Диссертация (Нарушение функции подоцитов и механизмов самозащиты почки - значение в оценке активности и прогноза хронического гломерулонефрита), страница 9

Дефицит ИЛ-10 определяется также упациетов с хронической посттрансплантационной нефропатией и у пациентов схроническим тубуло-интерстициальным нефритом [5, 14].Полученные данные свидетельствуют о важной роли ИЛ-10 как основногоTh2 цитокина и продукта регуляторных Т-регуляторных клеток в защите почки отпролонгированного повреждения, при его дефиците развиваются наиболеетяжелые, прогностически неблагоприятные формы заболевания почек.1.4.1.3ИЛ-10 в лечении экспериментального гломерулонефритаЭффективность применения ИЛ-10 для лечения гломерулонефрита былаизучена в экспериментальных моделях. Fouqueray B.

и соавт. оценилитерапевтическую роль ИЛ-10 при нефротоксическом сывороточном нефрите –заболевании, ассоциированном с преимущественным Th1-иммунным ответом,характеризующимся пролиферацией мезангиальных клеток, инфильтрацией45клубочковлейкоцитамиимакрофагами.Укрыс,получившихИЛ-10профилактически - за сутки до инициации нефрита, величина суточнойпротеинурии была на 75% ниже, чем в контроле. При введении мезангиальногогенного вектора ИЛ-10 после развития нефрита получен слабый эффект,протеинурия уменьшилась на 23%. Однако при использовании другой техникивведения гена ИЛ-10 – с использованием ДНК-содержащих HVJ-липосом,удалось уменьшить величину протеинурии на 55% [95,96].В модели нефрита у мышей назначение ИЛ-10 успешно предотвращалообразование полулуний в клубочках, отложения фибрина, накопление Тлимфоцитов и макрофагов и приводило к снижению протеинурии и улучшениюфункциипочек[301].ИсследованияэффектаэкзогенногоИЛ-10приэкспериментальном анти-Thy1 мезангиопролиферативном нефрите подтвердилине только противовоспалительную, но и антипролиферативную роль ИЛ-10.Введение ИЛ-10 привело к уменьшению пролиферации мезангиальных клеток,экспрессии ИЛ-1 и ICAM-1 в клубочках [147].У крыс через сутки послеоднократного введения ИЛ-10 отмечалось значительное снижение инфильтрацииклубочков макрофагами (↓CD14) и сохранения целостности клубочка (↓ММР).

Вэтом исследовании показано, что несмотря на короткий период полураспада(около 2мин), ИЛ-10 может оказывать действие даже через 24 часа послеоднократного внутривенного введения [251].Человеческий рекомбинантный ИЛ-10 (илдекакин/Теновил) протестировану здоровых лиц и у пациентов с различными аутоиммунными заболеваниями:болезнью Крона, ревматоидным артритом, псориазом и после трансплантации.ИЛ-10 в дозе до 25g/кг хорошо переносится и не имеет серьезных побочныхэффектов, в дозе до 100 g/кг у отдельных лиц отмечается гриппоподобныйсиндром слабой или умеренной степени выраженности [209].46Роль регуляторных иммунных клеток в механизмах «самозащиты1.4.1.4почки»Некоторыми работами последних лет показано, что некоторые клеткивоспалительногоинфильтрататиграютзащитную/протективнуюроль(регуляторные Т лимфоциты, альтернативные макрофагов и дендритные клетки) впроцессе воспаления, в том числе почечного.

Так, например, при пуромицинаминогликозидном нефрозе (PAN) у кроликов установлено, что отдельныеподтипы CD4+ Т клеток являются протективными, блокируют эффекторные Тлимфоциты и тормозят развитие воспаления, удаление CD4+ клеток приводит кбольшему повреждению ткани почки [331].CD4+CD25+ (Tрег) наиболее хорошо одновременно изученный подтипрегуляторных лимфоцитов.

Трег, дифференцировка которых происходит втимусе, называют «натуральными». CD4+ клетки, которые становятся Трег напериферии, относятся к «адаптивным» Трег. Основная функция Т регуляторныхклеток–антигенам,обеспечениечтоимеетиммунологическойособенноважноетолерантностизначениеприксобственнымаутоиммунныхзаболеваниях. Основным регулятором дифференцировки этого фенотипа клетокявляется транскрипционный фактор forkhead box P3 (FoxP3). При заболеванияхпочек адаптивные регуляторные клетки играют важную роль. Трег могутоказывать подавлять активацию эффекторных и цитотоксических Т-лимфоцитовлибопрямо,либоопосредованноспомощьюактивациивыработкипротивовоспалительных цитокинов [234,270]. Трег могут влиять также и на рядругих иммунных клеток в инфильтрате (макрофагов, дендритных клеток, Влимфоцитов и нейтрофилов, способствуя изменению провоспалительногофенотипа на противовоспалительный [105,175,180, 204, 295].Показана протективная роль Трег клеток при клеточно-опосредованномповреждении почечной ткани в модели анти-БМК-нефрита [339].

