стандарты ГОСТ ISO 76092014 «Масла эфирные. Анализ методом газовой хроматографии на капиллярных колонках.Общий метод» [12], ГОСТ ISO 11024-1-2014 «Масла эфирные. Общее руководство похроматографическим профилям. Часть 1. Подготовка хроматографических профилей дляпредставления в стандартах» [8], ГОСТ ISO 22972-2014 «Масла эфирные. Анализ методомгазовой хроматографии на хиральных капиллярных колонках.

Общий метод» [10], идентичныемеждународным стандартам ISO и введенные в действие в качестве национальных стандартов вРФ и других странах Содружества Независимых Государств (СНГ) с 1 января 2016года,подтверждают актуальность и целесообразность применения ГХ как основного современногометода контроля качества ЭМ. Из определения ЭМ следует, что они представляютмногокомпонентные смеси, однако определение всех их составляющих является сложной,крайне трудоемкой и ненужной задачей.

По этой причине в ГФ XIII издания указано наличиепреобладающего класса БАВ, терпенов и их производных, определение отдельных соединений38которых является информативным и достаточным для оценки качества конкретных ЭМ.Примерами подобных ситуаций служат две частные статьи в ГФ X издания: 475 «Маслоэвкалиптовое» (Oleum Eucalypti) и 477 «Масло мяты перечной» (Oleum Menthae piperitae).Показатели качества масел, заложенные в данных статьях, представлены в таблице 1.Таблица 1 – Показатели качества статей 475 «Масло эвкалиптовое» (Oleum Eucalypti) и 477«Масло мяты перечной» (Oleum Menthae piperitae) в ГФ X изданияПоказатель качества ЭМ475 «Масло эвкалиптовое»477 «Масло мяты перечной»(Oleum Eucalypti)(Oleum Menthae piperitae)легкоподвижная прозрачнаялегкоподвижная прозрачнаяжидкостьжидкостьлегко растворимо в 95%легко растворимо в 95%спиртеспиртеПлотность0,910 – 0,9300,900 – 0,910Угол вращенияот 00 до +100не менее – 180Показатель преломления1,458 – 1,4701,459 – 1,470Кислотное число–не более 1,30Эфирное число–не менее 11,5Содержание влаги–не допускаетсяцинеола не менее 60%ментола не менее 46%ОписаниеРастворимостьКоличественное определениеИз данных таблицы 1 видно, что ЭМ практически идентичны по определяемымпоказателям качества (описание, растворимость, угол вращения, показатель преломления,количественное определение, хранение), за исключением некоторых (кислотное число, эфирноечисло, содержание влаги), которые указаны исключительно для масла мяты перечной.

В разделе«Количественное определение» указана методика по определению содержания БАВ и их нижнихграниц нормы. Так для листьев эвкалипта шарикового (Eucalyptus globulus Labill.) и других видовэвкалипта определяют содержание цинеола, которое должно быть не менее 60% по объему. Адля листьев мяты перечной (Mentha piperita L.) данная процедура проходит в 2 этапа: 1)определение содержания свободного ментола, которое должно быть не менее 46%; 2)суммирование процентного содержания свободного ментола и процентного содержаниясложных эфиров, в результате чего получают общее содержание ментола, которое должно бытьне менее 50% [14]. Таким образом, можно сказать, что определение качества ЭМ проводят путемустановления содержания его основного действующего компонента. В этой связи отличительнойособенностью ГОСТ ISO 11024-1-2014 является использование понятийного аппарата,включающего такие термины, как репрезентативные компоненты, характерные компоненты,39типичная хроматограмма, хроматографический профиль.

Разбор указанных выше понятийпроисходит на примере химического состава ЭМ герани разных сортов, что явно говорит онеобходимости соответствующего стандарта на данное масло. В соответствии с ГОСТ ISO 110241-2014 под репрезентативными компонентами понимают компоненты, присутствующие во всехпробах эфирного масла, вне зависимости от доли.

