Автореферат (Научное обоснование технологии совместного получения аммифурина и анмарина плодов амми большой (Ammi Majus L.))

На правах рукописиКрутов Павел ВалентиновичНАУЧНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ СОВМЕСТНОГО ПОЛУЧЕНИЯАММИФУРИНА И АНМАРИНА ПЛОДОВ АММИ БОЛЬШОЙ(AMMI MAJUS L.)14.04.01 – технология получения лекарствАвторефератдиссертации на соискание ученой степеникандидата фармацевтических наукМосква–20161Диссертационная работа выполнена в Федеральном государственномбюджетном научном учреждении «Всероссийский научно-исследовательскийинститут лекарственных и ароматических растений» (ФГБНУ ВИЛАР)Научный руководитель:доктор фармацевтических наук Громакова Алла ИвановнаОфициальные оппоненты:Потанина Ольга Георгиевна – доктор фармацевтических наук, Федеральноегосударственное автономное образовательное учреждение высшего образования«Российский университет дружбы народов» (–ФГАОУ ВО «РУДН») Министерстваобразования и науки Российской Федерации, Центр научных исследованийи разработок Центра коллективного пользования (Научно-образовательный центр),директорКаухова Ирина Евгеньевна – доктор фармацевтических наук, профессор,ГБОУ ВПО «Санкт – Петербургская Государственная химико-фармацевтическаяакадемия» Минздрава России, кафедра промышленной технологии лекарственныхпрепаратов, заведующая кафедройВедущая организация: Федеральное государственное бюджетноеучреждение«Научно-исследовательскийинститутфармакологииВ.В.

Закусова».научноеимениЗащита состоится « »2016 года вчасов на заседании диссертационногосовета Д 208.040.09 при ГБОУ ВПО Первый МГМУ имени И.М. СеченоваМинистерства здравоохранения Российской Федерации по адресу: 119019, г. Москва,Никитский бульвар, д.13.С диссертацией можно ознакомиться в ЦНМБ ГБОУ ВПО Первый МГМУ имениИ.М.СеченоваМинистерстваздравоохраненияРоссийскойФедерациипо адресу:119034,г. Москва, Зубовский бульвар, д.37/1 и на сайте организацииwww.mma.ru.Автореферат разослан «___»__________2016 г.Ученый секретарьдиссертационного совета Д 208.040.09доктор фармацевтических наук,профессорДемина Наталья Борисовна2ВВЕДЕНИЕАктуальность темы.В настоящее время, несмотря на современные возможности химическогосинтеза при разработке лекарственных средств, растения остаются уникальнымисточником веществ, обладающих разнообразными видами фармакологическойактивности.Рациональное использование лекарственного растительного сырья и разработкаресурсосберегающих технологий для повышения экономической эффективностифитохимического производства является актуальной задачей фармацевтическойнауки.

В этом плане к числу перспективных видов лекарственного растительногосырья относятся плоды амми большой, которые являются источником получениялекарственных субстанций аммифурин и анмарин.Аммифурин представляет собой сумму трех фурокумаринов - изопимпинеллина,бергаптена, ксантотоксина. Данный лекарственный препарат разрешен длямедицинского применения в качестве фотосенсибилизирующего средства привитилиго, тотальной и гнездной плешивости.Анмарин – оригинальный отечественный лекарственный препарат, разрешенныйдля медицинского применения в качестве антигрибкового средства. Анмаринпредставляет собой сумму двух изомеров 5I-изопропенил-4I, 5I-дигидропсоралена и5I-изопропилпсоралена, получаемую путем дегидратации мармезина.Степень разработанности темы исследования.В настоящее время существуют технологии получения субстанций аммифурини анмарин из плодов амми большой.

