Автореферат (Разработка методик химико-токсикологического исследования синтетических производных катинона)

На правах рукописиГребенкина Екатерина ВикторовнаРАЗРАБОТКА МЕТОДИК ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОГОИССЛЕДОВАНИЯ СИНТЕТИЧЕСКИХ ПРОИЗВОДНЫХ КАТИНОНА14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозияАВТОРЕФЕРАТдиссертации на соискание ученой степеникандидата фармацевтических наукМосква – 2019Диссертационная работа выполнена в федеральном государственном автономномобразовательномучреждениивысшегообразованияПервыйМосковскийгосударственный медицинский университет имени И.М.

Сеченова Министерстваздравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет)Научный руководитель:кандидат фармацевтических наук, профессорИзотов Борис НиколаевичОфициальные оппоненты:Калёкин Роман Анатольевич – доктор фармацевтических наук, Федеральноегосударственное бюджетное учреждение «Российский центр судебно-медицинскойэкспертизы» Министерства здравоохранения Российской Федерации, главный научныйсотрудникГорбачева Татьяна Васильевна – кандидат фармацевтических наук, СанктПетербургское государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Бюросудебно-медицинской экспертизы», заведующая судебно-химическим отделением,судебный эксперт-химикВедущая организация: Федеральное государственное бюджетное образовательноеучреждение высшего образования «Ярославский государственный медицинскийуниверситет» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииЗащита диссертации состоится «»2019 г.

в 14.00 часов назаседании Диссертационного совета Д 208.040.09 при ФГАОУ ВО Первый Московскийгосударственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Министерстваздравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет) по адресу: 119019,г. Москва, Никитский бульвар, д. 13С диссертацией можно ознакомиться в ЦНМБ ФГАОУ ВО Первый МГМУ им.И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет) по адресу: 119034,г.

Москва, Зубовский бульвар, д. 37/1 и на сайте организации: www.sechenov.ruАвтореферат разослан «»Ученый секретарьдиссертационного совета Д 208.040.09доктор фармацевтических наук, профессор2019 г.Демина Наталья Борисовна3ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫАктуальность темы исследованияЕжегодные доклады Управления Организации Объединенных Наций понаркотикам и преступности (UNODC) и Европейского центра мониторинганаркотиков и наркозависимости (EMCDDA) свидетельствуют о динамическом ростенезаконного оборота новых психоактивных веществ (ПАВ).Новые ПАВ, как правило, синтетического происхождения, разрабатываются ивнедряются в незаконный оборот в качестве альтернативы контролируемых намеждународном уровне веществ и известны как «дизайнерские наркотики».Актуальность диссертационного исследования определяется прежде всего тем,что за последние годы отмечен резкий рост изъятий, тяжелых интоксикаций (в томчисле с летальными исходами) синтетическими катинонами – новой группойдизайнерских наркотиков, появившейся в результате структурной модификациифенилэтиламина.

Основой для синтеза многих дизайнерских синтетическихкатинонов является психоактивный протоалкалоид катин, который содержится влистьях вечнозеленого растения кат (Catha edulis), обладает психостимулирующим ианальгезирующим эффектами, что и привело к широкому распространению жеваниясвежих листьев в регионе произрастания.Анализ динамики прироста новых ПАВ в Российской Федерации за последниегоды показывает, что именно альфа-пирролидинопентиофенон (α-PVP) и 3,4метилендиоксипировалерон(MDPV)являютсянаиболеераспространеннымисинтетическими производными продукта окисления катина – катинона.Отчетные данные за последние годы бюро судебно-медицинской экспертизы ихимико-токсикологических лабораторий наркологических диспансеров (больниц) вомногих областях Российской Федерации показывают, что α-PVP вышел на первоеместо по числу его выявления при злоупотреблениях психоактивными веществами исмертельных случаев от передозировок новыми ПАВ.С учетом вышеизложенного, разработка системы проведения химикотоксикологического исследования (ХТИ) для обнаружения токсикологическизначимых синтетических катинонов в моче актуальна на сегодняшний день.Степень разработки темы исследованияВнедрение системы количественной оценки контролируемых и запрещенныхвеществ является крайне важной задачей при проведении ХТИ.

