Автореферат (Экспериментально-теоретическое исследование лекарственного растительного сырья, содержащего нафтохиноны, и его стандартизация), страница 2

В частности, отсутствуют унифицированные отработанныеметодики анализа нафтохинонов в ЛРС, фармацевтических субстанциях и ЛРП,стандартные образцы (СО), идентичные анализируемым компонентам. Недостаточно исследован ресурсный потенциал дикорастущих растительных объектов. Не разработаны или не актуализированы нормативные и технические документы на соответствующее ЛРС, а также мало изучены направления технологических подходов к его переработке и созданию на его основе суммарных илиочищенных ЛРП. В ряде случаев, например, для видов рода Onosma,сем. Boraginaceae, это объясняется недостаточной изученностью объекта; вдругих – виды рода Juglans, сем. Juglandaceae – исследования носят несистемный характер, а стандартизация направлена на продукты переработки ЛРС ичасто на другие группы БАВ.Обоснование использования в медицине ЛРС, содержащего нафтохиноны, недостаточно подкреплено современными экспериментальными данными,не систематизировано, а для подавляющего числа объектов практически отсутствует.

Сходство химической структуры, основных физико-химическихсвойств, включая минорный характер содержания в растениях, требуют выработки единых методологических подходов к исследованию ЛРС, содержащегонафтохиноны, с целью наибольшей реализации его лекарственного потенциала.Цель исследованияЦелью работы является теоретическое и экспериментальное обоснованиеметодологического подхода к исследованию и стандартизации ЛРС, содержащего нафтохиноны.Задачи исследования:1. Провести информационно-аналитическое исследование перспективныхсырьевых источников, содержащих нафтохиноны.2. Обосновать использование ЛРС, содержащего нафтохиноны, для получения новых ЛРП, учитывая применительно к комплексу БАВ зависимость«структура – активность».73.

Разработать технологию получения стандартных образцов нафтохинонов,изучить показатели и нормы их качества.4. Разработать новые и усовершенствовать имеющиеся методики качественного и количественного анализа нафтохинонов в ЛРС, фармацевтических субстанциях и ЛФ, позволяющие осуществлять «сквозную» стандартизацию.5. Провести фитохимический анализ ЛРС.6.

Разработать технологию получения фармацевтических субстанций и лекарственных форм, содержащих нафтохиноны; экспериментально обосновать методики их стандартизации.7. Определить показатели подлинности, нормы качества, методы испытанийи разработать нормативную и техническую документацию на исследуемое ЛРС, фармацевтические субстанции, лекарственные формы.8. Разработать методологические подходы к исследованию и стандартизации ЛРС, содержащего нафтохиноны, и к получению из него фармацевтических субстанций и ЛРП.Научная новизна исследованияНа основании результатов теоретических и экспериментальных исследований получены новые данные о ЛРС, содержащем нафтохиноны.Впервые: разработаны методологические подходы к изучению лекарственных растений, содержащих нафтохиноны, и получению ЛРП на их основе; установлены закономерности в зависимости «структура – активность»нафтохинонов (дрозерона, лавсона, плюмбагина, филлохинона, химафилина, шиконина, его производных и юглона) методом компьютерного моделирования, установлены приоритетные направления изучения фармакологического действия, возможные побочные эффекты и токсическоедействие; предложены схемы получения СО нафтохинонов (выделение шиконинаиз ЛРС, синтез юглона), определены нормы их качества; разработаны оригинальные унифицированные методики анализа нафтохинонов в ЛРС, субстанциях, лекарственных формах и в составе БАД, позволяющие выдерживать принципы т.н.

«сквозной» стандартизации;8 установлены морфолого-анатомические диагностические признаки новыхдля отечественной медицины видов ЛРС: травы оносмы армянской, тр авы оносмы кавказской, травы оносмы шелковистой, листьев ореха серого,листьев ореха чёрного, коры ореха грецкого, коры ореха серого, корыореха чёрного, плодов ореха чёрного, корней синяка подорожникового,корней синяка обыкновенного; проведён сравнительный фитохимический анализ видов рода Onosma,Echium сем.