Так к последним можно отнестигеранилформиат, изоментон, цитронеллол, гераниол и другие вещества ЭМ герани. Подхарактерными компонентами понимают один или более репрезентативных компонентов,концентрация которых является характерной для данного эфирного масла, при этомконцентрация может быть нулевой. Так в Africa geranium гвайа-6,9-диен присутствует внезначительном количестве, а в Bourbon geranium – в большом; 10-эпи-гамма-эудесмолотсутствует в Bourbon geranium и присутствует в Africa geranium.

Под хроматографическимпрофилем понимают перечень компонентов эфирного масла, выбранных из репрезентативных ихарактерных, а также предельные значения концентрации каждого из них, и, возможно,отношения таких концентраций. «Он также является одной из характеристик ЭМ, которая нарядус физико-химическими характеристиками позволяет выполнить оценку его качества, котораяопределяется на последнем этапе работы над стандартом на ЭМ. По хроматографическомупрофилю не определяют действительную концентрацию компонентов, а только оценивают ихотносительные доли», следовательно, его внедрение связано с качественным анализом.

Для егоразработки необходимо провести анализ проб ЭМ с помощью газовой хроматографии накапиллярнойколонкеспламенно-ионизационнымдетектором.Результатомданногоаналитического исследования станут выбранные экспериментальным путем репрезентативные ихарактерные компоненты, которые в дальнейшем позволят отличить чистые эфирные масла,имеющие хорошие органолептические характеристики, от загрязненных, или от масел другихбиологических видов, или масел растений, произрастающих в разных климатических условиях[2, 8].Следует отметить, что попытки выделения указанных выше веществ, позволяющихнадежно идентифицировать как ЛРС, так и препараты на его основе, предпринимались вфармацевтических исследованиях [22, 44], однако до настоящего времени предлагаемыеавторами термины: индикаторные компоненты или вещества-маркеры не нашли широкогораспространения в научной литературе и нормативной документации.

Под индикаторнымикомпонентами понимают вещества, специфичные для данного вида растительного сырья ииспользуемые для оценки его качества и подлинности. В свою очередь вещества-маркерыподразделяются на приоритетные и специфические. Большинство маркеров относятся к первойгруппе согласно четырем основным критериям: 1) значительному содержанию (от десятых долейдо десятков процентов); 2) биологической активности; 3) возможности перехода в продукты40переработки ЛРС; 4) наличию стандартных образцов для анализа [44].

Также в диссертацииКузьменко А.Н. есть раздел «Стандартизация эфирных масел», в котором также рекомендуетсявключить в частную статью на конкретное ЭМ описание метода количественного определенияодного или нескольких компонентов ЭМ (веществ-маркеров) и установить нормы их содержания[2, 22]. Таким образом, определение преобладающих, репрезентативных, или характерныхвеществ как в самом ЭМ, так и в ЛС или продукции на его основе является информативнымпоказателем качественного анализа.В ГОСТ ISO 7609-2014 приведен общий метод анализа ЭМ (ГХ на капиллярных колонках)для определений содержания именно специфических составляющих и/или исследованияхроматографического профиля.

С его помощью проводят идентификацию различныхкомпонентов с помощью индексов удерживания и количественное определение специфичныхкомпонентов путем измерения площадей пиков [12]. В ГОСТ ISO 22972-2014 указан тот же методтолько на хиральных капиллярных колонках с целью определения удельного энантиомерногоизбытка или разделения хиральных соединений, содержащихся в ЭМ. Существованиеэнантиомерных форм связано с наличием у молекулы хиральности, свойства не совпадать впространстве со своим зеркальным отражением. Большинство хиральных природныхсоединений существует в виде одного энантиомера. Понятие энантиомерии играет важную рольв фармации, поскольку разные энантиомеры лекарственных веществ, как правило, имеютразличную биологическую активность [10]. В ближайшее время, 1 января 2017 года, вступит всилу принятый ГОСТ ISO 11024-2-2015. «Масла эфирные.

Общее руководство похроматографическим профилям. Часть 2. Применение хроматографических профилей пробэфирных масел», в котором описаны общие рекомендации по определению соответствияхроматографического профиля пробы эфирного масла контрольному хроматографическомупрофилю, представленному в стандарте на это масло [9]. Таким образом, можно сказать, что ГХ– официально признанный современный фармакопейный метод анализа ЭМ, а также методстандартов международного, регионального и национального значения.