Однако их существенными недостаткамиявляются сравнительно высокие энергоемкость, трудозатраты, расход основногосырья и материалов, реализация данных технологий не позволяет получатьодновременно две субстанции в едином технологическом процессе.Таким образом, актуальным является изучение и оптимизация способоввыделения, фракционирования и очистки фурокумаринов плодов амми большой,позволяющих создать экономически эффективную комплексную технологиюполучения лекарственных субстанций фотосенсибилизирующего и противогрибковогодействия со стабильными показателями качества.Цель исследованияНаучное обоснование возможности совместного получения субстанцийаммифурин и анмарин из плодов амми большой и разработка комплекснойфармацевтической технологии.3Задачи исследования:1.

Определить экспериментально содержание и соотношение фурокумариноваммифурина и анмарина в плодах амми большой и адаптировать эти аналитическиеметоды для обеспечения стадийного контроля в технологическом процессе;2. Определить оптимальные условия экстракции суммы фурокумаринов изплодов амми большой;3.

Обосновать, оптимизировать и экспериментально подтвердить параметрыспособа выделения, фракционирования и очистки фурокумаринов субстанцийаммифурин и анмарин;4. Разработать и оформить нормативно-техническую документацию,промышленные регламенты на комплексную технологию получения субстанцийаммифурин и анмарин;5. Подтвердить по результатам технико-экономического расчета эффективностькомплексной технологии получения аммифурина и анмарина из плодов аммибольшой.Научная новизна результатов работыВпервые научно обоснован, разработан и внедрен способ комплекснойпереработки плодов амми большой.Исследовано и экспериментально подтверждено содержание, и соотношениефурокумаринов в сырье, полупродуктах и готовом продукте физико-химическимиметодами (спектрофотометрии, ВЭЖХ и ЯМР-спектроскопии).Впервые определены экстрагенты и оптимальные параметры процессаэкстракции фурокумаринов субстанций аммифурин и анмарин в единомтехнологическом процессе.Впервые обоснованы, оптимизированы и экспериментально подтвержденыпараметры способа выделения, фракционирования и очистки фурокумаринов втехнологии совместного получения субстанций аммифурин и анмарин.Подтверждена по результатам технико-экономического расчета эффективностькомплексной технологии переработки плодов амми большой.Приоритет научных исследований подтвержден заявкой на изобретение №2014141788 от 16.10.2014 г «Способ комплексной переработки плодов аммибольшой».Теоретическая значимость работыАнализ информационно-аналитического массива обогатит сведения и знания поизучению лекарственных растений, а так же по усовершенствованию технологическихметодов выделения биологически активных веществ.4Практическая значимость результатов работы.На основании проведенных исследований разработаны, утверждены и внедрены:- Промышленный регламент ПР №58171769-53-2015 на производствосубстанции аммифурин из плодов амми большой;- Промышленный регламент ПР №58171769-54-2015 на производствосубстанции анмарин из плодов амми большой.- Получен экономический эффект 586393 рубля при переработке одной тоннысырья по способу комплексной переработки плодов амми большой.Методология и методы исследования.Методология исследования построена на анализе и обобщении литературныхданных, оценке степени разработанности и актуальности темы.

Методологическаяоснова работы при разработке способа выделения и очистки фурокумариновзаключалась в изучении физико-химических свойств фурокумаринов, подбореоптимальных условий. Подбор оптимальных условий экстракции, выделения иочистки фурокумаринов проводились в лабораторных условиях, валидациятехнологического процесса, проводилась на промышленном оборудовании цехафитохимии ЗАО «Фармцентр ВИЛАР».

Контроль качества сырья, промежуточных иконечных продуктов из плодов амми большой осуществляли в аналитическойлаборатории.Степень достоверности результатов.Достоверность полученных результатов обусловлена большим объемомпроведенных экспериментальных исследований и использованием современныхфизико-химических, химических, фармакологических методов исследования, чтопозволяет получать достоверные и воспроизводимые результаты. Проведенныеисследования отражены в виде таблиц, графиков и рисунков.Апробация диссертацииОсновные положения диссертации представлены и доложены на II научнопрактической конференции с международным участием «Молодые ученые и фармацияXXI века» (Москва, 2014), VIII международной научно-практической конференции«Современные концепции научных исследований» (Москва, 2014).Апробация работы проведена на заседании секции по поиску биологическиактивных веществ, технологии получения лекарств, фармацевтической химии,фармакогнозии и биотехнологии (в том числе и бионанотехнологии) Ученого советаФедерального государственного бюджетного научного учреждения «Всероссийскийнаучно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений» (5декабря 2014 г., Москва) и на межкафедральной конференции фармацевтическогофакультета Первого МГМУ им.