Boraginaceae, в результате которого определено содержаниесуммы нафтохинонов в пересчёте на шиконин в корнях оносмы кавказской, оносмы шелковистой, синяка подорожникового, синяка обыкновенного и синяка русского; проведён сравнительный фитохимический анализ представителей родаJuglans сем. Juglandaceae, в результате которого определено содержаниесуммы нафтохинонов в пересчёте на юглон в коре ореха грецкого, орехасерого, ореха чёрного, листьях ореха грецкого, ореха серого, ореха чёрного, плодах ореха грецкого, ореха чёрного; идентифицированы в траве оносмы армянской – лютеолин-7-глюкозид; втраве оносмы кавказской лютеолин-7-глюкозид, хлорогеновая кислота,эллаговая кислота, скополетин, мирицетин; в траве оносмы шелковистой – лютеолин-7-глюкозид, вератровая кислота, мирицетин; идентифицированы при анализе фенольных соединений в листьях орехагрецкого розмариновая кислота, мирицетин; в листьях ореха чёрного –гентизиновая кислота, умбеллиферон, вератровая кислота; при анализесостава эфирного масла в листьях ореха грецкого – 42 соединения, в листьях ореха чёрного – 38 соединений, в листьях ореха серого – 29 соединений; разработана технология получения фармацевтических субстанций и ЛФиз ЛРС, содержащего нафтохиноны (из корней синяка русского – экстракта, масляного раствора, мази и таблеток, из листьев ореха грецкого –таблеток, экстракта жидкого и сухого), определена возможность их стандартизации по содержанию этой группы БАВ.По материалам проведённых исследований получен 17.01.2017 патент 2608026 «Способ получения БАД из коры ореха», оформлена и подана для9государственной регистрации заявка на изобретение от 23.07.2015№ 2015130718 «Способ получения экстракта листьев ореха грецкого».Теоретическая и практическая значимость исследованияЭкспериментально и теоретически обоснована методология изученияЛРС, содержащего нафтохиноны как минорные и маркерные компоненты, ответственные за основные фармакологические свойства.

Анализ нафтохинонов вЛРС и ЛРП обеспечивает соблюдение принципа так называемой «сквозной»стандартизации при разработке ЛРП, что позволяет существенно расширить ассортимент используемых видов ЛРС в медицинской практике и фармации.Систематизированы сведения о биосинтезе природных производных1,4-нафтохинонов, в котором задействованы несколько сопряженных метаболических путей.Представлены данные о фармакологической активности нафтохинонов взависимости от структуры.

Методом компьютерного моделирования in silicoсоставлен прогноз биологической активности для некоторых наиболее распространенных природных нафтохинонов.Разработаны методологические схемы изучения лекарственных растений,содержащих нафтохиноны, и получения на их основе ЛФ, фармацевтическихсубстанций и ЛРП с учётом пути дальнейшего использования ЛРС: в нативномвиде или для получения суммарных субстанций, ЛРП и индивидуальных веществ-нафтохинонов.Определён научный подход к разработке методик анализа и выделенияиндивидуальных соединений нафтохинонов из ЛРС. На основании экспериментальных данных выявлена зависимость процедуры анализа от структуры илисостояния нафтохинонов, в которых они присутствуют в ЛРС, а также от их локализации в различных органах растения.В ходе фармакогностического исследования видов родов Echium иOnosma сем. Boraginaceae, рода Juglans сем.