Однако, до4проведения настоящего исследования работа по экспериментальному определениюуровня пороговых значений («сut-off») наркотических средств, психотропныхвеществ и их метаболитов (в том числе для синтетических катинонов) в РоссийскойФедерации не проводилась.Цель исследования – разработка методик ХТИ для обнаружения наиболеечасто встречающихся в судебно-химической и химико-токсикологической практикесинтетических катинонов и их метаболитов в моче.Для достижения цели были решены следующие задачи:1) изучить свойства токсикологически значимых синтетических производныхкатинона и их метаболитов с применением программного обеспечения ACD/Labs иплатформы ACD/Рercepta и провести критический анализ литературных источниково методах их идентификации с учетом полученных данных;2) рассчитатьуровеньиммунохроматографическогопороговогозначенияисследования,(«cut-off»)используядляметодикиROC-кривыеистатистический анализ кривых распределения с учетом преваленса синтетическихкатинонов для повышения достоверности их обнаружения в моче;3) оптимизировать методику иммунохроматографического исследования сприменением аналитического комплекса, включающего анализатор IK 200609 иэкспериментальные реагенты для иммунохроматографического анализа (ИХА) насинтетические катиноны, для проведения ХТИ и дать аналитическую оценку егоприменения в практике;4) оптимизировать условия изолирования из мочи α-PVP и MDPV и ихметаболитов, используя расчетные данные программного обеспечения ACD/Labs иплатформы ACD/Рercepta, и методику хромато-масс-спектрометрического анализа сучетом полученных данных ИХА изучаемых аналитов при проведении ХТИ;5) оценить прогностическую и экономическую эффективность разработанныхметодик ХТИ на синтетические производные катинона.Научная новизнаВпервые экспериментально установлен уровень порогового значения («cutoff») с применением ROC-анализа для иммунохроматографических реагентов сцельюобнаружениясинтетическихкатиноноввмоче.Проведенаоценкадиагностической эффективности исследуемых реагентов для анализатора IK 200609.Для ИХА применён статистический анализ кривых распределения и установлен5обоснованный уровень порогового значения («cut-off») с учетом статистикираспространения синтетических катинонов в регионах Российской Федерации.Разработана методика пробоподготовки и подобраны оптимальные условиядля анализа α-PVP и MDPV и их метаболитов в моче методом газовойхроматографии с масс-селективным детектированием (ГХ-МС) на уровне пороговогозначения 100 нг/мл по нативным соединениям.

Дана оценка экономическойэффективности предложенной схемы проведения ХТИ синтетических производныхкатинона.Теоретическая значимость исследованияВнастоящееметрологическоговремявобеспеченияРоссийскойполученияФедерацииотсутствуетдостоверныхсистемарезультатовоколичественном содержании в биообъектах контролируемых наркотических средстви их метаболитов, оборот которых запрещен на территории страны. На основанииполученных результатов диссертационного исследования по установлению уровняпорогового значения (содержания) «cut-off» для иммунохроматографическихреагентов с учетом преваленса, выработан подход к обоснованию верификационныхкритериев оценки результатов предварительных и подтверждающих методовхимико-токсикологического анализа психоактивных веществ в биообъектах, обороткоторых запрещен на территории страны.

Обосновано применение метода ГХ-МСдля анализа α-PVP и MDPV на уровне порогового значения 100 нг/мл с цельюоптимизации выявляемости контролируемых ПАВ из группы синтетическихпроизводных катинона.Практическая значимость исследованияНа основании проведенных исследований рассчитан уровень пороговогозначения («cut-off») для иммунохроматографических реагентов (100 нг/мл длясинтетических производных катинона).

Идентифицированы и охарактеризованымасс-спектры нативных соединений и основных метаболитов изучаемых веществ вбиобъектах. По значению S/N (отношение аналитического сигнала вещества куровню шумов) для α-PVP и MDPV достигнут предел обнаружения методомхромато-масс-спектрометрии 30 нг/мл. Показано, что разработанные методикианализа могут использоваться при решении поставленных задач – установленияфакта потребления синтетических производных катинона, а также состоянияопьянения ими. Доказана экономическая и прогностическая эффективность6использованияпредложеннойсхемыхимико-токсикологическогоанализасинтетических производных катинона.Основные положения, выносимые на защиту1.

Методика инструментального ИХА на анализаторе IK 200609 с реагентами дляобнаружения синтетических катинонов в моче при проведении ХТИ.2. Результаты оценки диагностической эффективности исследуемых реагентов наоснове экспериментальных данных проведенного ИХА.3. МетодикаприменениемустановленияуровнейROC-кривыхипороговогоанализазначениякривых(«cut-off»)распределениясдляиммунохроматографических реагентов на синтетические катиноны.4. Оптимизированнаяметодикапробоподготовкиихромато-масс-спектрометрического исследования α-PVP и MDPV (и их метаболитов) в моче науровне порогового значения 100 нг/мл.5. Результаты оценки экономической эффективности предложенной схемыпроведения ХТИ синтетических производных катинона.Методология и методы исследованияМетодологическую основу исследования составили труды зарубежных ироссийских ученых: M.