И.М. Сеченова (22 декабря 2015г., Москва.)5Личный вклад автораАвтору принадлежит ведущая роль в выборе направления исследования,постановке цели и задач, выборе объектов исследования, проведенииэкспериментальных исследований, обобщению полученных данных и ихстатистической обработке.Связь задач исследований с проблемным планом фармацевтической наукиДиссертационная работа выполнена в соответствии с «Программойфундаментальных и приоритетныхприкладных исследований Всероссийскогонаучно-исследовательского института лекарственных и ароматических растений понаучному обеспечению развития агропромышленного комплекса (АПК) РоссийскойФедерации» № 0576-2014-0013.Основные положения, выносимые на защиту- результаты изучения содержания и соотношения фурокумаринов в плодахамми большой, полупродуктах и готовом продукте;- результаты подбора экстрагента, оптимальных условий экстракции суммыфурокумаринов плодов амми большой;- результаты оптимизации параметров выделения, фракционирования и очисткифурокумаринов субстанций аммифурин и анмарин;- результаты оптимизации технологии получения субстанций аммифурин ианмарин;- результаты технико-экономического расчета эффективности, комплекснойфармацевтической технологии получения субстанций аммифурин и анмарин изплодов амми большой.Соответствие диссертации паспорту научной специальностиНаучные положения диссертации соответствуют паспорту специальности14.04.01 – технология получения лекарств.

Результаты проведенных исследованийсоответствуют пунктам 3 и 8 паспорта специальности.ПубликацииПо материалам диссертации опубликовано 5 печатных работ из них 3 в журналахвходящих в перечень периодических изданий рецензируемых Высшей аттестационнойкомиссией РФ, оформлена заявка на изобретение.Объем и структура диссертацииДиссертационная работа изложена на 114 страницах машинописного текста,состоит из введения, обзора литературы (глава 1), четырех глав экспериментальнойчасти, выводов, списка литературы, включающего 86 источников, в том числе 26иностранных, приложений.

Работа содержит 16 рисунков и 20 таблиц.6СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫМатериалы и методы.Объектами исследования является лекарственное растительное сырье - плодыамми большой, отвечающие требованиям НД, заготовленныена территорииБелгородской области в 2009-2011 гг. и способы переработки данного вида сырья.Оборудование.Извлечение фурокумаринов из плодов амми большой проводили в экстракторахиз нержавеющей стали (Россия), концентрирование извлечений осуществляли навакуум-выпарных аппаратах Simax (Чехия), фильтрование экстрактов на друкфильтрах из нержавеющей стали (Россия), избирательную жидкофазную экстракциюпроводили в стеклянных реакторахSimax (Чехия). В работе использовалипромежуточные сборники и мерники из нержавеющей стали различного объема.Фотографии цельных и размолотых плодов амми большой были получены настереомикроскопе MOTIC-CMZ-161 (Испания) с увеличением х30.Размер частиц цельного и измельченного сырья осуществляли на лазерноманализаторе LS 13320 Beckman Coulter.Определение оптической плотности проводили на спектрофотометре СФ-2000(Россия) и Cary100Scan (Varian).ВЭЖХ анализ количественного определения мармезина в сырье осуществлялина жидкостном хроматографе Waters с УФ-детектором, хроматографической колонкойиз нержавеющей стали Кромасил С18, размером 250x4,0 мм и размером частиц 7 мкм.В качестве подвижной фазы использовали ацетонитрил:1% уксусная кислота (2:18).Скорость подачи элюента 1,0 мл/мин.