Juglandaceae получены новыеданные о химическом составе, морфолого-анатомических диагностическихпризнаках, и методиках анализа, позволяющих осуществлять стандартизациюранее не использовавшегося в медицине ЛРС.Определено значение нафтохинонов, содержащихся в ЛРС, как группыБАВ, обусловливающей фармакологическую активность, в дальнейшем разви-10тии научных исследований в фармакогнозии, технологии лекарств, фармацевтическом анализе и фармакологии.По материалам научной литературы и с использованием собственных исследовательских данных написана и опубликована монография «Природныенафтохиноны: перспективы медицинского применения». Работа включена всписок литературы Дополнительной программы к кандидатскому экзамену поспециальности 14.04.02 фармацевтическая химия, фармакогнозия (кафедрафармакогнозии), утверждённую решением Ученого совета ПМФИ – филиалаФГБОУ ВО ВолгГМУ Минздрава России (протокол от 20.02.2013 № 7), используется при чтении лекций студентам и аспирантам, проведении практическихзанятий, а также в научных исследованиях, проводимых студентами, аспирантами и сотрудниками кафедр фармакогнозии ПМФИ – филиала ФГБОУ ВОВолгГМУ Минздрава России и ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России.Показана возможность получения фармацевтических субстанций и ЛФ,содержащих нафтохиноны.

Разработан промышленный регламент на произво дство субстанции «Крапивы экстракт жидкий», содержащей филлохинон, который внедрен в практику фармацевтического предприятия ЗАО «ВИФИТЕХ».Предложены схемы получения индивидуальных соединений – стандартных (референтных) образцов юглона и шиконина, которые, заменяя импортныеаналоги, могут служить материалом в научных исследованиях, а также использоваться при анализе ЛРС, фармацевтических субстанций и ЛРП в контрольныхточках производства. Разработан лабораторный регламент производства референтного вещества «Шиконин-стандартный образец», который внедрен в практику фармацевтического производства.На основании исследований нового для отечественной фармации ЛРС,содержащего нафтохиноны, впервые составлены Инструкции по сбору и сушкекорней синяка русского, листьев ореха грецкого и листьев ореха чёрного, которые прошли экспертную оценку и утверждены в ФГБНУ ВИЛАР г.

Москва.В результате проведённого исследования предложены для внедрения вмедицинскую практику ЛРС «Синяка русского корни», «Ореха грецкого листья», «Ореха чёрного листья», новое отечественное референтное вещество«Шиконин-стандартный образец», новые фармацевтические субстанции «Орехагрецкого листьев экстракт жидкий 1:1» и «Ореха грецкого листьев экстракт с ухой». Разработаны и валидированы унифицированные методики качественного11и количественного анализа нафтохинонов в ЛРС и ЛРП, которые включены вразработанные проекты НД.Основные положения, выносимые на защиту1.

Методологические подходы к поиску перспективных источников нафтохинонов и стандартизации ЛРС и ЛРП, фармакологические свойствакоторых связаны с содержанием этой группы БАВ.2. Результаты морфолого-анатомического исследования ЛРС: коры орехагрецкого, коры и листьев ореха серого, коры, листьев и плодов орехачёрного, травы оносмы армянской, травы оносмы шелковистой, травыоносмы кавказской, корней синяка обыкновенного и корней синякаподорожникового.3.

Результаты фитохимического исследования ЛРС, содержащего нафтохиноны.4. Результаты экспериментальных исследований по разработке и усовершенствованию методик анализа нафтохинонов в ЛРС, фармацевтических субстанциях и лекарственных формах.5. Методологические подходы к исследованию растительных объектов,содержащих нафтохиноны, комплексной их переработке, получениюиндивидуальных соединений и нормированию показателей их качества.6. Экспериментальные данные и обоснование показателей и норм качества ЛРС, фармацевтических субстанций, включённых в проекты НД,лекарственных форм и БАД, содержащих нафтохиноны.Методология и методы исследованияТеоретическую основу исследования составили труды отечественных изарубежных авторов, отечественные и международные нормативные документы, регламентирующие качество ЛРС, фармацевтических субстанций и ЛРП,методики контроля, обобщение которых позволило выдвинуть рабочую гипотезу и разработать дизайн собственных исследований.При выполнении работы использовались методы сравнительного документального, фармакогностического, физико-химического, математическогоанализа и обработки результатов.12На основании данных литературы и результатов собственных исследований разработаны методологические подходы к изучению ЛРС, содержащегонафтохиноны, и получению фармацевтических субстанций и ЛРП из него,включающие в себя сочетание различных методов экстракции и изолированияцелевой группы веществ, а в ряде случаев применение ЛРС в нативном высушенном виде в составе сборов.