При введенииСD4+CD25+ мышам с нефритом функциональные и гистологические признаки47почечного повреждения значительно уменьшаются по сравнению с таковыми умышей, которым вводились CD4+CD25- Т клетки.Другими важными клетками воспалительного инфильтрата, которые могутопределять исход воспалительного процесса, являются макрофаги. Хорошоизвестна роль макрофагов в механизмах прогрессирования заболеваний почек,однако появились данные о том, что макрофаги могут иметь протективноезначение в процессе репарации почечной ткани после повреждения прииммунных и неиммунных заболеваниях почек.

Было установлено, что привоспалении в инфильтрате могут одновременно сосуществовать функциональноразличные популяции макрофагов. Наряду с активированными классическимпутем М1 макрофагами, секретирующими провоспалительные медиаторы Th1иммунного ответа, существует и другой тип макрофагов, которые секретируютпротивовоспалительныецитокины,ингибируютпролиферациюТклеток,запускают ангиогенез и играют роль в заживлении и тканевом ремоделировании.Они относятся к «альтернативному» фенотипу – М2. Альтернативный путьактивации макрофагов происходит под действиемTh2 цитокинов,а такжеимунных комплексов в комбинации с ИЛ-1 или ЛПС, а также при добавленииИЛ-10, ТФР-, глюкокортикоидов [107,148,192,193,194,196].

В результатеформируется М2 иммуногрегуляторный, иммуносупрессивный фенотип, которыйучаствует в разрешении воспалительного процесса и репарации [192,329]. М2макрофаги подавляют секрецию провоспалительных медиаторов иммуннымиклетками, а также характеризуются повышенной способностью к фагоцитозу иусиленнойпродукциейпротивовоспалительныхитрофическихфакторов:секретируют ИЛ-1ра, аргиназу-1 (тормозящую продукцию NO), ТФР- [213,338].При повреждении постоянное привлечение макрофагов под действиемразличных цитокинов и факторов роста является физиологическим процессом испособствует заживлению. Однако инициальный процесс заживления может статьпатологическим и развиваться по пути необратимого фиброза и нарушенияструктурыткани.Прогрессированиеиммуно-опосредованногопочечного48заболевания зависит от взаимодействия дендритических клеток, макрофагов и ТклетокинфильтратаНапример,[59,132,161].дифференциацияТклетокпреимущественно в Th1 приводит к классической активации макрофагов ивыработкепровоспалительныхмедиаторовповреждения,развитиюгиперчувствительности замедленного типа и образованию полулуний.

Наоборот,модуляция фенотипа макрофагов с переходом на альтернативный фенотип М2под действием противовоспалительных факторов уменьшает повреждение почкипригломерулонефрите[26,348],отторжениитрансплантата[345]иинтерстициальном фиброзе [228]. Так, Wang и соавт. показали, что поляризациямакрофагов ex vivo и введение М2 мышам с воспалительными заболеваниямиуменьшает повреждение тканей и стимулирует заживление. Введение М2макрофагов в почку мышам через 5 дней после индукции заболевания взначительно большей степени защищало ткань почки от повреждения, чем уконтрольных мышей.

Хотя введенные противовоспалительные макрофагисоставляют всего лишь 15% всех макрофагов, изученных в клубочке, онизначительно снижают инфильтрацию и активацию собственных макрофаговклубочков [329, 336,337].Таким образом, процессы иммунного воспаления представляют собойпостоянное балансирование между повреждением клеток и пролиферацией,накоплением интерстициального матрикса и ремоделированием ткани. В томчисле резидентные клетки почечной ткани обладают внутренними резервами длясамовосстановления и разрешения воспаления.1.4.2 Внутриклеточная защита: белки теплового шокаБелки теплового шока (БТШ) относятся к высококонсервативным молекулам,которыевыполняютрядзащитныхфункций,включаяцитопротекцию,внутриклеточный синтез и сборку белков [116]. БТШ могут играть важную рольво внутри- и внеклеточной защите почечной ткани.

Конституциональноэкспрессирующиеся белки контролируют созревание и обмен внутриклеточных49белков и играют важную роль в поддержании цлостности клетки. Внутри клеткиБТШучаствуютвформированиивторичнойитретичнойструктурывнутриклеточных белков, а также в процессах восстановления или удаленияповрежденных,денатурированныхбелковыхмолекулилиихагрегатов,токсичных для клетки. Индуцируемые белки синтезируются в ответ наповреждение: воспаление, ишемию, оксидантный стресс [181,245]. Они главнымобразом играют роль внутриклеточных шаперонов [6].

Однако при хроническомвоспалении эти белки могут высвобождаться из клеток и выполнять рядимунорегуляторных функций.Регуляция синтеза БТШ в клетке осуществляется путем взаимодействияфактора транскрипции БТШ (HSF1) с Hsp элементом соответствующего генапромотора [319]. HSF1 существует в цитоплазме клетки в виде латентноймономерной молекулы.